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上海起發實驗試劑有限公司
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?? 產品描述
產品全稱：Human Anti-LAM Recombinant Antibody
中文名稱：重組人源抗脂阿拉伯甘露聚糖（LAM）抗體
國際貨號：HPAB-M0560-YC
宿主物種：Human（人源）
抗體類型：Human IgG, κ（可根據需求調整為 IgM 或 IgA）
特異性靶點：LAM（Liparabinomannan，脂阿拉伯甘露聚糖）
交叉反應性：Mycobacterium Tuberculosis（結核分枝桿菌）
核心應用：ELISA、Western Blot、Microarray（微陣列）、Blocking（阻斷實驗）
蛋白純度：>95%（經還原型SDS-PAGE與SEC-HPLC雙重驗證）
標準濃度：具體濃度詳見每支產品標簽（典型范圍：0.5 mg/mL - 2.0 mg/mL）
保存緩沖液：1x PBS（磷酸鹽緩沖液，pH 7.4）
防腐劑：無（生產及凍存過程未添加疊氮鈉或硫柳汞等防腐劑）
產品形態：無菌過濾液體（于無菌條件下分裝至低吸附EP管中）
品牌歸屬：Creative Biolabs
本產品是一款利用前沿基因工程技術與重組抗體表達體系制備的高特異性免疫檢測試劑。它靶向結核分枝桿菌細胞壁上的特征性糖脂抗原——脂阿拉伯甘露聚糖（LAM），并能表現出高的結合親和力。依托于成熟的Hi-Affi™重組抗體開發平臺，該抗體不僅在分子層面上實現了序列的精準定義，還在表達純化過程中去除了內毒素與宿主DNA殘留，確保了在臨床前研究與體外診斷（IVD）原料篩選中的絕對安全性與合規性。
?? 產品背景與工作原理
脂阿拉伯甘露聚糖（LAM）的生物學意義
LAM（Liparabinomannan）是結核分枝桿菌（Mycobacterium Tuberculosis）及相關非結核分枝桿菌細胞壁中含量豐富、結構最復雜的糖脂分子。它由甘露聚糖骨架、阿拉伯糖側鏈以及磷脂酰肌醇帽結構組成。在結核菌的感染周期中，LAM不僅維持著細菌細胞膜的完整性，更作為關鍵的毒力因子，通過調節宿主巨噬細胞的凋亡通路、抑制吞噬體-溶酶體融合來幫助病原體在宿主細胞內長期潛伏。此外，LAM會從代謝活躍的結核桿菌中釋放到外周血液或尿液中，這使其成為開發結核病（TB）無創診斷標志物的“黃金靶點"。
重組抗體的作用機制
本產品通過基因重組技術，將特異性識別LAM表位的抗體重鏈與輕鏈基因克隆至表達載體中，并在哺乳動物細胞（如HEK293）或無血清原核系統中進行大規模發酵表達。其工作原理基于經典的抗原-抗體特異性結合反應：當該重組抗體與樣本中的LAM分子相遇時，其互補決定區（CDR）會通過疏水作用、氫鍵和范德華力與LAM的阿拉伯糖帽或甘露糖核心發生高親和力的立體構象契合。這種特異性結合可以作為“分子探針"，在后續加入二抗（如HRP標記的抗人IgG）及底物顯色系統后，實現信號的指數級放大，從而完成對極低豐度LAM抗原的精準定性或定量分析。
? 產品核心特點
1. 純度與均一性
傳統腹水制備的多克隆抗體往往伴隨著大量的雜蛋白，嚴重影響實驗的信噪比。本產品經過蛋白A/G親和層析以及精細的離子交換層析純化，最終純度經SEC-HPLC（體積排阻高效液相色譜）測定高達95.33%以上。在還原型SDS-PAGE電泳中，僅呈現清晰的約50 kDa重鏈和25 kDa輕鏈條帶，無雜帶干擾。
2. 批次間一致性
得益于確定的基因序列和標準化細胞培養工藝，該重組抗體擺脫了傳統雜交瘤技術因染色體丟失或培養條件波動導致的“飄變"風險。每一批次的HPAB-M0560-YC在親和力常數（KD值）、表位識別位點及效價上均保持高度一致，為需要長期追蹤的大規模隊列研究或體外診斷試劑盒的注冊申報提供了堅實的保障。
