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島津(上海)實驗器材有限公司 SGLC
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首頁 >> 技術(shù)文章 >> 特色應(yīng)用|非衍生法結(jié)合 LC-MSMS 分析 21 種氨基酸
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非衍生法結(jié)合
LC-MSMS 分析
21 種氨基酸
摘要
>>>
本文建立了21 種氨基酸非衍生法的 LC-MS/MS 測定方法。21 種常見的氨基酸不進行衍生,直接采用 Shim-pack GIST Amide 色譜柱進行分離,島津串聯(lián)質(zhì)譜 LCMS-8050 檢測分析,21 種氨基酸保留強,峰型對稱,且亮氨酸和異亮氨酸完全基線分離。該方法為 21 種氨基酸非衍生法測定提供參考。
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實驗部分
1.1 實驗儀器及耗材
Shimadzu LC-30AD與LCMS-8050 聯(lián)用系統(tǒng);
色譜柱:Shim-pack GIST Amide(3 μm,2.1×100 mm;P/N:227-30818-04);
SHIMSEN Disc HPPTFE 針式過濾器(P/N:380-00341);
LC-MS 認證樣品瓶 LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
Nichipet Air 移液槍:
Nichipet Air 0.5-10 μL(P/N:00-NAR-10);
Nichipet Air 10-100 μL(P/N:00-NAR-100) ;
Nichipet Air 100-1000 μL(P/N:00-NAR-1000) ;
Nichipet Air 1000-10000 μL(P/N:00-NAR-10000) 。
1.2 混合對照品溶液的制備
分別稱取 21 種氨基酸標準品適量,加水溶解并稀釋至 1 mg/mL,制成各標準品母液;分別移取各標準品母液適量,加 50%乙腈水稀釋至 50 ng/mL,混勻,備用。
1.3 分析條件
UHPLC 條件:
色譜柱:Shim-pack GIST Amide(3μm,2.1×100 mm;P/N:227-30818-04)
流速:0.5 mL/min;
進樣量:1 μL
柱溫:40 ℃
流動相:A:0.05 %甲酸水溶液
B:乙腈
梯度洗脫程序如下:
質(zhì)譜條件:
離子化模式:ESI,正離子掃描;
掃描模式:多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)
碰撞氣:氬氣
加熱氣:干燥空氣 10 L/min
霧化氣:氮氣 3 L/min
干燥氣:氮氣 10 L/min
接口溫度:300℃ DL
溫度:150 ℃
加熱模塊溫度:400 ℃
MRM 參數(shù)見下表
2
實驗結(jié)果及討論
21 種氨基酸+γ-氨基丁酸混標溶液 MRM 譜圖(濃度:50 ng/mL)
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結(jié)論
本文建立了21 種氨基酸非衍生法的LC-MS/MS 測定方法。21 種常見的氨基酸不進行衍生,直接采用Shim-pack GIST Amide 色譜柱進行分離,島津串聯(lián)質(zhì)譜LCMS-8050 檢測分析,21 種氨基酸保留強,峰型對稱,且亮氨酸和異亮氨酸完全基線分離。該方法為 21 種氨基酸非衍生法測定提供參考。
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