一、廠家歷史與專業背景

NEPA 電穿孔儀由日本 Nepa Gene 公司研發生產。該公司成立于 2001 年 2 月，總部位于千葉縣市川市，長期專注于電穿孔、電細胞融合及聲穿孔設備的研發與制造。

Nepa Gene 在電穿孔領域有超過 30 年的技術積累。在推出 NEPA21 之前，公司的 CUY21 系列電轉染儀已在研究領域積累了較深厚的用戶基礎，被數百篇文獻引用，其中包括 Nature、Cell、PNAS、Genes & Development 等高水平期刊。2011 年，Nepa Gene 推出新一代全能型 NEPA21 高效基因轉染系統，與傳統的電轉儀相比，采用全新設計的電轉程序，特別適用于難轉染細胞、離體組織或動物活體的轉染。

二、Bulldog Bio NEPA 電穿孔儀，設備系統功能特性

1. 四步法電轉程序

NEPA21 采用全新的四步法電轉程序架構：

這一設計將成孔和導入過程分離，允許研究者根據細胞類型和目標分子分別優化參數，配合電壓衰減設計，可在獲得較高轉染效率的同時提高細胞存活率。

2. 適用于多種轉染體系

NEPA21 可同時覆蓋體外和活體轉染應用：

• 懸浮細胞轉染：適用于原代細胞、干細胞、免疫細胞、血液細胞等各類難轉染細胞

• 貼壁細胞轉染：可直接在培養板中對貼壁細胞進行原位轉染，無需消化和再貼壁步驟，這對某些種類細胞的存活率具有重要意義

• 離體組織轉染：組織切片、腦切片、器官、胚胎等

• 活體轉染：大腦、視網膜、角膜、肌肉、皮膚、肝臟、腎臟等組織

3. 無需專用轉染試劑，運行成本較低

與傳統電轉儀需要昂貴專用試劑盒不同，NEPA21 在懸浮狀態下轉染只需使用電轉杯，無需特殊轉染試劑輔助。NEPA21 每次反應成本約 2.60 美元，而某些競品專用試劑盒每反應需 21-25 美元。

4. 參數精確控制

• 成孔脈沖電壓 0.1-300V（0.1V 遞增），脈沖次數 0-9；導入脈沖電壓 0.1-99.9V（0.1V 遞增），脈沖次數 0-99

• 電壓衰減比率 0-99% 可調

• 具備樣品電阻測量功能，可在程序運行前測量并顯示樣品電阻

• 可實時查看轉染過程中的電壓、電流、電阻、輸出功率、波形等數據

• 最大程序存儲 99 個，具備細胞轉染數據庫

三、Bulldog Bio NEPA 電穿孔儀，用途與應用范圍

體外細胞轉染：

• 難轉染細胞：原代免疫細胞、干細胞、神經細胞、血液細胞等

• 懸浮及貼壁細胞均可處理，不依賴特定轉染試劑

活體與離體轉染：

• 小鼠/大鼠的大腦、視網膜、角膜、肌肉、皮膚、肝臟、腎臟、睪丸、卵巢等組織

• 受精卵、胚胎（可用于基因編輯動物制備）

• 目前已應用于鼠卵、魚卵、爪蟾、蠶卵、絨猴等物種

類器官與基因編輯：

• 可用于 CRISPR/Cas9 基因編輯研究，有文獻報道 NEPA21 在牛胚胎中實現約 47.6% 的基因編輯效率

四、技術成熟度與產品歷史

NEPA21 系列于 2011 年推出，發展至今已超過 14 年。其技術演進路徑為：

1. CUY21 系列：早期型號，積累了數百篇文獻引用和用戶基礎

2. NEPA21（初代）：2011 年推出，采用四步法電轉程序

3. NEPA21 Type II / III：在初代基礎上持續迭代升級

NEPA21 已獲日本專Li認證，涉及反向導入及電壓衰減等技術設計。

五、文獻發表情況

NEPA21 及 CUY21 系列被數百篇文獻引用。代表性文獻包括：

• Barnabe-Heider 等利用 NEPA 系列設備進行成年小鼠神經生發龕的體內基因操作（Nature Methods, 2008）

• Cancer Gene Therapy（2008）發表相關電轉應用研究

• 2023 年《International Journal of Stem Cells》發表使用 NEPA21 進行小鼠胚胎干細胞電轉的參數條件報道

• 2025 年發表于 OpenLB 數據庫的研究中，NEPA21 被用于牛胚胎 CRISPR/Cas9 基因編輯效率優化研究

六、同行認可與國內用戶評價

國內用戶單位（部分）：

國內平臺評價：

• 中國科學院分子細胞科學卓YUE創新中心評價其具有“DU有反向導入及電壓衰減設計”和“運行成本較低”的優勢

• 華東理工大學平臺指出 NEPA21 “結合高精度低壓脈沖、精確的脈沖時間控制、瞬間電極反向放電等技術”，可實現“不需特殊試劑輔助，也能高效轉染”

國際認可：

• Nepa Gene 顯示，NEPA21 的運行成本較某些競品設備低約 8-10 倍

• 設備通過多個國際經銷商在北美及全球市場推廣

• 產品保修期為 2 年

七、參數性能