3. 動物成分零殘留（Animal-Free）
在研發與生產全鏈條中，未使用任何動物源性酶類或血清，極大地降低了實驗中因宿主殘留蛋白引發的非特異性背景干擾，滿足下游細胞功能學實驗及人體臨床診斷的原料安全標準。
4. 多應用場景的廣泛兼容性
無論是在高通量ELISA板孔中捕捉游離的LAM抗原，還是在Western Blot中鎖定經過SDS-PAGE分離變性的糖脂條帶，亦或是在微陣列芯片上作為捕獲探針，該抗體均能展現出線性寬廣、背景極低的優異性能。
??? 解決的實驗痛點
在使用傳統抗體制備方法進行結核抗原檢測時，科研人員常常面臨以下令人棘手的難題：
• 靈敏度不足導致假陰性：傳統多抗對LAM這類糖脂抗原的親和力較弱，當患者處于結核感染早期或免疫力低下時，體液中微量的LAM無法被有效捕獲，從而導致漏檢。本產品憑借重組技術定向篩選出的高親和力克隆，將檢測下限（LoD）推進了一個數量級。
• 特異性交叉引發假陽性：結核分枝桿菌與其他環境中的腐生分枝桿菌在細胞壁成分上具有高度同源性。普通抗體極易發生交叉反應，而本產品通過嚴苛的陰性/陽性篩選，確保只對M. Tuberculosis來源的LAM產生特異性應答。
• 試劑批間差破壞數據連續性：長期縱向研究（Longitudinal Study）需要數年的隨訪檢測，傳統抗體每批次的差異會導致歷史數據無法與新數據在同一個統計學模型中對齊。本產品的無限增殖特性解決了這一痛點。
• 下游偶聯困難：傳統抗體含有大量BSA或明膠保護劑，在生物素化或熒光標記時效率極低。本產品溶于純凈的PBS中，為科研人員進行下游化學偶聯改造提供了極大的便利。
?? 儲存與復溶規范
為了保證您手中的每一瓶 HPAB-M0560-YC 都能發揮出標稱的最佳性能，請務必嚴格遵守以下儲存與操作規范：
短期儲存（1 - 2周）
收到產品后，請將其直立放置于 2℃ - 8℃ 的家用冰箱冷藏室中保存。在此期間，盡量避免反復拿取導致溫度劇烈波動。
長期儲存（-20℃ 及以下）
若計劃在超過兩周的時間內不使用該產品，強烈建議進行分裝（Aliquot）。使用低吸附性的無菌離心管，每管分裝 10 μL 至 50 μL（根據日常單次使用量而定）。置于 -20℃ 獨立冷凍室中避光保存。在此條件下，抗體的活性可穩定保持至少 24 個月。
操作注意事項（極其重要）
1. 開蓋前離心：在運輸過程中，少量抗體粉末或液體會粘附在管蓋或管壁上方。請在開蓋前，使用微型離心機以 10,000 rpm 的轉速離心 30 秒，確保全部試劑沉降至管底。
2. 避免反復凍融：反復凍融會導致蛋白質發生不可逆的聚集和變性，從而使效價大幅下降。這就是為什么我們強烈要求您進行預分裝的原因。一旦從 -20℃ 取出解凍，若一次未用完，切勿再次凍存，只能轉移至 4℃ 并在一周內盡快用完。
3. 緩沖液兼容性：本產品以純凈 PBS 配制。如果您需要在特定緩沖液（如碳酸鹽包被液、Tris緩沖液）中進行實驗，請使用相應緩沖液稀釋抗體，并注意最終pH值應維持在 7.0 - 7.6 之間，以防抗體失活。
?? 使用方法與操作規程
為了幫助您快速上手并獲得可重復的優質數據，我們針對該抗體適用的四大核心應用場景，提供了經過內部優化的基礎實驗方案。您可以根據自己實驗室的具體條件在此基礎上進行微調。
1. ELISA（酶聯免疫吸附測定）方案
ELISA 是本產品最常應用的場景，主要用于定量檢測臨床尿液、血清或培養上清中的游離 LAM 抗原。
• 包被（Coating）：使用 0.05 M 碳酸鹽包被緩沖液（pH 9.6）將 HPAB-M0560-YC 稀釋至 2 - 5 μg/mL。向每個 ELISA 板孔中加入 100 μL，封板后置于 4℃ 孵育過夜（12-16小時）。
