一韋儀器HG24高通量組織研磨儀高效破碎酵母細胞壁提取總蛋白實驗方案

馮偉-上海一韋儀器科技有限公司

實驗目的
建立一韋儀器HG24高通量組織研磨儀常溫干磨法高效破碎酵母細胞壁，釋放總蛋白。酵母細胞壁厚實，傳統酶解或超聲耗時且重復性差。采用垂直三維運動與氧化鋯珠高速撞擊，實現快速、低溫、高重復性破壁，為蛋白組學分析提供穩定前處理。

實驗儀器和材料

·       儀器：一韋儀器HG24高通量組織研磨儀、2ml PE適配器（24孔）、1.0mm氧化鋯研磨珠

·       材料：釀酒酵母濕菌體（含水量約70%）、PBS緩沖液、蛋白酶抑制劑

實驗步驟

1.       稱取濕菌體200mg至2ml研磨管，加入1.0mm氧化鋯珠10顆。

2.       加入500μl PBS（含蛋白酶抑制劑），蓋緊密封。

3.       設置研磨參數：頻率65Hz，時間90秒。

4.       取出后4℃離心（12000g，10min），上清即為總蛋白提取液。

實驗數據

結論
一韋儀器HG24高通量組織研磨儀通過垂直三維振蕩與微珠撞擊，90秒內破碎率＞95%，蛋白得率3.2mg/g濕菌，重復性好，優于傳統超聲法，適用于酵母蛋白組學前處理。

• 組織研磨儀

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