ProteinA親和層析是利用 Protein A配基與目標(biāo)抗體具有專一結(jié)合力作用從而達(dá)到分離純化抗體的目的。是抗體藥物純化應(yīng)用廣泛的方法之一。
Gtrap Protein A 4FF 抗體親和填料重力柱是Protein A Chromrose 4FF裝填的不同規(guī)格的重力柱,可用于手動(dòng)操作。
Protein A Chromrose 4FF 以高度交聯(lián)的瓊脂糖凝膠為基質(zhì),偶聯(lián)高耐堿ProteinA,具有以下特點(diǎn):
》高耐堿:能耐受0.1 M NaOH 進(jìn)行在位清洗;具有優(yōu)異的物理化學(xué)穩(wěn)定性,配基不容易脫落,使用壽命長(zhǎng);
》高載量:動(dòng)態(tài)載量高達(dá)60mg人IgG/mL。

Gtrap Protein A 4FF 抗體親和填料重力柱中Protein A Chromrose 4FF的使用方法如下
(1)沖洗并平衡:使用之前用平衡緩沖液替換層析柱中20%乙醇保存液;依次用洗脫液(如100mM Gly,pH=3)和平衡液(如20mMPBS,pH=7.4)沖洗并平衡HiQumn®柱;
(2)進(jìn)樣:樣品為抗體發(fā)酵液,按照10%流傳下的DBC0.8倍以下載量進(jìn)樣;樣品停留時(shí)間大于5min;
(3)淋洗:采用平衡液(如 20mM PBS,pH=7.4)清洗5CV(柱體積);
(4)洗脫:采用檸檬酸、醋酸或Glycine(如 100 mM Gly,pH=3.0)等作為洗脫液清洗5CV至基線平衡;
(5)清洗:1M醋酸清洗5CV;
(6)CIP:0.1~0.5MNa0H溶液,清洗5 CV至基線平衡;
(7)再平衡:采用平衡液(如20mMPBS,pH=7.4)清洗5CV至基線平衡;
(8)保存:使用結(jié)束后,先用純水替換分析柱中緩沖鹽,然后用20%乙醇保存。
注意:使用過程中,所用樣品及流動(dòng)相均必須用孔徑為0.45um濾膜過濾。
科諾賽是正帆百泰(蘇州)有限公司的控股子公司,隸屬于A股上市公司正帆科技(SH688596 科創(chuàng)板)。科諾賽是一家以層析純化產(chǎn)品為核心的技術(shù)企業(yè),專注于為生物制藥領(lǐng)域下游提供分離純化解決方案。憑借持續(xù)的研發(fā)創(chuàng)新和深厚的技術(shù)積累,科諾賽已成功搭建聚合物和瓊脂糖兩大研發(fā)技術(shù)平臺(tái),開發(fā)出聚苯乙烯/二乙烯基苯基質(zhì)(PS-DVB)、聚甲基丙烯酸酯基質(zhì)(PMMA)、瓊脂糖基質(zhì)、葡聚糖基質(zhì)四大類層析填料產(chǎn)品,同時(shí)提供規(guī)格多樣的層析柱及寡核苷酸固相合成載體,全面覆蓋下游純化的不同階段和應(yīng)用場(chǎng)景,產(chǎn)品性能均可對(duì)標(biāo)國(guó)際品牌。
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