支原體堪稱細胞培養頭號隱形殺手，個頭僅50-300nm，能輕松鉆過濾膜。初期污染毫無征兆，單純雙抗完-全無法預防，它的出現極易導致細胞形態異常甚至扎堆脫落、同時可能伴隨培養基突然發黃等異常代謝提醒。除此之外，支原體還會篡改細胞膜抗原、干擾核酸復制等，大幅降低轉染效率，導致實驗數據反復翻車。

不管是科研發文還是生物醫藥研發，支原體檢測都是硬性質控門檻，SCI期刊如《Nature》、中國藥典均有明確強制要求。最糟糕的是，不少人甚至因未對細胞做支原體檢測，論文直接被期刊打回返工。因此，精準防控并清除支原體，是研發成功的一大要點。

一、常見支原體四大污染源頭

踩中即翻車

人為操作（頭號元兇）：人體唾液、體表自帶支原體，不規范戴手套、操作臺消毒不到位、液體飛濺產生氣溶膠，極易引入污染。

原代組織自帶菌：取材組織本身攜帶支原體，分離細胞直接帶毒。

培養試劑（低風險）：血清是主要風險點，正規出廠均經過檢測，正品基本避雷。

細胞交叉傳染：混用細胞、互借細胞株，一株污染全實驗室淪陷。

二、4種主流檢測方法

按需pick不踩坑

PCR/qPCR法（常規實驗室首-選）

靶向支原體16S rRNA片段擴增，靈敏度高、特異性強，2-4小時出結果，新細胞入庫、血清培養基篩查、期刊投稿配套檢測都靠它。

Hoechst熒光染色法

成本低、上手難度低，若存在污染，細胞熒光試劑共培養幾日后可在熒光鏡下看見細胞表面的熒光小點，適合日常快速初篩、課堂實驗；缺點是靈敏度一般。

培養法（金標準）

藥典產品放行、菌種驗證專用；缺點太慢，要等7-21天，急出結果勿選。

化學發光法

僅檢測活菌，速度快、靈敏度拉滿，但需要專用發光儀，多用于細胞治療產品緊急放行。

* 為科研服務

三、細胞中招別直接丟！

兩套清除方案挽救珍貴細胞

注意：本法僅針對污染較輕的細胞類型，污染較重的建議直接丟棄細胞。

低細胞毒性，可穿透細胞內部根-除支原體，不用自行調配濃度，污染不重時，連續傳代3-6代即可徹-底清除，原代、敏感脆弱細胞都能用。

四、預防＞補救！

6條實操守則，把殺手擋在門外

清除治標不治本，日常做好這幾點，污染概率直接暴跌80%：

進細胞房配備全套專用防護服、手套、口罩，杜絕人體攜帶外源菌群。

新細胞入庫必檢，單獨隔離培養兩周，檢測陰性再放行，凍存保種不可少。

操作全程無菌意識拉滿，液體濺出立刻消毒，一個時間段只處理一種細胞，耗材一次性使用，試劑分裝不混用。

超凈臺使用前必滅菌，培養箱、水浴鍋規律消殺勤換滅菌水，必要時可添加專用抑菌劑或清除噴霧。

血清來源要可靠，優先選γ射線滅菌款耗材，若需自行滅菌，高壓之后嚴格烘干再進入細胞房。

至少每3月對大環境進行一次支原體檢測，每次檢測結果可建立細胞臺賬，記錄細胞來源及對應細胞代次，方便溯源污染源。

索萊寶支原體防控產品

全流程適配

支原體防控說到底，就是 “檢測常態化、清除及時化、預防日常化"，只要找對方法、選對試劑，就能把這個 “隱形殺手" 拒之門外。索萊寶搭建了 “檢測-清除-預防" 全鏈條產品體系，適配實驗室各種場景，質量有保障，具體產品可參照下表：