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一、產品描述

產品中文名稱： CC/Mount™ 水溶性封片劑（亦稱水性封固介質/水性 mounting medium）

產品英文名稱： CC/Mount™ Aqueous Permanent Mounting Medium

品牌： Diagnostic BioSystems（簡稱DBS，美國診斷生物系統公司）

目錄貨號（Catalog Number）： K002

常見規格： 30 mL 瓶裝（透明粘稠、即用型液體）

產品形態： 澄清粘稠液體（Clear viscous ready to use mounting medium），水性基質，無需復溶或稀釋，開瓶即可直接使用

主要防腐成分備注： 本品含有Sodium Azide作為防腐劑組分，操作中請參照實驗室化學品安全規范進行接觸防護與廢棄物處置

預期用途聲明： 本產品專為體外診斷及科研用途設計（For In Vitro Diagnostic Use / For R&D use），適用于經免疫組織化學（IHC）染色、原位雜交染色及各類顯色/熒光標記后的組織切片之封片保存

二、產品概述與適用范圍

在現代病理學與生命科學研究中，組織切片經過免疫組化染色（過氧化物酶系統如 HRP/DAB、堿性磷酸酶系統如 AP/Fast Red 等）或免疫熒光染色后，如何將這些來之不易的染色結果穩定地固化下來、實現長期存檔且光學品質不劣化，始終是日常制片流程里最關鍵的一步收尾環節。傳統的水性封片劑雖然操作安全，但往往折射率偏低，干燥后組織看起來灰蒙蒙的，缺乏脫水透明后有機封片劑那種清亮通透的質感；而傳統的有機封片劑（如二甲苯系/甲苯系 mountant）雖然成像效果好，卻伴隨揮發性有機溶劑氣味、需要嚴格脫水步驟、并且會使某些水性顯色底物（如 AEC）溶解褪色，對熒光染料也構成光漂白加速風險。

CC/Mount™ 正是為了在上述矛盾中尋找一個可操作的平衡點而被開發出來的一種水性基質、但具備高折射率的封固介質。它在配方設計上將水性介質的光學屬性推向接近有機 mountant 的表現區間，使得染色組織切片在不經有機溶劑脫水的前提下，也能呈現出接近"脫水透明標本"的清晰外觀；同時憑借其偏堿性的 pH 環境，為熒光信號提供額外的穩定性支撐。由于它是水基體系，因此與 AEC 等有機不溶性但水敏感的顯色底物兼容性良好——這也是它在 IHC 雙路徑（DAB 路徑 / AEC 或 Fast Red 路徑）實驗室里被反復選用的核心原因之一。

本品適用于但不限于以下染色體系的切片封固保存：

過氧化物酶（Peroxidase）顯色系統：DAB（3,3'?二氨基聯苯胺）及其衍生物顯色產物

堿性磷酸酶（Alkaline Phosphatase）顯色系統：Fast Red（固紅）/ BCIP?NBT / BCIP?INT 等底物局部沉淀產物

免疫熒光染色切片：FITC（異硫氰酸熒光素）及藻膽蛋白類（phycobiliproteins）等熒光標簽

其他水性不溶發色團定位實驗：凡顯色產物為"有機不溶性沉淀"且不宜接觸有機溶劑的場景

三、工作原理（為什么它能做到"水性介質卻像有機封片的效果"）

3.1 折射率的關鍵作用

在光學顯微鏡下觀察組織切片時，光線穿過蓋玻片 → 封固介質 → 組織 → 載玻片，每一步都存在折射率差異。當封固介質的折射率與玻璃（約 n≈1.52–1.54）和組織結構的"背景基質"差距較大時，未染色區域會產生明顯的散射界面，使視野顯得灰暗渾濁；反之，當封固介質的折射率更接近玻璃折射率時，非染色區域的散射減弱，組織結構會呈現出更清亮、對比度更高的觀感——這也就是為什么傳統流程里要用梯度酒精→二甲苯脫水再用 DPX / Permount 之類有機 mountant 封片，本質上都是在拉平折射率差。

CC/Mount™ 的設計思路并不是走"脫水→疏水有機溶劑"的老路，而是把水性高分子/溶質體系調配到足夠高的光學密度與折射率（very high refractive index for an aqueous medium），使最終干燥固化后的膜層本身在光學上更接近有機 mountant 的效果。因此，組織在 CC/Mount 中固化后，外觀上可以接近脫水標本的通透感，而無需將切片暴露于二甲苯或甲苯蒸氣中。

