480pg/ml	5號標準品	150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
240pg/ml	4號標準品	150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
120pg/ml	3號標準品	150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
60pg/ml	2號標準品	150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
30pg/ml	1號標準品	150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

人D二聚體（D2D）ELISA試劑盒標本要求

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

上海恒遠生物長期專業(yè)代理美國進口分裝、原裝ELISA“人D二聚體（D2D）ELISA試劑盒”，現(xiàn)貨供應(yīng)，*，質(zhì)量保證。中英文雙版說明書，提供實驗代測服務(wù)。需要產(chǎn)品以及其它詳細信息請直接與我們，一個工作日之內(nèi)給予答復(fù)。

人D二聚體（D2D）ELISA試劑盒操作步驟

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