振動圓二色光譜儀光源發(fā)出的線性偏振光是基礎(chǔ)。隨后，借助特定的光學(xué)元件(如四分之一波片)將其分解為左旋和右旋圓偏振光。這兩種圓偏振光的偏振方向沿圓周運動，但旋轉(zhuǎn)方向相反。當(dāng)這兩束圓偏振光通過具有手性的樣品時，由于手性分子的特殊結(jié)構(gòu)，它們對左旋和右旋圓偏振光的吸收存在差異。這種吸收差異正是圓二色信號的來源。儀器通過檢測這種吸收差來獲取關(guān)于樣品的信息。儀器中的探測器會捕捉經(jīng)過樣品后的光強變化，并將其轉(zhuǎn)化為電信號。這些電信號再經(jīng)過一系列的處理和分析，生成圓二色譜圖。通過解讀該圖譜，可以推斷出樣品中分子的二級結(jié)構(gòu)、折疊過程以及相互作用等詳細信息。
 

　　振動圓二色光譜儀(VCD)是研究手性物質(zhì)分子構(gòu)型及光學(xué)活性的重要工具。以下是其測定步驟：
 

　　1.儀器校準(zhǔn)：使用標(biāo)準(zhǔn)溶液對儀器進行校準(zhǔn)，以確定左旋和右旋圓偏振光的吸收波長和強度。這是為了確保后續(xù)測量的準(zhǔn)確性。
 

　　2.樣品制備：將待測樣品溶解或制備成溶液形式，以便進行圓二色光譜分析。選擇合適的溶劑至關(guān)重要，需保證溶劑不會干擾VCD測試，或者其影響可通過后續(xù)數(shù)據(jù)處理消除。對于固體樣品，可采用壓片、固體膜或噴涂薄膜等形式；若為溶液小分子樣品，常用比色池光程為100μm，典型溶劑包括CCl2、CDCl2、DMSO-D2等。
 

　　3.樣品測定：把制備好的樣品溶液注入樣品室，啟動光源后，檢測器開始檢測樣品對不同偏振光的吸收差異。在特定溫度下，通過改變光的偏振狀態(tài)來獲取相關(guān)數(shù)據(jù)。例如，對于固體測試，應(yīng)使用旋轉(zhuǎn)樣品支架以消除因雙折射等造成的VCD假信號。
 

　　4.數(shù)據(jù)采集：記錄檢測器輸出的電信號，從而得到樣品的圓二色譜圖。該圖譜反映了樣品在不同波長下的光學(xué)活性特征。
 

　　5.數(shù)據(jù)處理與分析：先消除背景噪聲和其他干擾因素，再利用專門軟件對譜線進行去卷積處理，獲得各振動模式的強度和頻率。最后將結(jié)果與理論模型比較，推斷出樣品的結(jié)構(gòu)及動態(tài)信息。如判定未知構(gòu)型的樣品時，將其測得的VCD測試譜與預(yù)設(shè)絕對構(gòu)型經(jīng)量化計算得到的VCD計算譜對比，若兩者對應(yīng)，則可確定未知構(gòu)型為預(yù)設(shè)構(gòu)型。