NanoTemper MST分子互作檢測成套體系技術

時間：2026/6/17閱讀：199

NanoTemper MST分子互作檢測成套體系技術

一、成套體系概述

本套NanoTemper MST微量熱泳動分子互作檢測系統配套體系由二代RED-NHS蛋白熒光標記試劑盒（MO-L011）與Premium抗吸附專用毛細管（MO-K025）組成，為MST分子親和力檢測的標準成套組合。整套體系實現蛋白熒光標記、樣品純化、抗吸附上樣、儀器檢測全流程標準化，解決傳統實驗中標記不穩定、背景噪音高、蛋白管壁吸附、數據重復性差、弱結合靶點無信號等行業痛點。廣泛應用于藥物靶點親和力篩選、蛋白-小分子、蛋白-抗體、蛋白-多肽、膜蛋白互作、PROTAC分子評價等生命科學研究與創新藥物研發領域。

整套配套設備儀器類型：MicroScale Thermophoresis (MST) Molecular Interaction Analyzer（Monolith / Dianthus全系紅光機型）

二、成套組成清單及品類界定

本成套系統包含兩大核心組件，品類區分明確，分別對應生化試劑與儀器專用耗材：

1. MO-L011 RED-NHS 2nd Generation 蛋白熒光標記試劑盒

品類：生化試劑 / 標記試劑盒

貨號：MO-L011

用途：蛋白賴氨酸位點共價熒光標記、為MST檢測提供穩定熒光信號源，屬于實驗反應核心試劑。

2. MO-K025 Monolith Premium Capillaries

品類：儀器一次性耗材

貨號：MO-K025（200支/盒）

用途：MST上機檢測專用樣品承載毛細管，高分子抗吸附涂層，消除非特異性吸附，保障數據基線穩定。

三、MO-L011試劑盒核心技術參數與原理

1. 產品基礎參數

• 染料體系：第二代 NT-647 RED-NHS 活化熒光染料（紅光通道）

• 激發/發射波長：650 nm / 670 nm

• 適配蛋白：≥5 kDa，濃度 2–20 μM

• 反應次數：4次獨立微量標記

• 標記方式：NHS-酯與蛋白賴氨酸伯氨基共價偶聯

• 標記時長：30 min；全程實驗≤60 min（含純化）

• 標記度DOL：0.5–1.2

2. 技術原理

二代NT-647染料帶有琥珀酰亞胺活性酯（NHS-Ester），在弱堿性無氨基緩沖體系中與蛋白表面賴氨酸殘基發生特異性共價結合，形成穩定酰胺鍵。標記條件溫和、不破壞蛋白構象與結合活性，熒光標記不可逆、無脫落，可滿足長時間多點梯度MST檢測。

3. 二代產品核心升級優勢

• 熒光量子產率提升35%，信噪比顯著提高

• 大幅改善弱親和力（μM~mM）靶點信號振幅

• 降低染料非特異性吸附，基線平穩無漂移

• 標記均一性更強，批次重復性偏差＜10%

• 蛋白回收率穩定60%–90%，適合微量珍貴樣品

四、MO-K025 Premium毛細管核心技術參數與優勢

1. 產品參數

• 規格：200支/盒，一次性硼硅玻璃毛細管

• 單支上樣體積：4–5 μL

• 內壁工藝：共價接枝中性高分子刷抗吸附涂層

• 適配機型：Monolith NT.115、Pico、Monolith X、Dianthus全系紅光設備

2. 核心技術價值

Premium毛細管采用化學鍵合親水涂層，屏蔽玻璃管壁負電荷，從根源解決蛋白、抗體、疏水多肽、膜蛋白、PROTAC小分子的非特異性吸附問題。相比普通Standard毛細管，可有效避免基線下降、曲線畸變、KD擬合偏差等常見實驗問題，是高精度、弱結合、難測體系的必配耗材。

五、整套實驗體系工作流程（標準化SOP）

第一步：蛋白樣品準備（無Tris、無甘氨酸、無高濃度咪唑）

第二步：MO-L011系統熒光標記（染料:蛋白=3:1，避光30 min）

第三步：試劑盒自帶脫鹽柱純化去除游離染料，獲得純標記蛋白

第四步：DOL標記度質控，篩選合格標記樣品

第五步：MO-K025 Premium毛細管上機，避免吸附干擾

第六步：MST梯度檢測與KD擬合分析

六、成套體系技術優勢（整體協同優勢）

• 光學匹配：NT-647染料光譜與儀器紅光檢測通道原廠校準，無串色、無雜峰

• 標記+抗吸附閉環：試劑盒保證標記質量，Premium毛細管保證上機穩定性，成套解決95%以上MST實驗失敗問題

• 適配疑難靶點：膜蛋白、疏水蛋白、弱結合小分子、多肽、抗體均可穩定檢測

• 數據精度高：擬合R2普遍＞0.98，批次重復性佳

• 實驗效率高：1小時完成標記純化，當天出KD數據

• 體系標準化可溯源：全部為NanoTemper原廠標準配套，符合藥物研發、SCI論文數據規范

七、適用研究場景

• 小分子藥物靶點親和力篩選與KD定量

• 抗體/抗原結合驗證、親和力排序、競爭結合實驗

• 蛋白-蛋白、蛋白-多肽相互作用研究

• 膜蛋白、GPCR、離子通道體外互作分析

• PROTAC、脂溶性藥物、弱親和力體系研究

• 復雜基質（細胞裂解液、血清）分子互作檢測

八、成套設備儀器標準填寫信息（可直接用于申報）

Instrument Type：MicroScale Thermophoresis (MST) Molecular Interaction Analyzer

配套試劑：NanoTemper MO-L011 RED-NHS 2nd Generation 蛋白熒光標記試劑盒

配套耗材：NanoTemper MO-K025 Premium Capillaries（200 count）

九、供貨

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