• 封閉（Blocking）：甩干包被液，每孔加入 200 μL 含 3% BSA 或 5% 脫脂奶粉的 PBST 緩沖液，37℃ 孵育 1-2 小時，以降低非特異性吸附。
• 加樣與孵育：用 PBST 洗滌液洗板 3 次。加入梯度稀釋的 LAM 標準品或待測樣本（100 μL/孔），37℃ 孵育 1 小時。
• 加酶標二抗：洗板 3 次。加入 HRP 標記的抗人 IgG（或 IgM，視一抗亞型而定）二抗，37℃ 孵育 45 分鐘。
• 顯色與終止：洗板 5 次。加入 TMB 顯色底物（100 μL/孔），避光反應 10-15 分鐘。加入 1 M 硫酸終止液（50 μL/孔）。使用酶標儀在 450 nm 波長下讀取 OD 值。
2. Western Blot（蛋白質印跡）方案
Western Blot 主要用于確認樣本中 LAM 的分子量大小（通常在 20-40 kDa 范圍內遷移，但因糖基化程度不同會呈現彌散條帶）。
• 電泳與轉膜：將提取的樣本與 5x 上樣緩沖液混合后煮沸變性。進行 SDS-PAGE 電泳分離，隨后通過濕轉法或半干轉法將蛋白轉移至 PVDF 或 NC 膜上。
• 封閉：使用 5% 脫脂牛奶或 BSA 的 TBST 緩沖液室溫封閉膜 1 小時。
• 一抗孵育：用 TBST 稀釋 HPAB-M0560-YC（建議起始稀釋比例為 1:1000 - 1:5000），將膜浸入一抗溶液中，4℃ 平緩搖動孵育過夜。
• 二抗孵育與顯影：TBST 洗膜 3 次，每次 5 分鐘。加入 IRDye 800CW 標記的抗人二抗（1:10000 稀釋），室溫避光孵育 1 小時。再次洗膜后，使用 Odyssey 雙色紅外激光成像系統或化學發光底物進行顯影定影。
3. Microarray（微陣列/芯片）方案
用于高通量篩選或多重檢測。
將 HPAB-M0560-YC 用打印緩沖液（如 ArrayIt Spotting Solution）稀釋至 0.1 - 0.5 mg/mL。使用微陣列打印機器人將其點樣于醛基化玻片或 384 孔板上。點樣后在濕度控制環境中室溫干燥過夜，隨后進行紫外線交聯固定。后續步驟與 ELISA 類似，依次進行封閉、樣本孵育、熒光二抗孵育及芯片掃描。
4. Blocking（阻斷/中和）實驗方案
用于細胞水平的結核感染機制研究。
在體外培養的巨噬細胞（如 THP-1 或 Raw264.7）感染結核分枝桿菌前，預先在培養基中加入 HPAB-M0560-YC（終濃度 10 - 50 μg/mL）。抗體將與培養基中游離的 LAM 結合，或在細菌表面占據 LAM 位點，從而阻斷 LAM 與宿主細胞表面 C型凝集素受體（如 Dectin-2）的結合，進而觀察由此引發的細胞因子（TNF-α, IL-6）分泌水平變化。
?? 常見問題與解決方案（Troubleshooting）
在實驗過程中遇到挫折是科學研究的一部分。我們整理了全球用戶在使用同類重組抗LAM抗體時最常遇到的八大問題，并提供了詳盡的分析與對策。
問題一：ELISA 讀數過低，無法擬合標準曲線
• 可能原因 A：包被條件不佳。LAM 作為糖脂，容易在酸性環境下解離。
? 解決方案：確保包被緩沖液 pH 值嚴格控制在 9.4 - 9.8 之間；嘗試延長包被時間至 48 小時（4℃）；或在包被液中加入 10 mM MgCl? 以增強糖脂與塑料板的吸附力。
• 可能原因 B：一抗效價下降。
? 解決方案：檢查抗體儲存歷史，若存在反復凍融，請更換新分裝管；適當提高一抗的孵育濃度。
問題二：Western Blot 出現高背景或非特異性雜帶
• 可能原因 A：封閉不夠。
? 解決方案：LAM 具有較強的疏水性，建議使用 5% 脫脂牛奶 + 0.1% Tween-20 進行強化封閉；或在封閉液中添加 0.1% 的魚明膠（Fish Gelatin）。
• 可能原因 B：二抗交叉反應。
