目錄:武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司>>ELISA試劑盒>>Human>> E-EL-0046c多巴胺(DA)酶聯免疫吸附測定試劑盒
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 96T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | E-EL-0046c | 應用領域 | 生物產業 |
| 主要用途 | 科研 |
該試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿或其他相關生物液體中天然DA濃度。
本試劑盒采用競爭ELISA法。用DA抗原包被于酶標板上，實驗時樣品或標準品中的DA與包被的DA競爭生物素標記的抗DA單抗上的結合位點，游離的成分被洗去。加入辣根過氧化物酶標記的親和素，生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色，加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值，DA濃度與OD450值之間呈反比，通過繪制標準曲線計算出樣品中DA的濃度。
| 反應類型 | 競爭法 |
| 規格 | 96T |
| 反應時間 | 2.0h |
| 反應性 | 通用 |
| 檢測方法 | Colormetric |
| 檢測范圍 | 31.25-2000 pg/mL |
| 靈敏度 | 18.75 pg/mL |
| 樣本體積 | 50μL |
| 樣本類型 | 血清、血漿或其他相關生物液體 |
可檢測樣本中的DA，且與其它相關蛋白無明顯交叉反應。
板內，板間變異系數均<10%。
由于實驗操作條件的不同（如操作者、移液技術、洗板技術和穩定條件等），標準曲線的OD值會有所差異。以下數據和曲線僅供參考，實驗者需根據自己的實驗建立標準曲線。
| (pg/mL) | O.D | Average |
|---|---|---|
| 2000 | 0.342 0.372 | 0.357 |
| 1000 | 0.446 0.502 | 0.474 |
| 500 | 0.687 0.657 | 0.672 |
| 250 | 0.965 0.967 | 0.966 |
| 125 | 1.325 1.319 | 1.322 |
| 62.5 | 1.674 1.654 | 1.664 |
| 31.25 | 1.922 1.928 | 1.925 |
| 0 | 2.281 2.295 | 2.288 |
 |
板內精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean (pg/mL) | 93.20 | 168.70 | 786.20 | 94.20 | 159.90 | 725.00 |
| Standard deviation | 6.10 | 7.40 | 29.10 | 5.30 | 9.00 | 37.00 |
| C V (%) | 6.55 | 4.39 | 3.70 | 5.63 | 5.63 | 5.10 |
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍和平均回收率。
| Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 95-110 | 101 |
| EDTA plasma (n=8) | 97-111 | 102 |
| Cell culture media (n=8) | 92-103 | 98 |
未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用試劑盒，請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。
| 中文名稱 | 英文名稱 | 規格 | 保存條件 |
|---|---|---|---|
| ELISA酶標板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 條 | -20℃，可存放6個月 |
| 凍干標準品 | Reference Standard | 2支 | |
| 濃縮生物素化抗體(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
| 濃縮HRP酶結合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光)，可存放6個月 |
| 標準品&樣品稀釋液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃.可存放6個月 |
| 生物素化抗體稀釋液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 酶結合物稀釋液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 濃縮洗滌液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
| 底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光) |
| 反應終止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃ |
| 封板覆膜 | Plate Sealer | 5 張 | |
| 產品說明書 | Product Description | 1 份 | |
| 質檢報告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
說明：所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發和微生物的污染。
試劑體積以實際發貨版說明書為準。相關試劑在分裝時會比標簽上標明的體積稍多一些，請在使用時量取而非直接倒出。
1.酶標儀(450nm波長濾光片)
2.高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3.37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水
4.吸水紙
 | 1. 對應板孔中加入50μL標準品工作液或樣本后，立即每孔加入50μL生物素化抗體工作液，37℃孵育45分鐘 |
 | 2. 棄掉板內液體，洗板3次 |
 | 3. 每孔加入100μL HRP酶結合物工作液，37℃孵育30分鐘，棄掉板內液體，洗板5次 |
 | 4. 每孔加入90μL底物溶液，37℃孵育15分鐘左右 |
 | 5. 每孔加入50μL終止液 |
 | 6. 立即在450nm波長下讀數，處理數據 |
1
化工儀器網