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詳細介紹
產品分類：PCR相關
儲存條件：—20℃,36個月
用途：耐熱Taq DNA聚合酶
注意事項：附送10x PCR buffer,Taq DNA Polymerase是從克隆有Thermusaquaticus DNA Polymerase基因的大腸桿菌中表達并經過柱純化分離出來的重組蛋白,其分子量為94 KD。該酶具有5’→3’DNA聚合酶活性和5’→3’核酸外切酶活性,無3’→5’核酸外切酶活性。在PCR反應中,該酶的延伸速度為1-2kb/分鐘,PCR產物3’端帶A,可直接用于T/A載體克隆。該酶無外源核酸酶和細菌基因組DNA?
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
Taq DNA Polymerase | 500U | FS-R7417 |
配制與標定的實驗原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。
實驗方法與判定：
1.對照品溶液的穩定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。
1） 第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。
2） 根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1） 轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。
3） 篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。
5） 之后更換正常培養基培養即可。
球芽孢桿菌谷受體2C抗體（N端）Human CNTF(Ciliary neurotrophic factor) ELISA Kit堿性成纖維生長因子4(bFGF-4)
彎孢菌癌/抗原58抗體Human FLT3(Receptor-type tyrosine-protein kinase FLT3) ELISA Kit堿性成纖維生長因子(bFGF)
解淀粉芽孢桿菌霍奇金淋巴瘤重復蛋白3抗體Human LIF(Leukemia inhibitory factor) ELISA Kit間皮(MSLN)
灰黃青霉增殖相關核仁抗原抗體Human PDGFA(Plaet-derived growth factor subunit A) ELISA Kit間變性淋巴瘤激(ALK)
云南假諾氏菌NALP12抗體Human ABCG1(ATP Binding Cassette Transporter G1) ELISA Kit間α-抑制因子重鏈H1(ITIH1)
琥珀乳牛肝菌富含亮重復結構域蛋白6抗體Human ACA-IgG(Anti-Cardiolipin Antibody IgG) ELISA Kit間-alpha-抑制劑重鏈H4(ITIH4/IHRP/ITIHL1/PK120/PRO1851)
細囊殼富含亮重復結構域蛋白7抗體Human ACC(Acetyl-CoA Carboxylase) ELISA Kit甲狀腺抗體(TAb)
微小鏈霉菌富含亮重復結構域蛋白9抗體Human B2M(Beta2-microglobulin) ELISA Kit甲狀腺(T4)
季也蒙假絲酵母富含亮重復結構域蛋白10抗體Human MUC-1(Mucin-1) ELISA Kit甲狀腺球蛋白(TG)
球毛殼菌（可訂購）鈉鈣交換蛋白2抗體Human ACAT2(Acetyl Coenzyme A Acetyltransferase 2, cytosolic) ELISA Kit甲狀腺抗體(TAb)
煙色小菌核鏈霉菌抑癌基因NDRG2抗體Human IGFBP-5(Insulin-like growth factor-binding protein 5) ELISA Kit甲狀腺結合球蛋白(TBG)
孟氏假單胞菌DNA損傷關蛋白1抗體Human sRAGE(Solube Receptor for Advanced Glycation End product) ELISA Kit甲狀腺激受體β(THRb)
假單胞菌伴肌動蛋白抗體Human CALM1(Calmodulin) ELISA Kit甲狀腺過氧化物(TPO)
草木樨中華根瘤菌抑癌基因NDRG4抗體Human GFAP(Glial fibrillary acidic protein) ELISA Kit甲狀腺肽激抗體(THAA)
綠僵菌NK受體2A抗體Human IgA(Immunoglobulin A) ELISA Kit甲狀腺激免疫球蛋白(TSI)
芹側耳（杏鮑菇）一氧化氮合成-2抗體（誘導型）Human IgE(Immunoglobulin E) ELISA Kit甲狀旁腺激樣蛋白(PLP)
黃海芽孢桿菌Bacillus│marisflavi 質量規格：20000U/g,BR黃芪總皂苷
陰溝腸桿菌Enterobacter│cloacae 質量規格：BR,6萬U/G葛根
茯苓Poria│cocos 質量規格：>95%,BR,M.W:80萬-150萬鬼臼
Taq DNA PolymeraseF II (Mouse coagulation factor II ) ELISA Kit 小鼠Ⅱ規格： 48T
ET(Mouse endotoxin) ELISA Kit 小鼠內毒su規格： 48T
ANP(Mouse Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit 小鼠心鈉肽規格： 48T
PPAR- Gamma(Mouse Peroxisome Proliferator-activated receptor Gamma) ELISA Kit 小鼠過氧化物mei體增殖因子活化受體γ規格： 48T
TSST-1(Mouse toxic shock syndrome toxin) ELISA Kit 小鼠毒性休克綜合征毒su1規格： 48T
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