? 解決方案：本產品為人源抗體，若使用過氧化物酶標記的二抗，需確認二抗是否去除了Fc段的交叉吸附（Pre-adsorbed）。建議使用 Fab 段特異性的二抗。
問題三：實驗重復性極差（CV值 > 15%）
• 可能原因：移液操作誤差或洗板機流速不均。
• 解決方案：在稀釋標準品時，務必使用校準過的移液器并更換低吸附吸頭；如果是洗板導致，檢查洗液瓶是否有氣泡，增加洗板停留時間（Soak time）至 60 秒。
問題四：在細胞阻斷實驗中未見預期表型改變
• 可能原因 A：抗體無法接觸靶點。
• 解決方案：LAM 深埋于結核菌厚厚的莢膜中。建議在感染前使用超聲破碎或輕微皂苷（Saponin）透化處理細菌，使抗體能夠真正接觸到 LAM 表位。
• 可能原因 B：濃度不足。
• 解決方案：進行預實驗，使用 1, 10, 50, 100 μg/mL 的梯度濃度測試細胞毒性及中和效率。
問題五：產品解凍后出現輕微渾濁或沉淀
• 可能原因：蛋白質在凍融過程中發生聚集，或因長期存放產生了微量聚合物。
• 解決方案：切勿劇烈震蕩。將管子插在碎冰上，使用超聲波水浴鍋輕柔震蕩 1 分鐘使其重新溶解；若沉淀無法溶解，可于 4℃ 下以 12,000 rpm 離心 10 分鐘，小心吸取上清液分裝使用。
問題六：SEC-HPLC 檢測純度低于產品檢驗報告（COA）
• 可能原因：緩沖液中含有高濃度鹽離子或去垢劑，影響了色譜柱分離效果。
• 解決方案：上樣前務必使用脫鹽柱（Desalting Column）將抗體置換至 HPLC 兼容的等度洗脫液（如 150 mM 磷酸鈉緩沖液，pH 7.0）中。
問題七：進行抗體偶聯（如生物素化）后失去結合能力
• 可能原因：偶聯反應中使用的溶劑（如DMF、DMSO）比例過高，導致抗體變性。
• 解決方案：嚴格控制有機相比例不超過 5%（v/v）；偶聯反應需在 pH 8.0 - 8.5 的硼酸鹽緩沖液中進行；反應結束后立即使用 PD-10 脫鹽柱去除游離生物素。
問題八：微陣列點樣后容易脫落
• 可能原因：點樣濃度過低或玻片表面醛基活性喪失。
• 解決方案：將 HPAB-M0560-YC 與點樣緩沖液按 1:1 混合后點樣；在點樣環境中放置飽和硫酸銅溶液以維持 70% 左右的相對濕度，防止液滴在點樣過程中過度蒸發。
?? 安全與免責聲明
1. 安全防護：盡管本產品經過嚴格的無菌及無熱原處理，但仍屬于生物源性制劑。操作過程中請始終穿戴實驗服、佩戴一次性手套和護目鏡。避免產生氣溶膠，切勿用口吸移液器。
2. 廢棄物處理：所有接觸過本產品的吸頭、離心管及殘余液體均視為潛在的生物危害廢棄物。必須經過 10% 漂白劑或 75% 酒精浸泡消毒至少 30 分鐘后，方可作為醫療垃圾處理。
3. 應用限制聲明：本產品（HPAB-M0560-YC）僅供經過專業培訓的科研人員或診斷機構實驗室使用。除非另有明確書面授權，不得直接用于人體或動物的體內診斷、治療或注射。
關鍵詞：Human Anti-LAM重組抗體、HPAB-M0560-YC、結核分枝桿菌LAM抗原檢測、脂阿拉伯甘露聚糖抗體、重組人源化IgM抗體、Western Blot糖脂抗原檢測、ELISA試劑盒原料抗體、高純度LAM單克隆抗體、無動物源成分抗體、生物素標記LAM抗體、結核菌快速診斷試劑、抗體藥代動力學研究、Creative Biolabs代理、重組抗體制備服務、IgG/IgM亞型切換、高特異性多克隆抗體、低交叉反應抗體、磷酸鹽緩沖液保存抗體、SDS-PAGE驗證抗體、SEC-HPLC純度檢測
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（注：本文內容基于品牌公開資料及行業常規信息整理，具體以品牌信息文檔為準。）