3.2 干燥固化形成穩定聚合物膜層

CC/Mount 為粘稠液態，涂布于切片表面后，通過加熱干燥（推薦70°C烘箱）或室溫緩慢蒸發固化，逐漸形成一層堅硬、透明、基本不溶于水的固態膜。這個膜層把染色區域物理性地"鎖"在里面，阻止空氣氧化、濕氣滯留與微生物侵蝕帶來的染料降解，從而實現保存的目的。由于它是水性體系固化而成，對 AEC 這類不溶于水的沉淀型顯色產物不構成"溶劑溶解褪色"威脅。

3.3 偏堿性 pH 對熒光信號的穩定意義

很多熒光基團（尤其是 FITC 通道）在偏酸性環境下更容易發生質子化導致的熒光淬滅或光譜漂移。CC/Mount 的高 pH 環境（相對于普通水性封片劑）有助于降低這一風險，延長熒光切片的可用觀察窗口。需要注意的是：對于對熱敏感的熒光染料，品牌方案給出了"不加熱、改用室溫固化+覆蓋玻片"的替代路徑（詳見后文操作流程），以避免70°C加熱引起任何光物理特性變化。

四、產品特點（優勢與技術亮點）

（1）水性體系——免去有機溶劑暴露風險

CC/Mount 以水為分散連續相，操作人員無需處理二甲苯、甲苯或揮發態烴類溶劑的蒸氣，這在改善通風不良環境的安全性與降低實驗室職業健康負擔方面具有現實意義。當然，本品仍屬于化學品范疇，含有防腐劑，仍需佩戴常規防護（護目鏡、手套），不能等同于"隨意涂抹的文具膠水"。

（2）高折射率的水性介質——成像品質更接近有機封片效果

這是 CC/Mount 區別于普通水性甘油緩沖封片劑的關鍵。普通水性封片劑干燥后往往留下霧感，而 CC/Mount 的折射率優化使其在固化后能提供更高的組織分辨率與更清晰的背景表現，滿足多數常規閱片與數字化掃描（slide scanner）對透明度的要求。

（3）無需蓋玻片即可完成封存（可選模式靈活）

標準用法下，CC/Mount 不要求加蓋玻片——它在切片表面自行固化成膜，形成自支撐的保護層。這在高通量實驗室可以減少蓋玻片耗材成本、降低蓋片過程中產生氣泡的返工率。若出于歸檔習慣或油鏡兼容需求仍希望使用蓋玻片，本品也給出明確的后置有機封片（post?mounting）路徑：待 CC/Mount 充分干硬后，再在其上疊加一層薄層有機 mountant（如 DPX / Permount / E?Z Mount / ProTexx / Shandon?Mount 等），然后覆蓋蓋玻片即可。

（4）對主流 IHC 顯色底物的兼容性覆蓋面廣

明確支持的顯色底物/染料類型包括：

AEC（氨基乙基卡巴唑，有機不溶但可被有機溶劑溶解褪色，故特別適合水性封片路線）

DAB 及其相關聚合物顯色體系

Fast Red（固紅，AP系統常用）

BCIP/NBT 與 BCIP/INT（堿性磷酸酶顯色沉淀）

FITC 及 藻膽蛋白類熒光染料

這一覆蓋范圍使得 CC/Mount 能作為多個染色平臺共用的一瓶封片劑，減少實驗室試劑管理復雜度。

（5）可逆性——必要時可重新開封重試

與傳統有機封片一旦干了就幾乎不可逆不同，CC/Mount 作為水性基體系，若后續發現封片不均、誤操作為需要重做時，可將載玻片浸泡于去離子水中（配合磁力攪拌器溫和攪動數小時至過夜），使固化膜逐步軟化剝離脫離，從而給技術人員留出補救余地。

五、儲存條件與穩定性

儲存溫度：室溫保存（Store at room temperature）。請勿冷藏（Do not refrigerate）。

背后的原因與 CC/Mount 的物理形態直接相關：它是一瓶澄清粘稠液態 mountant，低溫冷藏可能導致組分粘度異常升高、析出或瓶口結晶堵塞；此外冷藏環境常見的冷凝水若進入瓶口也可能帶來微生物污染風險。室溫避光、瓶蓋緊閉存放是推薦的日常保管方式。

防腐劑提示： 本品含Sodium Azide作為抑菌防腐組分，操作時避免直接攝入或接觸開放性傷口；廢液處置請遵守所在機構關于含疊氮化合物廢液的處理規定（通常不作為大宗有機鹵廢液，但仍應納入化學品廢棄物登記）。

有效期： 請嚴格遵守瓶身標簽上印刷的有效期（Do not use after expiration date printed on label），過期產品的粘度、pH 緩沖能力與光學性能均可能發生偏移，不建議憑"看著沒壞"來主觀延用。

