益測黃曲霉毒素B1檢測ELISA試劑盒

益測黃曲霉毒素B1檢測ELISA試劑盒

概要

黃曲霉毒素是黃曲霉和寄生曲霉的有毒的代謝產物，主要存在于谷物、堅果和飼料中。1993年黃曲霉毒素B1被世界衛生組織（WHO）的癌癥研究機構劃定為Ⅰ類致癌物，是一類毒性急強的劇毒物質。它被證明對人和動物的肝臟、腎臟等組織和器官具有很大的危害。中國標準規定：黃曲霉毒素B1在玉米、大米、小麥中限糧分別不得超過20、10、5μg/kg，各種飼料中黃曲霉毒素B1的限糧標準為10-50μg/kg。

原理

測定的基礎是抗原-抗體反應。微孔板上包被有抗抗體。加入黃曲霉毒素B1（AF-B1）標準品或樣品、酶標抗原和抗體后，游離的黃曲霉毒素B1與酶標抗原競爭結合抗體，抗體或抗體結合物與固定在微孔板上的抗抗體再結合，沒有結合的標準品、酶標抗原及抗體被洗去，加入TMB底物顯藍色，加入終止液后顏色由藍變黃，用酶標儀在450nm處檢測，吸光值與樣品中黃曲霉毒素B1含量成負相關，與標準曲線比較即可得出黃曲霉毒素B1的含量。

試劑盒的組成

包被有抗抗體的96微孔板：1塊（96 孔，12條×8 孔）

AFB1標準品：0 ng/mL、0.1 ng/mL、 0.5ng/mL、1.0ng/mL、2.0ng/mL                     1瓶 × 1.0mL

AF-B1酶標抗原               1 瓶 ×10mL

AF-B1抗體                   1 瓶 ×10mL

AF-B1稀釋緩沖液A：          1 瓶 × 50mL

AF-B1稀釋緩沖液B：          1 瓶 × 50mL

10倍濃縮洗滌液              1 瓶 × 50mL

顯色底物TMB：               1 瓶 × 17mL

終止液：                     1 瓶 × 7mL

試劑盒說明書：               1份

質檢報告：                   1份

需要的儀器、試劑

1）儀器    

酶標儀 450nm（iELisa全自動酶標儀或相當者）

微量移液器：20μL-200μL單道，100μL-1000μL單道, 50μL-300μL八道

多功能旋轉混合器（或者搖床、高速均質器）

酶標板振蕩器

渦旋混合器

氮氣吹干儀

50mL離心管

1.5mL離心管

離心機

定性濾紙

過濾漏斗

天平：感量0.01g

試劑

樣品提取液70%甲醇：取700mL甲醇，加300mL純水，混勻。

純水（蒸餾水、去離子水）、正己烷、三綠甲烷、甲醇

樣品處理

5.1谷物（玉米、小麥、大麥、大米、大豆）：

稱取5.0g粉碎樣品于50mL離心管中，加入25.0mL樣品提取液70%甲醇,置于多功能旋轉混合器上振蕩10分鐘（或使用高速均質器均質3分鐘，或高速渦旋提取10分鐘）。

將提取液用普通濾紙過濾，吸取200μL濾液置于1.5mL離心管中，加入300μL AF-B1稀釋緩沖液A，用渦旋混合器混勻。