抗體稀釋液是免疫學實驗中用于將高濃度的抗體儲存液稀釋至工作濃度的關鍵復合體系。它遠非簡單的溶劑,而是為抗體提供穩定工作環境、保護其活性并優化信號輸出的重要試劑。
抗體稀釋液的功能:
穩定緩沖環境:維持 pH 7.2~7.6、適宜離子強度,保證抗原-抗體*優結合;
保護抗體活性:添加載體蛋白,防止低濃度抗體吸附管壁、聚集失活;
降低非特異背景:封閉膜/細胞/組織空白結合位點,減少雜帶、雜染色;
長效防腐:添加防腐劑,稀釋后的抗體 4℃可保存數周甚至數月,支持重復回收孵育。
稀釋后抗體保存規則:
BSA + 疊氮鈉體系一抗:4℃避光,穩定 1~3 個月,可重復孵育;
牛奶稀釋液:室溫/4℃僅當天使用,次日丟棄;
熒光二抗稀釋液:避光4℃,1 周內用完,避免光漂白;
長期不用可分裝 - 20℃凍存,避免反復凍融失活。
與封閉液、洗滌液的區別
洗滌液(PBST/TBST):僅緩沖和Tween,無蛋白,只用來洗去未結合抗體,不能稀釋抗體;
封閉液:高濃度蛋白(5% BSA/牛奶),僅用于封閉膜/切片空白位點,不適合長期稀釋抗體;
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