2025年10月28日，上海交通大學章雪晴團隊與新澤西理工學院許曉陽團隊在期刊《ACS Nano》上發表題為" mRNA-Based Vaccination Drives in Vivo Dendritic Cell Reprogramming and Selective Cytotoxic T Lymphocyte Modulation for Enhanced Antitumor Immunity "的研究論文。

借助艾特森MPE-L2型微流控制備儀，研究團隊成功開發了一種“疫苗啟動選擇性T細胞調控（VISIT）"平臺。首先通過艾特森微流控制備儀制備mRNA-LNP脂質納米顆粒，將編碼腫瘤抗原以及膜結合型IL?15/IL?15Rα復合物（bIL?15，為IL?15的生物活性形式）的mRNA選擇性遞送至脾臟DC。系統給藥后，VISIT平臺成功實現DC的體內重編程，使其同步在細胞表面呈現抗原/MHC?I復合物與bIL?15。

抗原特異性細胞毒性T淋巴細胞（CTLs）是抗腫瘤免疫的核心，但高效抗原呈遞策略缺乏、抗原特異性CD8⁺T細胞活化與擴增不足，制約了腫瘤免疫治療發展。傳統的樹突狀細胞（DC）體外疫苗和過繼性T細胞療法存在產量低、半衰期短、制備復雜且成本高的缺陷；而IL-15雖能促進T細胞存活增殖，但其全身給藥會引發非特異性免疫激活，存在脫靶副作用。因此，亟需開發可在體內靶向重編程DC、同步呈遞腫瘤抗原與IL-15的策略，以精準激活抗原特異性CTLs。

圖例1：疫苗介導的選擇性T細胞調控（VISIT）平臺

圖例2：mRNA-LNP制備過程

研究團隊成功合成可生物降解的脂質te-AA3-Dlin，以此為基礎通過微流控技術制備mRNA-LNP，平均粒徑～110nm、表面電位近中性（-4 mV）、mRNA包封率90%，血清中24h穩定且抗RNase A降解，對BMDC無毒性。

該mRNA-LNP經靜脈注射后＞96%熒光信號富集于脾臟，主要轉染脾臟 DC（~33% DC表達EGFP），究其原因在于te- AA3-Dlin LNP表面吸附的結構蛋白-1（talin-1）DC 整合素受體，且ApoE占比低以避肝靶向。

圖例3：mRNA-LNP疫苗的設計與表征

對C57BL/6J小鼠進行三次免疫后，mOVA-LNP和mOVA/bIL15-LNP 組脾臟中 SIINFEKL-H-2Kb⁺DC占比顯著升高（為PBS組的2.8-3.0 倍），且 mOVA/bIL15-LNP組可誘導更高比例的抗原特異性CD8⁺T 細胞（tetramer+CD8⁺T細胞占比為 mOVA-LNP 組的2倍），同時促進效應記憶性CD8⁺T細胞（TEM）分化、提升OVA特異性IgG抗體滴度。

圖例4：mOVA/bIL15-LNP體內促進DC活化、抗原呈遞及抗原特異性免疫應答

在MC38-OVA結腸癌模型中，mOVA/bIL15-LNP免疫可實現100%腫瘤緩解，且100天后再次挑戰腫瘤，所有免疫小鼠仍無復發，表明記憶性T細胞儲備成功建立。對非OVA表達的MC38腫瘤具有抑制效果（25%無瘤），證實其可誘導長效抗原特異性免疫記憶。

圖例5：mOVA/bIL15-LNP 預防性免疫及腫瘤再攻擊保護效果

在已建立的MC38-OVA腫瘤模型中，靜脈注射mOVA/bIL15-LNP相比肌內注射表現出更優的抗腫瘤活性，可使腫瘤重量降低89.6%（P< 0.01），并顯著延長小鼠的中位生存期；在B16F10黑色素瘤模型中，靶向TRP2抗原的mTRP2/bIL15-LNP顯著增加了腫瘤組織中CD8+ T細胞的浸潤，降低了Treg比例，同時上調了IL-6、TNF-α、IFN-γ等促炎因子水平（P< 0.05），從而有效延緩了腫瘤的生長并改善了小鼠的生存狀況。

圖例6：mOVA/bIL15-LNP在已建立MC38-OVA腫瘤模型中的治療效果

圖例7：mTRP2/bIL15-LNP在B16F10黑色素瘤模型中的治療效果

mTRP2/bIL15-LNP與抗PD-1抗體聯用，可協同增強B16F10模型的抑瘤效果，腫瘤體積較單藥組顯著降低，小鼠中位生存期進一步延長。

圖例8：mTRP2/bIL15-LNP與抗PD-1聯合治療在B16F10模型中的效果

急性與慢性毒性實驗顯示，經mTRP2/bIL15-LNP處理后，小鼠心、肝、脾、肺、腎無明顯病理損傷，體重無顯著下降，血清中ALT、AST、BUN、CRE、CK、LDH 等肝、腎、心功能指標與對照組無顯著差異，安全性良好。

圖例9：mTRP2/bIL15-LNP體內安全性評估