本試劑盒采用雙抗體夾心法。用抗Human VEGF/VEGF-A抗體包被于酶標(biāo)板上,實(shí)驗時標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品中的VEGF/VEGF-A會與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗Human VEGF/VEGF-A抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素。抗Human VEGF/VEGF-A抗體與結(jié)合在包被抗體上的Human VEGF/VEGF-A結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入發(fā)光底物混合液,發(fā)光底物在辣根過氧化物酶的催化下發(fā)出熒光,用化學(xué)發(fā)光免疫分析儀測定化學(xué)發(fā)光值(CL),VEGF/VEGF-A濃度與化學(xué)發(fā)光值之間呈正相關(guān),通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中VEGF/VEGF-A的濃度。
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