ITC等溫滴定量熱儀儀器使用要求解讀

閱讀：342 發布時間：2025-12-10

　　ITC等溫滴定量熱儀的使用要求涵蓋樣品準備、儀器操作、實驗條件控制、安全防護與數據處理等多個方面，具體如下：

　　一、ITC等溫滴定量熱儀樣品準備要求

　　1.樣品純度與穩定性

　　樣品需高度純化，避免雜質干擾結合反應或熱量測量。

　　確保樣品在緩沖液中穩定，不發生聚集、沉淀或變性。例如，蛋白質樣品需通過離心或過濾去除可溶性聚集物，并評估其均一性。

　　若樣品含固體，需提供溶解和清洗方法；強酸強堿可能腐蝕池體，需避免使用。

　　2.樣品濃度與體積

　　滴定液（滴定針中）與被滴定液（樣品池中）的濃度需合理匹配。

　　樣品池體積需一次性加滿；滴定針體積。

　　一組樣品測試需準備滴定液和被滴定液各5mL，緩沖液10mL；若增加滴定或被滴定種類，需相應增加體積。

　　3.樣品溶液性質

　　滴定液需為透明均勻液體，無肉眼可見沉淀或懸浮物，且在實驗過程中不析出固體。

　　被滴定液最好為透明均勻液體，若為懸濁液需與工程師特殊確認。

　　滴定液和被滴定液的pH值需一致，最大差異不超過0.2pH單位，以減少稀釋熱干擾。

　　二、ITC等溫滴定量熱儀儀器操作要求

　　1.開機與預熱

　　開啟計算機電源，啟動操作系統后開啟ITC儀器電源。

　　等待儀器預熱至設定溫度并穩定。

　　2.樣品裝載

　　樣品池：用上樣針裝載與樣品相同的緩沖溶液潤洗樣品池3-5次，移除緩沖溶液后，取300μL樣品緩慢注射至樣品池內。

　　參比池：用脫氣的去離子水潤洗參比池3-5次，移除去離子水后，取300μL脫氣的去離子水緩慢注射至參比池內。

　　注射器：仔細裝載滴定物至注射針筒中，確保無氣泡殘留；將注射針筒旋轉裝載在注射器上，擦拭多余溢出樣品，并安裝在ITC上。

　　3.參數設置

　　設定攪拌速率、操作溫度、注射器體積及滴定程序等參數。

　　根據實驗需求選擇平衡模式，確保實驗開始前系統達到穩定狀態。

　　三、ITC等溫滴定量熱儀實驗條件控制要求

　　1.溫度控制

　　實驗過程中需精確控制并穩定溫度，溫度波動會影響結果準確性。

　　ITC儀器溫度范圍通常為2-80℃，可根據研究體系選擇合適溫度。

　　2.脫氣處理

　　樣品和緩沖液需進行脫氣處理，以減少氣泡對實驗的干擾。

　　脫氣溫度設定為操作溫度，真空度高以上，脫氣時間10分鐘以上。

　　3.滴定參數選擇

　　合理選擇滴定次數、每次滴定體積和滴定間隔時間。

　　濃度過高或過低、滴定次數過少可能導致數據不準確或不完整，過多則會延長實驗時間。

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