六、解決實驗中的哪些痛點（場景化問題—解決方案對應關系）

6.1 傳統有機封片導致 AEC 顯色"瞬間消失"

問題本質： AEC 的顯色產物不溶于水，但可溶于有機溶劑（二甲苯/甲苯/多數芳香烴）。一旦走標準脫水—透明—DPX 路線，紅色信號會被溶解帶走。

CC/Mount 的應對： 全程水性體系封固，AEC 沉淀被物理包埋而非化學溶解，顯色信號得以保留。

6.2 普通水性封片劑干燥后發霧、看不清、數字化掃描噪點多

問題本質： 折射率偏低導致大量光散射，使得未染色區不透亮，組織結構邊緣模糊，尤其在大面積脂肪組織或低細胞密度區域更加明顯。

CC/Mount 的應對： 高折射率水性配方使固化膜在視覺上更接近有機 mountant 的清亮感，提升分辨率與觀感對比度。

6.3 蓋玻片封片時總是進氣泡、氣泡壓在核上毀一張片

問題本質： 粘度過高的有機 mountant 或不恰當的傾倒角度會裹入微泡；另外有些水性 mountant 在滴加時因瓶口設計不良會"擠"出氣泡。

CC/Mount 的應對： 其一，標準流程可以不加蓋玻片，從根本上消除蓋片氣泡問題；其二，即使要蓋玻片，產品說明書中明確給出了預處理技巧——取下紅色端蓋后用鋒利刀片或剪刀將前端切掉，使液體能平穩流下而非靠擠壓涌出，同時在使用前將瓶子倒置靜置以驅出微量氣泡。

6.4 熒光切片放幾個月后信號暗淡甚至無法判讀

問題本質： 熒光染料的光漂白與水解/質子化雙重作用；封存環境若偏酸、若含氧滯留，則會加速衰減。

CC/Mount 的應對： 偏堿性 pH 有助于穩定熒光強度；且水性固化膜隔絕了直接空氣接觸。對于熱敏感熒光，方案還給出室溫固化的非加熱分支（見操作流程），避免70°C熱處理造成額外的影響。

6.5 某些特殊染色或脆弱組織不耐梯度酒精—二甲苯的劇烈脫水

問題本質： 組織脆裂、脫片風險增加。

CC/Mount 的應對： 切片在染色水洗結束后只需吸去周圍多余水分但不讓組織干透（tissue must be moist prior to mounting），即可直接加 CC/Mount 封固，跳過醇/二甲苯系列，降低對易碎標本的機械沖擊。

七、使用方法與操作流程（分步詳解）

前提提醒： 以下流程基于 Diagnostic BioSystems 品牌數據頁（DS?2023?A）以及 Sigma?Aldrich PIS 文件中給出的標準操作框架整理而來。不同實驗室的切片厚度、組織類型、染色體系與設備條件會有差異，建議在正式運行前用 1–2 張測試切片做條件確認。

第一步：準備工作與瓶口處理

從瓶子上取下紅色端蓋（red end cap / red tip），然后用鋒利剃刀刀片或小型剪刀將瓶嘴前端切掉。這一步看似簡單但很關鍵：原裝瓶的尖嘴如果保持封閉狀態僅靠捅開一個小孔，擠壓出液時會把 CC/Mount "噴射"出來并裹入微小氣泡；切掉前端后，液體可以以穩定的滴狀流淌，顯著減少微泡形成。

另外，在開始操作前，可以將瓶子倒置放置于一個容器中幾分鐘（瓶口朝下但不要接觸臟表面），利用重力讓內部可能存在的零星氣泡上浮離開瓶嘴區域。

第二步：染色后切片的前置狀態控制

染色完成并經最終水洗后，用潔凈紙巾/無塵紙輕輕吸去載玻片周圍多余的水分，但絕對不要讓組織區域本身變干（do not let tissue specimen dry）。說明書中強調：tissue must be moist prior to mounting。組織一旦在封片前干透，細胞形態會發生皺縮改變，且后續 CC/Mount 滲入的均勻性也會受影響。

理想狀態是：組織表面有一層極薄的附著水膜，周圍無積水。

第三步：滴加 CC/Mount

取 2–3 滴 CC/Mount 直接滴加在組織切片區域上。然后通過手腕輕輕轉動/旋轉載玻片，使液體在表面鋪展成一層均勻的薄膜，確認整個組織區域被覆蓋。

此時如果看到局部有肉眼可見的氣泡，可以用移液器吸頭前段輕輕撥動邊緣使其移至邊界外，或在尚未開始干燥前補一滴料液填補缺口——但通常只要瓶口處理得當、組織面濕潤且操作平穩，氣泡問題會大幅減少。

