目錄:武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司>>ELISA試劑盒>>Human>> E-EL-0060c丙二醛(MDA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 96T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | E-EL-0060c | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 科研 |
該試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿或其他相關(guān)生物液體中天然MDA濃度。
本試劑盒采用競爭ELISA法。用MDA抗原包被于酶標板上，實驗時樣品或標準品中的MDA與包被的MDA競爭生物素標記的抗MDA單抗上的結(jié)合位點，游離的成分被洗去。加入辣根過氧化物酶標記的親和素，生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色，加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值，MDA濃度與OD450值之間呈反比，通過繪制標準曲線計算出樣品中MDA的濃度。
| 反應(yīng)類型 | 競爭法 |
| 規(guī)格 | 96T |
| 反應(yīng)時間 | 2.0h |
| 反應(yīng)性 | 通用 |
| 檢測方法 | Colormetric |
| 檢測范圍 | 31.25-2000 ng/mL |
| 靈敏度 | 18.75 ng/mL |
| 樣本體積 | 50μL |
| 樣本類型 | 血清、血漿或其他相關(guān)生物液體 |
可檢測樣本中的MDA，且與其它相關(guān)蛋白無明顯交叉反應(yīng)。
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
由于實驗操作條件的不同（如操作者、移液技術(shù)、洗板技術(shù)和穩(wěn)定條件等），標準曲線的OD值會有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考，實驗者需根據(jù)自己的實驗建立標準曲線。
| (ng/mL) | O.D | Average |
|---|---|---|
| 2000 | 0.352 0.398 | 0.375 |
| 1000 | 0.498 0.508 | 0.503 |
| 500 | 0.741 0.709 | 0.725 |
| 250 | 1.058 1.068 | 1.063 |
| 125 | 1.507 1.481 | 1.494 |
| 62.5 | 1.942 1.92 | 1.931 |
| 31.25 | 2.284 2.284 | 2.284 |
| 0 | 2.804 2.818 | 2.811 |
 |
板內(nèi)精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean (ng/mL) | 109.60 | 308.70 | 848.80 | 111.50 | 321.00 | 892.50 |
| Standard deviation | 6.10 | 17.30 | 37.30 | 7.00 | 17.00 | 46.40 |
| C V (%) | 5.57 | 5.60 | 4.39 | 6.28 | 5.30 | 5.20 |
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍和平均回收率。
| Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 92-103 | 97 |
| EDTA plasma (n=8) | 94-107 | 99 |
| Cell culture media (n=8) | 93-110 | 100 |
未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用試劑盒，請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。
| 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
|---|---|---|---|
| ELISA酶標板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 條 | -20℃，可存放6個月 |
| 凍干標準品 | Reference Standard | 2支 | |
| 濃縮生物素化抗體(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
| 濃縮HRP酶結(jié)合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光)，可存放6個月 |
| 標準品&樣品稀釋液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃.可存放6個月 |
| 生物素化抗體稀釋液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 酶結(jié)合物稀釋液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 濃縮洗滌液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
| 底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光) |
| 反應(yīng)終止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃ |
| 封板覆膜 | Plate Sealer | 5 張 | |
| 產(chǎn)品說明書 | Product Description | 1 份 | |
| 質(zhì)檢報告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
說明：所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染。
試劑體積以實際發(fā)貨版說明書為準。相關(guān)試劑在分裝時會比標簽上標明的體積稍多一些，請在使用時量取而非直接倒出。
1.酶標儀(450nm波長濾光片)
2.高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3.37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水
4.吸水紙
 | 1. 對應(yīng)板孔中加入50μL標準品工作液或樣本后，立即每孔加入50μL生物素化抗體工作液，37℃孵育45分鐘 |
 | 2. 棄掉板內(nèi)液體，洗板3次 |
 | 3. 每孔加入100μL HRP酶結(jié)合物工作液，37℃孵育30分鐘，棄掉板內(nèi)液體，洗板5次 |
 | 4. 每孔加入90μL底物溶液，37℃孵育15分鐘左右 |
 | 5. 每孔加入50μL終止液 |
 | 6. 立即在450nm波長下讀數(shù)，處理數(shù)據(jù) |
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