中英文：His純化磁性微球，His Purification Magnetic Particles

一、技術原理與核心優勢

His純化磁性微球（His Purification Magnetic Particles）是一類基于金屬螯合親和層析原理開發的蛋白純化工具。其核心結構由磁性瓊脂糖微球基質與表面偶聯的氮川三乙酸（NTA）配體組成，通過螯合鎳離子（Ni2?）形成穩定的八面體或平面四邊形配位結構。這種設計使微球表面暴露多個配位位點，可特異性結合組氨酸標簽（His-tag）蛋白的咪唑側鏈，實現目標蛋白的高效捕獲。

與傳統柱層析相比，磁性微球無需依賴重力或壓力驅動流動，通過外加磁場即可完成固液分離，顯著簡化了操作流程。其超順磁性內核（粒徑30-150μm）確保微球在磁場中快速響應，同時避免團聚現象，適用于高通量自動化平臺及手動小規模純化。

產地：西安瑞禧生物

用途：科研專用

二、規格與包裝信息

1. 基礎規格

粒徑范圍：30-150μm（主流產品），部分型號提供10-30μm或300nm-1μm選項以適應不同樣本黏度需求。

磁珠濃度：10%-25%（V/V），即每毫升懸浮液含100-250μL磁性微球。

蛋白結合能力：>10-60mg His-tag蛋白/mL磁珠（依具體型號及目標蛋白特性而定）。

金屬離子密度：30-50μmol Ni2?/mL磁珠，確保充足配位位點。

2. 包裝形式

常規包裝：1mL、5mL、10mL、25mL、100mL預分裝懸浮液，采用無菌低蛋白吸附離心管封裝。

工業級包裝：支持定制大體積（如100mL×10瓶/箱）以滿足規模化生產需求。

配套試劑：部分供應商提供完整試劑盒，含裂解緩沖液（Lysis Buffer）、洗滌緩沖液（Wash Buffer）及洗脫緩沖液（Elution Buffer）。

三、存儲條件與穩定性

溫度要求：2-8℃冷藏保存，嚴禁冷凍（低溫可能導致磁核結構破壞或瓊脂糖基質脫水收縮）。

緩沖體系：懸浮于含20%乙醇的1×PBS保護液中，乙醇可抑制微生物生長并維持微球分散狀態。

有效期：未開封狀態下保質期2年，開封后建議6個月內使用完畢。

運輸要求：4℃冰袋運輸，避免劇烈震動導致磁珠沉降或破碎。

四、應用場景與操作流程

1. 典型應用

可溶性蛋白純化：從細菌、酵母、昆蟲或哺乳動物細胞裂解液中直接捕獲胞內或分泌型His-tag蛋白。

包涵體蛋白復性：通過尿素變性處理后，利用磁珠純化復性產物。

免疫共沉淀（Co-IP）：結合特異性抗體實現蛋白相互作用研究。

2. 操作步驟

樣本準備：細胞裂解后離心取上清，調整pH至7.0-8.0并過濾除雜。

磁珠平衡：取適量磁珠懸浮液，磁場分離后棄上清，用裂解緩沖液洗滌2次。

結合反應：將磁珠與樣本混合，室溫旋轉孵育30分鐘（低溫可延長至1小時）。

洗滌去雜：磁場分離后，用含20mM咪唑的洗滌緩沖液清洗3次。

目標蛋白洗脫：加入含250mM咪唑的洗脫緩沖液，輕柔混勻后磁場分離收集上清。

五、技術擴展與兼容性

緩沖液優化：可通過調整咪唑濃度（5-500mM）實現梯度洗脫，提升純度。

金屬離子替換：部分產品支持將Ni2?替換為Co2?或Zn2?，以增強對特定蛋白的結合特異性。

自動化適配：兼容96孔板磁力架及液體處理工作站，支持每日處理數百樣本。

以上由瑞禧生物小編yff提供！

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