第四步A：標準加熱固化法（適用于 DAB / AEC / Fast Red 等非熱敏顯色切片）

將載玻片水平放入預熱至 70°C 的烘箱/干燥箱中。注意確認烘箱擱板是水平的——傾斜會導致 CC/Mount 在半干狀態下流動聚集、厚度不均，最終固化膜出現條紋或邊緣堆積。

干燥固化時間通常為 10–20 分鐘，具體取決于你實際涂布的量（面積大小與液層厚薄）。取出后讓其冷卻至室溫，即可直接在顯微鏡下觀察。此模式下一般不加蓋玻片。

第四步B：非加熱室溫固化法（適用于熒光染料標記切片——如 FITC 等，若希望避免70°C熱暴露）

如果切片帶有熒光標記且你傾向于不加熱處理：

在滴加液態 CC/Mount 覆蓋組織后，直接覆上蓋玻片（此時 CC/Mount 仍處于液態）

將載玻片在室溫下靜置 45 分鐘至 1 小時，允許 CC/Mount 在蓋片下方緩慢固化

固化后可在蓋玻片四周邊緣用無色快干指甲油（nail polish）封邊，以防止空氣滲入和蓋片滑動，利于較長期存放

補充說明：也有實驗室選擇熒光切片不加熱也不加蓋片，僅用加熱法的干膜方式，但前提是你需要接受干膜表面直接使用油鏡時需要后處理（見下一步）。

第五步：如需使用浸油物鏡（oil lens）或需要更標準的封片檔案外觀——后置有機封片（Post?Mounting）

CC/Mount 固化形成的干膜表面可以直接用干鏡觀察；但如果你的閱片或掃描協議要求使用浸油物鏡，或者出于歸檔統一規范你想最終仍有蓋玻片，則品牌給出以下 post?mounting 路徑：

確認 CC/Mount 已經干硬（手指輕觸邊緣不粘手、膜體穩固）

在其上再施加一層有機基封固劑（例如 E?Z Mount、ProTexx、Permount、Shandon?Mount 或 DPX 等均可，以你實驗室既有的為準）

然后覆蓋蓋玻片

這樣做的結果是：底層 CC/Mount 負責保護水性不溶顯色底物不被有機溶劑溶解，上層薄有機 mountant 負責提供傳統封片的界面相容性（油鏡兼容、邊緣密封）。且 CC/Mount 本身的折射率已經調得很接近有機 mountant，因此兩層疊合的光學過渡不會引入明顯的額外界面散射。

第六步（必要時）：移除 CC/Mount（返工/重做場景）

如果封片結果不滿意需要重新處理：

將載玻片浸入裝有去離子水的燒杯中

放置在磁力攪拌器上，低速溫和攪動

浸泡 數小時至過夜 可使干燥的 CC/Mount 膜層充分軟化脫落

取出后用流水輕柔沖洗，根據需要重新進行后續封片

這種可逆性是水性 mountant 相對有機 mountant 的一大實用優勢，但也意味著：長期存檔過程中應避免長時間泡水環境——正常干燥固化后的 CC/Mount 膜在日常切片盒存放條件下是穩定的，不需要額外防水保護。

八、常見問題與解決方案（FAQ / Troubleshooting）

Q1：滴加時總是出小氣泡，膜干了以后每個氣泡留下一個"亮洞"，怎么辦？

原因分析： 瓶嘴未切掉導致出液不暢、靠擠壓出液裹氣；或組織表面已經半干了、液滴落在干點上彈濺裹氣；或操作臺有風（風扇/空調直吹）導致液面局部結皮拉扯。

解決方案：

嚴格執行"去紅色端蓋→切掉前端"的步驟，讓液體靠自重穩定滴落

使用前將瓶子短暫倒置靜置排泡

確認組織是 moist 而非 dry 狀態再滴加

滴加后盡量減少氣流直吹，自然鋪展后再移入烘箱

Q2：70°C烘完冷卻后發現膜面有裂紋或翹邊卷起？

原因分析： 可能是涂布厚度不均勻（邊緣太薄中間太厚），或烘箱溫度過高/局部熱點，或切片本身殘留洗滌劑導致界面附著力變差。

解決方案：

檢查烘箱實際溫度（用獨立溫度計校準），確認擱板水平

滴加量控制在剛好全覆蓋的薄層，不要堆料

玻片清洗流程中確認漂洗充分去除清潔劑的硅殘留

若組織區域較小，可適當擴大涂布直徑至組織周邊空白區1–2mm，增加錨定面積

Q3：AEC 紅色信號在 CC/Mount 封完后還是覺得比預期淺——是褪色了嗎？

原因分析： AEC 的信號強度受水膜殘余影響很大：如果組織表面殘留水太多，CC/Mount 被稀釋變薄，折射率效應打折扣，看起來會"發霧"，并非真正褪色。另一種可能是最終觀察時的白平衡/燈強與以前習慣不同造成的感知偏差。

