內容概要

在流式細胞術中，準確區分活細胞與死細胞是獲取可靠數據的前提。Elabscience STYX™ 近紅外可固定活力染料檢測試劑盒，利用氨基反應性熒光染料，通過檢測細胞膜完整性來精準評估細胞活力。其信號可耐受固定、破膜及凍存處理，為多色流式實驗設計提供了便利。

背景介紹

在流式細胞分析中，死細胞會通過非特異性結合、釋放DNA等物質干擾檢測結果，并可能產生自身熒光，導致假陽性或數據解讀困難。因此，在樣本制備環節去除或標記死細胞至關重要。傳統的核酸染料（如PI、7-AAD）存在無法固定或光譜與常用熒光染料重疊等局限。新一代的氨基反應性活死染料，通過與細胞表面及胞內游離氨基共價結合，實現了穩定、持久的染色效果。

產品介紹

Elabscience STYX™ Near-IR Fixable Viability Kit ，中文名稱：STYX™ 近紅外可固定活力染料檢測試劑盒(貨號: E-CK-A168) 是一種膜不可滲透的、氨基反應性的熒光染料。其核心特性如下：

• 作用機制：對活細胞，僅染色細胞膜表面；對膜破損的死細胞，染料可進入胞內，與大量游離氨基結合，產生顯著更強的熒光信號。

• 固定兼容性：染色后，經過固定、破膜甚至凍存處理，熒光信號依然保持穩定。

• 光譜特性：激發/發射波長在近紅外區域，與其他常用熒光染料（如FITC, PE, APC等）光譜重疊小，易于在多色方案中組合。

• 規格與保存：提供50、100、200 Tests 三種規格，-20°C干燥避光保存，有效期12個月（冰袋運輸）。

檢測原理

Elabscience STYX™ 近紅外可固定活力染料檢測試劑盒的核心原理基于細胞膜完整性差異和氨基共價結合：

1. 活細胞：細胞膜完整，染料無法進入細胞內部，僅能標記膜表面的有限游離氨基，產生弱熒光。

2. 死細胞：細胞膜破損，染料自由進入細胞，與細胞內部大量的游離氨基（如蛋白質、肽段上的胺基）發生不可逆的共價結合，產生強熒光。

3. 結果：通過流式細胞儀檢測，根據熒光強度差異，即可清晰地將活細胞（陰性/弱陽性）與死細胞（強陽性）群體分開。信號在固定、破膜后保持穩定，如圖所示（C57BL/6小鼠脾細胞活死1:1混合樣本，固定前后分析結果一致）。

應用場景

STYX™ 近紅外可固定活力染料是一種非膜滲透性胺反應性熒光染料，可與細胞表面和細胞內部的游離胺不可逆地結合。在活細胞中，染色僅限于表面。當細胞膜受損時，染料進入并結合細胞內胺，導致死細胞發出明顯更強的熒光。這可以清楚地區分活細胞和死細胞。固定、透化和冷凍保存后染色保持穩定。

產品優勢

• 信號穩定，兼容后續處理：染色后能耐受固定、破膜及凍存，便于進行胞內或核內抗原檢測，且實驗結果不受樣本處理時間限制。

• 光譜選擇靈活：近紅外發射波長，可有效避免與FITC、PE、APC等常見熒光染料的光譜重疊，簡化多色實驗設計。

• 操作流程簡便：染色步驟可整合至表面染色流程之前（Fc封閉前進行），無需額外復雜步驟。

• 結果清晰可靠：活細胞與死細胞群體間熒光反差大，區分界限明顯，數據分析客觀。

總結

Elabscience STYX™ 近紅外可固定活力染料檢測試劑盒為流式細胞術中的細胞活力評估提供了一個穩定、兼容且靈活的解決方案。其基于氨基共價結合的機制確保了信號的持久性，使實驗設計不再受限于后續固定破膜步驟；近紅外光譜特性則讓它能輕松融入復雜多色方案。對于追求高質量流式數據的科研工作者而言，這是一款值得關注的可靠工具。