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英文名稱: Bak BH3 (72-87), TAMRA-labeled
中文名稱: Bak BH3(72-87)TAMRA標(biāo)記多肽
一、分子概述
Bak BH3(72-87)TAMRA標(biāo)記多肽是一種源自人Bak蛋白(Bcl-2 homologous antagonist/killer)的功能性片段,該片段位于Bak蛋白的BH3結(jié)構(gòu)域區(qū)域(氨基酸72至87位)。該區(qū)域在細(xì)胞程序性死亡調(diào)控中具有關(guān)鍵作用,能夠與其他Bcl-2家族蛋白相互作用,從而影響線粒體外膜通透性及下游信號事件。通過在該多肽的N端或C端引入TAMRA(5-Carboxytetramethylrhodamine)熒光標(biāo)記,使其在分子層面研究中具有可視化與定量檢測功能。
二、結(jié)構(gòu)與功能特點(diǎn)
Bak BH3(72-87)片段主要由一段α螺旋結(jié)構(gòu)組成,其疏水面富含亮氨酸、異亮氨酸及纈氨酸等氨基酸殘基,這些氨基酸構(gòu)成了典型的BH3相互作用面。TAMRA標(biāo)記在結(jié)構(gòu)上對多肽的生物學(xué)功能影響較小,但為其提供了紅色熒光特征(激發(fā)波長約540 nm,發(fā)射波長約580 nm),便于在共聚焦顯微成像、流式分析或受體結(jié)合實(shí)驗(yàn)中追蹤其定位和動態(tài)變化。
三、研究應(yīng)用方向
Bak BH3(72-87)TAMRA標(biāo)記多肽常用于探索細(xì)胞內(nèi)蛋白互作的分子機(jī)制,尤其是Bcl-2、Bcl-xL及Mcl-1等抗凋亡蛋白的結(jié)合特性研究。該多肽可作為探針,用于:
1、熒光共定位實(shí)驗(yàn)——觀察Bak片段與特定線粒體蛋白的空間分布;
2、競爭結(jié)合實(shí)驗(yàn)——評估Bak BH3與其他BH3類配體之間的相互作用能力;
3、藥物篩選研究——通過熒光變化監(jiān)測小分子或肽類化合物對Bak家族信號通路的影響;
4、活細(xì)胞成像——借助TAMRA的穩(wěn)定熒光信號,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞狀態(tài)下的動態(tài)觀察。
該標(biāo)記肽在細(xì)胞生物學(xué)、結(jié)構(gòu)生物學(xué)及分子藥理學(xué)研究中具有實(shí)用價(jià)值,可幫助研究者分析蛋白相互作用的動力學(xué)過程及其調(diào)控機(jī)制。
四、物理與化學(xué)性質(zhì)
TAMRA標(biāo)記Bak BH3(72-87)通常為凍干粉末形態(tài),呈橙紅色或淺粉色,易溶于二甲基亞砜(DMSO)或含少量有機(jī)溶劑的水體系中。該肽的分子量受序列及標(biāo)記位置影響略有不同,具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性與光學(xué)信號強(qiáng)度。TAMRA分子較疏水,因此在使用時(shí)應(yīng)避免強(qiáng)光照射及長時(shí)間暴露于氧化環(huán)境,以防熒光衰減。
五、純度與檢測
本產(chǎn)品通常采用高效液相色譜(HPLC)純化,純度可達(dá)95%以上,確保實(shí)驗(yàn)信號的特異性與可重復(fù)性。通過質(zhì)譜(MS)驗(yàn)證分子量正確性,以保證序列和標(biāo)記位點(diǎn)的精確性。
六、溶劑與配制
推薦使用無菌水、PBS緩沖液或DMSO溶解,根據(jù)實(shí)驗(yàn)類型確定濃度。對于細(xì)胞成像實(shí)驗(yàn),可先制備高濃度母液,再稀釋至使用濃度(一般為0.5–5 µM)。避免反復(fù)凍融,以免影響肽結(jié)構(gòu)及熒光性能。

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