解決方案：

封片前用無塵紙吸掉玻片周圍積水，但保持組織區微濕——這個"微濕不積水"的平衡點值得用幾張練習片找手感

確認 CC/Mount 涂布均勻且足量覆蓋

如確實需要更高對比度的存檔記錄，可補拍數字圖像留存

Q4：熒光切片，用了70°C加熱后熒光變弱——還能不能用加熱法？

原因分析： 部分熒光系統（尤其 FITC 通道）對熱不甚耐受，70°C雖只十來分鐘，仍可能加速光物理衰減。

解決方案：

對熒光切片改用室溫固化分支：液態 CC/Mount + 蓋玻片 + 45min–1h 室溫固化 + 指甲油封邊

若你仍偏好干膜不加蓋片的形態，可試驗更低溫度（如 50–60°C）延長干燥時間的折中方案，但需驗證你特定染料的信號保持情況

無論如何，熒光切片的最佳實踐一貫是：盡早成像、分通道存檔、避光保存

Q5：長期存放后蓋玻片邊緣有白色結晶析出？

原因分析： CC/Mount 含防腐，若環境濕度波動大且邊緣密封不全，可能出現微量鹽析結晶（疊氮化物在某些條件下可在邊緣滲出結晶化）；亦可能與所用后封固有機 mountant 的溶劑交互有關。

解決方案：

如走 post?mounting 路線，確保有機 mountant 層連續完整、蓋片邊緣密封到位

如用純 CC/Mount 干膜路線，無需蓋片時通常不存在"邊緣滲出"環境，但若切片盒受潮嚴重任何水基體系都可能吸附潮氣——保持干燥存儲仍是基本原則

白色結晶若為少量且僅在邊緣，不影響組織中央判讀；若侵入組織區則需評估是否重做

Q6：能不能直接省掉加熱，室溫放干就行？

原因分析： 技術上室溫也可以逐漸蒸發固化，但耗時更長且環境塵埃容易落在表面；品牌給出的是 70°C 10–20 min 的可控窗口，目的是在保證效率的同時獲得均勻一致的固化膜。

建議： 若你有充分驗證數據表明室溫過夜在你的環境濕度與組織類型上也能得到均勻膜且無霉變風險，可以作為備選；但從可重復性與批間一致性角度，70°C短時干燥是更推薦的標準做法。

Q7：CC/Mount 干了以后可以用香柏油（ immersion oil）直接頂在干膜上觀察嗎？

原因分析： 干膜表面從很多用戶的實操反饋來看可以耐受短暫油鏡接觸，但 CC/Mount 畢竟不是傳統硬質樹脂，長期油浸接觸的清潔與殘留問題需要評估。

建議： 若你頻繁使用 40×/60×/100× 油鏡，更穩妥的是走 post?mounting 路線——CC/Mount 干透后加一層 DPX 之類有機 mountant 再蓋片，這樣就回歸經典油鏡兼容界面。

九、安全注意事項與廢棄物處理

本品含有Sodium Azide作為防腐劑，操作時請佩戴護目鏡與防護手套；避免吸入瓶口附近氣味（雖然是水性體系，但一般性化學品防護不可省略）。

不要將本品倒入普通下水道而不經稀釋/登記——疊氮化物在高濃度下可與金屬管道（特別是銅/鉛）形成敏感疊氮化物，請按所在機構的化學廢棄物分類處置。

儲存于室溫、遠離食品與飲品、遠離兒童可及區域。標簽上如有破損導致無法辨識有效期或批號，建議停用。

本產品為體外診斷/研究用途，不得用于藥物、家庭或其他未經聲明的用途。

十、質量與合規說明

Diagnostic BioSystems 的產品質控框架參照 CLSI（Clinical and Laboratory Standards Institute）質量標準為免疫組化檢測的設計與實施提供的指引精神來構建其 QC 敘述。用戶在實際臨床實驗室引入本品時，應將其納入本實驗室的 IHC 試劑驗證流程（lot?to?lot一致性、陰陽性對照切片的外觀評估、存檔穩定性抽查等），并以實驗室負責人確認簽字的記錄作為合規留檔。

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（注：本文內容基于品牌公開資料及行業常規信息整理，具體以品牌信息文檔為準。）

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