白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒是科研領域專門用于定量檢測生物樣本中IL-1β濃度的核心工具,僅可用于科研場景,不能用于臨床診斷。
一、關鍵操作要點
前期準備:試劑盒和樣本提前1小時在25-28℃室溫平衡,剩余未使用的板條密封后放回4℃保存,所有試劑組分提前按說明書配制成工作液。
加樣溫育:標準品孔、樣本孔分別加對應液體50μL,除空白孔外每孔加HRP標記檢測抗體100μL,封板后37℃避光孵育60min,加樣時間盡量控制在5分鐘內。
洗板顯色:棄液拍干后用洗滌液重復洗板5次,每次靜置20s,洗板后立即拍干殘留液體,不要讓微孔板干燥;每孔加100μL底物混合液,37℃避光孵育15-30min。
終止讀數:每孔加終止液50μL,15min內用酶標儀在450nm波長下測定各孔OD值,通過標準曲線計算樣本濃度。
二、白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒核心使用注意事項
樣本處理:溶血樣本不可用于檢測,樣本需避免反復凍融,短期4℃可保存1周,長期需分裝凍存于-20℃以下;若樣本濃度超出標準曲線上限,需提前做預實驗確定稀釋倍數后再復測。
試劑管理:試劑盒需2℃-8℃避光保存,不同廠家、不同批號的試劑盒組分嚴禁混用,過期產品禁止使用,濃洗滌液出現結晶時可37℃水浴助溶后再稀釋使用。
實驗質控:移液器需定期校準,吸頭、試管等耗材一次性使用避免交叉污染;全程盡量由同一操作人員完成,嚴格控制室溫、孵育溫度等實驗條件,批內CV需控制在8%以內,批間CV控制在10%以內。
合規要求:該試劑盒僅可用于科研用途,絕對不能用于臨床診斷,檢測廢棄物需按傳染物規范處理。
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