一、產(chǎn)品概述

HyStem-HP Hydrogel  Kit是美國Advanced BioMatrix公司基于硫醇化透明質(zhì)酸交聯(lián)技術(shù)開發(fā)的3D水凝膠試劑盒，專為需要緩慢、持續(xù)釋放生長因子的細(xì)胞應(yīng)用而設(shè)計。

HyStem-HP是HyStem系列中專用于生長因子緩釋的配方。該試劑盒包含三種主要組分：Heprasil®（硫醇化透明質(zhì)酸與肝素的復(fù)合物）、Gelin-S®（硫醇化明膠）和Extralink®（PEGDA交聯(lián)劑）。當(dāng)三者混合時，硫醇基團(tuán)與交聯(lián)劑反應(yīng)形成透明水凝膠。

二、產(chǎn)品規(guī)格

HyStem-HP Hydrogel  Kit提供三種規(guī)格：

Buffer A和Buffer B各10 mL。Heprasil、Gelin-S和Extralink以凍干粉形式提供，在氮?dú)夂洼p微真空下包裝，可長期保存。

三、生長因子緩釋機(jī)制

HyStem-HP水凝膠中固定的肝素可模擬細(xì)胞外基質(zhì)中的硫酸肝素蛋白聚糖。肝素與蛋白質(zhì)形成離子鍵，保護(hù)其免受蛋白水解并促進(jìn)其緩慢釋放到細(xì)胞培養(yǎng)基中。相比直接將生長因子添加到培養(yǎng)基中，這顯著減少了觸發(fā)細(xì)胞生長或分化所需的生長因子用量。

研究表明，bFGF、VEGF、Ang-1、PDGF、TGFβ1和KGF等生長因子均可以不同速率從HyStem-HP水凝膠中釋放，持續(xù)時間可達(dá)數(shù)周。HyStem-HP水凝膠的剪切儲能模量（G′）約140 Pa。

四、產(chǎn)品特性

HyStem-HP具有以下特性：生長因子可在凝膠化前混入水凝膠中，形成生長因子緩釋儲庫；化學(xué)成分明確，不含未知化合物；可調(diào)節(jié)水凝膠硬度和凝膠化時間，通過改變組分濃度和混合比例實(shí)現(xiàn)；Gelin-S提供細(xì)胞粘附位點(diǎn)，支持細(xì)胞在水凝膠表面生長或內(nèi)部包埋；透明水凝膠，適用于多種成像系統(tǒng)。

五、產(chǎn)品應(yīng)用

HyStem-HP可廣泛應(yīng)用于以下研究領(lǐng)域：生長因子緩釋研究，生長因子可在凝膠化前混入水凝膠中形成緩釋儲庫；干細(xì)胞3D培養(yǎng)，支持人胚胎干細(xì)胞、CD34+造血干細(xì)胞等的擴(kuò)增；動物植入研究，適用于血管生成、細(xì)胞或藥物遞送等體內(nèi)應(yīng)用；細(xì)胞包封或表面培養(yǎng)，細(xì)胞可包封在水凝膠內(nèi)或在表面生長。

六、使用說明

根據(jù)官fang使用指南：

1. 將試劑盒組分恢復(fù)至室溫

2. 在無菌條件下，用Buffer A復(fù)溶Heprasil，用Buffer B復(fù)溶Gelin-S和Extralink

3. 復(fù)溶后立即渦旋各組分，平放在搖床上約60-90分鐘至完quan溶解

4. 使用時，將Heprasil和Gelin-S等體積混合，加入Extralink，三者體積比為2:2:1

5. 如需包封細(xì)胞或添加生長因子，在加入Extralink前將細(xì)胞/生長因子與Heprasil和Gelin-S混合

6. 分裝至培養(yǎng)器皿中，約20分鐘內(nèi)形成凝膠，90分鐘內(nèi)完quan凝膠化

七、儲存與注意事項

Heprasil和Gelin-S可在-20°C或4°C保存長達(dá)一年，復(fù)溶后溶液需當(dāng)天使用完畢，不可重新冷凍。Extralink復(fù)溶后可在-20°C保存一個月。Buffer A和Buffer B可在4°C或室溫保存長達(dá)一年。