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公眾號:chem17
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產品簡介
| 供貨周期 | 一個月 | 應用領域 | 醫療衛生,食品/農產品,生物產業,制藥/生物制藥,綜合 |
Folic Acid(產品編號 EFFS3195)是一種基于免疫親和色譜原理的樣品凈化柱,專門為復雜樣品基質中的葉酸富集與凈化而研發。免疫親和色譜利用固定于凝膠上的特異性抗體,選擇性結合樣品提取液中的葉酸分子,在溫和的條件下通過洗滌去除不被結合的基質成分,隨后用酸性有機溶劑將目標物洗脫,從而實現高效、選擇性的富集與凈化。
該免疫親和柱填裝體積為3 mL,與常規反相或離子交換固相萃取柱相比,其抗原-抗體結合的高度特異性能夠明顯降低共提物的干擾,尤其適用于含有大量輔料、色素或復雜營養成分的維生素片、液體維生素制劑及細胞培養提取物等樣品。將免疫親和凈化與HPLC-UV檢測聯用,可在280 nm波長下獲得清晰的葉酸色譜峰,有效避免假陽性結果。
SENSIColumn IAC Folic Acid凈化柱的使用流程清晰,無需復雜的儀器或苛刻的操作條件。樣品經簡單的PBS提取、稀釋后即可上樣,洗滌步驟僅需5 mL緩沖液,整個凈化過程可在數十分鐘內完成。洗脫后的樣品可直接用于HPLC定量,或通過蒸發濃縮進一步提高檢測靈敏度,適用于從質量控制到科研分析的多種場景。
高選擇性免疫親和吸附,基于葉酸抗體特異性識別,有效區分目標物與結構類似物,減少色譜干擾峰。
適合多種復雜基質,涵蓋維生素片、液體維生素制劑和細胞培養提取物,無需針對不同樣品頻繁更換凈化方案。
操作流程簡捷,上樣、洗滌、洗脫三步完成凈化,顯著縮短傳統液-液萃取或多步固相萃取所需的時間。
富集與凈化一體化設計,洗脫液可直接進樣或經蒸發濃縮后進樣,便于與HPLC-UV系統無縫銜接。
寬線性范圍與優良回收性能,葉酸上樣量在20 ng-500 ng范圍內保持良好線性,緩沖液體系回收率高于85%。
檢測靈敏度滿足微量分析需求,每次進樣檢出限為3 ng,定量下限可達75 ng/g,支持痕量葉酸的準確定量。
與常規SPE柱相比,抗體介導的凈化方式對pH和有機溶劑的耐受性更好,洗脫條件可控且重現性較高。
| 參數 | 規格 |
|---|---|
| 柱體積 | 3 mL |
| 建議上樣流速 | 1-3 mL/min |
| 洗脫體積 | 3 mL 甲醇-磷酸溶液(99.8/0.2 v/v) |
| 線性范圍 | 20 ng-500 ng 葉酸/次進樣 (R2=0.9946) |
| 檢出限(LOD) | 3 ng 葉酸/次進樣(信噪比3倍) |
| 定量下限(LOQ) | 75 ng/g 樣品(可隨上樣量增加而降低) |
| 回收率 | >85%(緩沖液基質,0.1-5 µg范圍內) |
| 儲存條件 | 2-8 °C冷藏,不可冷凍,避光保存 |
| 有效期 | 見產品標簽 |
食品中維生素分析:用于維生素片、功能性飲料及強化食品中葉酸含量的合規檢測與質量控制。
藥品與保健品研發:在處方分析、溶出度測試及穩定性研究中準確測定葉酸活性成分。
生物技術與細胞培養:監測培養基或細胞提取物中葉酸水平,確保細胞實驗的可重復性。
飼料與寵物食品檢測:配合標準方法對飼料添加葉酸進行提取凈化,滿足行業檢測規范。
科研實驗:作為常規HPLC前處理工具,適用于葉酸代謝研究或方法開發中的選擇性凈化。
樣品提取:稱取適量樣品(如2 g維生素片),加入50 mL PBS充分溶解,必要時用0.45 µm濾膜過濾,得到澄清提取液。
上樣前稀釋:量取10 mL提取液,加入PBS使總體積為30 mL,混合均勻后轉移至免疫親和柱頂部的儲液器內。
上樣與洗滌:控制流速1-3 mL/min使樣品溶液通過凝膠,隨后用5 mL PBS洗滌柱床,清除非特異性結合物。洗滌結束后用正壓或負壓排盡柱內殘留液體。
洗脫:取下儲液器,在親和柱下方放置接收瓶。先加入1 mL甲醇-磷酸洗脫液(99.8/0.2 v/v),待其進入凝膠后暫停約30秒,再加入剩余2 mL洗脫液,保持流速低于3 mL/min,收集全部甲醇洗脫組分。
后處理與進樣:合并洗脫液可直接注入HPLC系統分析,或者當目標物濃度極低時,于50 °C下蒸發濃縮約1小時,再用HPLC流動相重新溶解后進樣。
HPLC檢測:按照建議色譜條件(如C18柱,0.03M磷酸鉀緩沖液(pH 2.2)-甲醇(80/20)等度洗脫,流速0.5 mL/min,檢測波長280 nm)進行定量分析。
免疫親和柱應在2-8 °C條件下冷藏并避光保存,嚴禁冷凍,以防凝膠結構受損,影響結合活性。
使用前將親和柱自然平衡至室溫,并檢查包裝完整性,在有效期內使用以保證凈化性能。
洗脫液含有磷酸,操作時請佩戴實驗室防護手套和護目鏡,在通風良好的環境中進行。接觸皮膚后立即用大量清水沖洗。
操作過程中應避免柱床變干,上樣、洗滌和洗脫步驟宜連續進行;若需短暫停止,應確保凝膠始終被液體覆蓋。
使用后的液相色譜流動相(含磷酸鹽和甲醇)需按照實驗室化學廢液管理規定妥善收集和處置。
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移動站:葉酸免疫親和凈化柱
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