實驗流程?

1. ?樣本準備?

• 新鮮組織速凍：-25℃冷凍箱速凍3-5分鐘，切8μm厚度切片
  。

• 直接固定：切片經4%多聚甲醛或95%乙醇固定10分鐘，蒸餾水沖洗
  。

2. ?染色步驟?

• ?焦油紫/硫堇染色?：浸入1%焦油紫或硫堇染液10分鐘至1小時（根據組織類型調整）
  。

• ?分色?：70%酒精分化數秒至數分鐘，顯微鏡下控制至背景透明、Nissl小體清晰
  。

3. ?脫水封片?

• 梯度酒精脫水（70%→80%→95%→無水乙醇），二甲苯透明，中性樹膠封固
  。

?關鍵注意事項?

• ?染色控制?：分色是核心步驟，需顯微鏡下實時觀察避免過度脫色
  。

• ?結果判讀?：

• ?陽性信號?：Nissl小體呈深紫色（神經元胞質內顆粒狀結構）。

• ?背景?：應為無色或淺灰色，否則需延長分色時間
  。

?與石蠟切片對比?

• ?優勢?：冰凍切片保留更多脂溶性成分，適合快速檢測
  。

• ?局限性?：組織形態略腫脹，需經驗判讀
  。

如需保存，建議轉換為石蠟切片（需避免解凍后固定）