本試劑盒采用獨特裂解液替代傳統Trizol，可以從植物組織中快速提取miRNA，且提取到的miRNA純度和濃度均高，沒有其他雜質污染，可用于RT-qPCR等多種下游實驗。
操作步驟：
1.在1.5mL離心管中加入500μL裂解液，液氮中研磨適量新鮮植物組織成細粉后，取50-100mg細粉轉入上述裝有裂解液的離心管中，渦旋震蕩15s，室溫靜置5min。
2.向上述裂解完畢的液體中加入100μL氯仿，渦旋震蕩30s，室溫靜置5min。
3.4℃，12000rpm離心10min。
4.量取上清液體積，緩慢轉移至新的1.5mL離心管，然后向其中加入0.45倍上清液體積的無水乙醇（如：400μL上清液加180μL無水乙醇），渦旋震蕩5s。
5.將上述混合物一次性加入吸附柱（吸附柱放在收集管中），12000rpm離心2min，收集濾液。
6.量取濾液體積，緩慢轉移至新的1.5mL離心管，然后向其中加入0.65倍濾液體積的無水乙醇（如：500μL濾液加325μL無水乙醇），渦旋震蕩5s。
7.將上述混合物一次性或分兩次加入新的吸附柱（吸附柱放在收集管中），12000rpm離心2min，棄濾液。
【注】
若濾液體積不超過500μL，混合物可一次性加入吸附柱，反之則需分兩次加入。
8.吸附柱重新放回收集管中，然后向吸附柱中加入600μL漂洗液，12000rpm離心1min，棄濾液。
9.重復一遍8。
10.將上一步吸附柱放回收集管中，12000rpm離心2min，棄掉收集管，吸附柱開蓋放置2min，以除去殘留乙醇。
11.將吸附柱放入新的1.5mL離心管中，向吸附柱中央加入30μLRNase-freeddH2O，室溫放置5min。4℃，12000rpm離心2min，得到miRNA溶液。
注意事項：
1.所有相關器皿耗材都應為RNase-free產品，操作過程要小心，帶口罩、手套避免環境中RNA酶污染樣品。
2.避免試劑長時間暴露于空氣中產生揮發、氧化、pH值變化，各溶液使用后應及時蓋緊蓋子。
盡量使用新鮮植物組織提取miRNA。
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