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336次試劑盒供應商提供ELISA操作方法技巧:
1. 試劑準備
① 稀釋緩沖液:用950ml蒸餾水稀釋50ml的濃縮緩沖液。
② 將腦鈉肽標準液用1ml稀釋緩沖液溶解,BNP濃度則為1000μg/l。用稀釋緩沖液稀釋成下列濃度:0.01、0.1、1、10、100μg/l。
③ 分別用5ml稀釋緩沖液溶解一抗、生物素標記人BNP肽段,搖勻。
④ 取鏈親和素-辣根過氧化物酶結合物(SA-HRP)12μl加入到12ml稀釋緩沖液中,搖勻(用前稀釋)。
2. 操作
在96孔微量反應板上,設A1為空白對照,B1為總結合孔,C1到G1加系列標準品,其余孔加待測定血清樣品。
ELISA試劑盒的組成:
① 終止液(2 mol/L 鹽酸15ml)
② 20×濃縮緩沖液(50ml)
③ 包被有二抗的微量反應板(96孔)
④ 封板膠(3張)
⑤ 一抗(兔抗人BNP IgG)
⑥ BNP標準液(1μg)
⑦ 生物素標記人BNP段
⑧ 鏈親和素-辣根過氧化物酶結合物(SA-HRP 30μl)
⑨ 底物液(TMB 12ml)
試劑盒供應商提供ELISA計算技巧:
在半對數坐標紙上,以標準品濃度的對數值為橫坐標,各標準品相應的吸光度為縱坐標,繪制半對數坐標校正曲線。由校正曲線求得樣品的濃度(μg/l)。
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