

摘要
技術特點
前處理簡單、快速,可操作性強。
各項指標符合標準《飼料中香芹酚和百里香酚的測定氣相色譜法》檢測要求,方法穩定性良好。
目前食用香料被廣泛應用于社會各個方面,且種類繁多,歐盟允許使用的食用香料物質約2800多種。
在農業部《飼料添加劑品種目錄(2008)》(中華人民共和國農業部公告第1126號)規定了作為食品用的香料允許在養殖動物中使用。香芹酚和百里香酚作為目前應用最為廣泛的重要香料之一,被廣泛應用于飼料添加。隨著香芹酚和百里香酚的生產技術提高以及其在飼料工業中所具有的優勢,作為飼料調味劑香芹酚和百里香酚在飼料生產中的應用日益廣泛。國內外對于香芹酚和百里香酚的研究主要集中在對各種細菌、病毒以及螨類等微生物的抑制研究,而關于飼料以及飼料添加劑中的化學分析報道比較缺乏。
本文參照行業標準 NY/T 3137-2017《飼料中香芹酚和百里香酚的測定氣相色譜法》,采用島津GC-2030氣相色譜儀和SK-5MS氣相色譜柱,建立了飼料中香芹酚和百里香酚的檢測方法,以分散固相萃取的方式凈化,方法簡單、快速,可靠,可用于飼料中香芹酚和百里香酚兩種添加劑含量的檢測。
1. 實驗部分
1.1 儀器
氣相色譜儀:島津GC-2030
1.2 分析條件
色譜柱:SK-5MS, 30m × 0.25 mm × 0.25 μm
柱溫程序:80°C(1min)_10°C/min_120°C_5°C/min_145°C_35°C/min_250°C(2 min)
進樣口溫度:250°C
檢測器: FID
載氣:氮氣
檢測器溫度:300°C
控制模式:恒流,1mL/min
空氣流量:200mL/min
進樣方式:不分流進樣
氫氣流量:32mL/min
進樣量:1ML
尾吹氣流量:24mL/min
2. 樣品前處理
樣品前處理步驟見圖1所示

前處理產品推薦
380-00105-01,SHIMSEN QuEChERS dSPE, 2mL, 50mg PSA, 50mg GCB, 150mg Na2SO4, 100/P

3. 結果與討論
3.1 標準色譜圖
香芹酚和百里香酚標準品色譜圖和化合物信息分別見圖2和表1。

3.2 標準曲線及檢出限
分別準確吸取適量濃度為 1000.0 μg/mL 香芹酚和百里香酚混合標準中間溶液于 10.0 mL 容量瓶中,用乙酸乙酯定容至刻度,混勻,配制成濃度為1.0、10、50、100、200和400μg/mL的標準系列溶液,上機測試后,分別以香芹酚和百里香酚濃度為橫坐標,峰面積為縱坐標,以外標法建立標準曲線,標準曲線見圖3。以濃度為1.0ug/mL 標準品溶液數據計算得到檢出限(S/N=3),具體結果見表2。

3.3 重復性考察
取濃度為10μg/mL 的混合標準品溶液,連續進樣分析6次,計算重復性,結果見表3。

3.4 回收率考察
取空白樣品,分別添加一定濃度的標準品溶液,按上述前處理方法提取定容,濃度分別為10μg/mL、200μg/mL 和400μg/mL,制備三個水平的加標樣品,每個水平重復3次,進行加標回收率實驗。結果見表4、表5所示。


3.5 樣品測試
取某市售配合飼料樣品,按上述前處理方式進行操作并上機分析,該樣品中未檢出香芹酚和百里香酚,樣品
色譜圖見圖4所示。

4. 結論
參考農業行業標準 NY/T 3137-2017《飼料中香芹酚和百里香酚的測定 氣相色譜法》使用島津GC-2030氣相色譜儀和SK-5MS氣相色譜柱,建立了飼料中香芹酚和百里香酚兩種添加劑含量的檢測方法。在1.0~400.0μg/mL 的濃度范圍內,香芹酚和百里香酚線性相關系數 R分別為 0.9996、0.9996,線性關系良好,取濃度為10μg/mL 的標準品溶液進行6次重復性考察,香芹酚和百里香酚峰面積 %RSD 分別為 0.60%、0.34%,重復性良好;考察10、200和400μg/mL 三個水平的樣品加標回收率,回收率結果在 86.26~96.8%,滿足方法學要求,該方法適用于飼料中香芹酚和百里香酚的含量測定。
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