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KN-0422-LN1 | Recombinant Anti-CD3 (O-OKT3) x Anti-CD33 Bispecific Antibody (Tandem scFv) | 1mg | Creative Biolabs |
CTK-883 | Mouse MASP-2 ELISA Kit | Kit | Creative Biolabs |
MHC-LC127 | PE-A*02:01/Human MAGEA3 (KVAELVHFL) MHC Tetramer | ea | Creative Biolabs |
Vcar-Lsx003 | Tetanus toxoid (TT) protein | 1mg | Creative Biolabs |
MHC-LC121 | PE-A*02:01/Human MAGEA2 (YLQLVFGIEV) MHC Tetramer | ea | Creative Biolabs |
NPP2007FY54 | Recombinant Human Alpha Synuclein Pre-formed Fibrils (Type 2) Protien | 100ug | Creative Biolabs |
MHC-LC3155 | PE-A*02:01/Human TP53 (STPPPGTRV) MHC Tetramer | ea | Creative Biolabs |
MHC-LC2773 | PE-A*02:01/Human CEACAM5 (LLTFWNPPT) MHC Tetramer | ea | Creative Biolabs |
MHC-LC3193 | BV421-A*02:01/Human CEACAM5 (IMIGVLVGV) MHC Tetramer | ea | Creative Biolabs |
MHC-LC137 | PE-A*02:01/Human CEA (YLSGADLNL) MHC Tetramer | ea | Creative Biolabs |
MHC-LC3101 | PE-A*02:01/Human ERBB2 (KIFGSLAFL) MHC Tetramer | ea | Creative Biolabs |
MHC-LC007 | PE-A*02:01/Human Her-2/neu (RLLQETELV) MHC Tetramer | ea | Creative Biolabs |
MHC-LC3112 | PE-A*02:01/Human TP53 (KTCPVQLWV) MHC Tetramer (CAT#: MHC-LC3112) | ea | Creative Biolabs |
MOB-400CQ-1mg | Mouse Anti-T7 RNA Polymerase Antibody (CBL-C001) (CAT#: MOB-400CQ) | 1mg | Creative Biolabs |
GBG0078S | Blood group H [BSA] | 1mg | Creative Biolabs |
TAB-388CT | Anti-Human SOST Therapeutic Single Domain Antibody (6-E12) | 10mg | Creative Biolabs |
AGM-034YJ | Mouse Anti-CD77 Monoclonal Ant | 100ug | Creative Biolabs |
HPAB-2032-FY | Human Anti-VZV Recombinant Antibody (clone 10) | 100ug | Creative Biolabs |
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