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多方位獲取您所需要的樣本蛋白

2020-6-19　　閱讀(463)

蛋白提取系列專(zhuān)題

-多方位獲取您所需要的樣本蛋白

背景介紹

蛋白質(zhì)種類(lèi)很多，在理化特性方面差異較大，因此不可能有一個(gè)固定的程序適用各類(lèi)蛋白質(zhì)的分離。動(dòng)物蛋白提取一般遵循如下原則：盡可能提高蛋白的溶解度，抽提大量的總蛋白，減少蛋白質(zhì)的損失；減少對(duì)蛋白質(zhì)的人為修飾；破壞蛋白與其他生物大分子的相互作用，并使蛋白質(zhì)處于*變性狀態(tài)。

產(chǎn)品信息

1、裂解液形式：

RIPA裂解液（Radio Immunoprecipitation Assay Lysis buffer，放射免疫沉淀法裂解緩沖液）是一種傳統(tǒng)的可用于裂解細(xì)胞或組織的快速裂解液，其原理為利用表面活性劑等裂解細(xì)胞膜（包括核膜），從組織或動(dòng)物細(xì)胞中抽取可溶性蛋白。RIPA裂解液裂解后得到的蛋白一般可直接用于常規(guī)的WB、IP、co-IP等實(shí)驗(yàn)。

貨號(hào)	20101	20114	20115	20118
名稱(chēng)	RIPA裂解液（強(qiáng)）	RIPA裂解液（弱）	RIPA裂解液（中）	免疫印跡及免疫沉淀用（WB/IP）裂解液
主要用途	WB IP	WB IP Co-IP	WB IP	WB IP Co-IP
有效裂解成分	1%Triton X-100， 1% Sodium Deoxycholate， 0.1% SDS	1% NP-40， 0.25% Sodium Deoxycholate	1% NP-40， 0.5% Sodium Deoxycholate， 0.1% SDS	1%Triton X-100
裂解強(qiáng)度	強(qiáng)	溫和	中	溫和
提取膜蛋白	很好	一般	較好	一般
提取胞漿蛋白	很好	很好	很好	很好
提取核蛋白	很好	較好	較好	較好
提取胞漿磷酸化蛋白	很好	很好	很好	很好
提取細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子	很好	很好	很好	很好
含蛋白酶抑制劑	是	是	是	是
含磷酸酯酶抑制劑	是	是	是	是

2、Kit形式：

蛋白提取實(shí)驗(yàn)是蛋白功能研究，客戶(hù)可購(gòu)買(mǎi)商品化的蛋白提取試劑盒。圖1簡(jiǎn)單的介紹了不同部位蛋白提取所利用的提取試劑盒，并且需要注意以下事項(xiàng)：

（1）所要研究的樣本種屬----動(dòng)物、植物、細(xì)菌、真菌、昆蟲(chóng)、酵母等；

（2）蛋白獲得的部位----總蛋白、膜蛋白、核蛋白、跨膜蛋白等；

（3）下游的實(shí)驗(yàn)---考慮提取得到蛋白的活性等；

圖1 細(xì)胞不同組織部位蛋白提取

產(chǎn)品特點(diǎn)

FAQ

1.如何選擇合適的RIPA裂解液？

如果您只是要做普通的WB、IP或者co-IP，我們建議您使用免疫印跡及免疫沉淀用（WB/IP）裂解液(20118)，該裂解液在裂解細(xì)胞或組織后一般不會(huì)形成粘滯的透明狀DNA團(tuán)塊，不必采用超聲處理就可進(jìn)行下一步操作。同時(shí)，該裂解液還適用于磷酸化蛋白的WB檢測(cè)。

如果使用免疫印跡及免疫沉淀用（WB/IP）裂解液(20118)的效果不是很好，那您的蛋白可能比較特殊，我們建議您可以嘗試另外幾種裂解液。如果您的蛋白是難溶性的蛋白，建議您可以嘗試使用裂解強(qiáng)度更高的裂解液，如RIPA裂解液(強(qiáng)/中)；如果您在做IP實(shí)驗(yàn)的時(shí)候發(fā)現(xiàn)背景很高，即有很多非特異性蛋白被IP下來(lái)，這時(shí)候您需使用裂解強(qiáng)度較強(qiáng)的裂解液，比如RIPA裂解液(強(qiáng)/中)。反之，如果您發(fā)現(xiàn)目的蛋白無(wú)法IP下來(lái)，則說(shuō)明您使用的裂解液強(qiáng)度過(guò)強(qiáng)，此時(shí)需使用裂解強(qiáng)度較弱的裂解液，比如RIPA裂解液(弱)。

2. RIPA裂解液可以獲得細(xì)胞中的不同蛋白嗎？

RIPA裂解液提取的是全蛋白，包括核蛋白、漿蛋白、膜蛋白等。如果要提取特定的蛋白（如：核蛋白、膜蛋白）則可利用專(zhuān)門(mén)提這類(lèi)蛋白的試劑盒進(jìn)行提取。

文獻(xiàn)引用

[1] Yang Zhang, Zhixue Fang, Xiong Guo, et al. lncRNA B4GALT1‐AS1 promotes colon cancer cell stemness and migration by recruiting YAP to the nucleus and enhancing YAP transcriptional activity[J]. Journal of Cellular Physiology, 2019,234(10): 18524-18534.

20126ES50 和20101ES60 IF:4.522

[2] Li Z, Han S, Jia Y, et al. MCPIP1 regulates RORα expression to protect against liver injury induced by lipopolysaccharide via modulation of miR‐155[J]. Journal of cellular physiology, 2019, 234(9): 16562-16572.

20126ES50 IF:4.522

[3] Wang Q, li Wu Z, Yuan X, et al. Bilobetin induces kidney injury by influencing cGMP-mediated AQP-2 trafficking and podocyte cell cycle arrest[J]. Phytomedicine, 2019, 64: 153073.

20127ES50 IF:4.18

[4] Wang Y, Li X, Gong X, et al. MicroRNA-322 Regulates Self-renewal of Mouse Spermatogonial Stem Cells through Rassf8[J]. International journal of biological sciences, 2019, 15(4): 857.

RIPA IF: 4.067

[5] Liu X Y, Li D, Li T, et al. Effects of intranasal oxytocin on pup deprivation-evoked aberrant maternal behavior and hypogalactia in rat dams and the underlying mechanism[J]. Frontiers in neuroscience, 2019, 13: 122.

RIPA IF: 3.648

[6] Han S, Li Z, Han F, et al. ROR alpha protects against LPS-induced inflammation by down-regulating SIRT1/NF-kappa B pathway[J]. Archives of biochemistry and biophysics, 2019, 668: 1-8.

20126ES50 IF: 3.559

訂購(gòu)信息

產(chǎn)品名稱(chēng)	產(chǎn)品編號(hào)	規(guī)格	價(jià)格（元）
RIPA Lysis Buffer (Strong) RIPA裂解液（強(qiáng)）	20101ES60	100 mL	228
RIPA Lysis Buffer (Weak) RIPA裂解液（弱）	20114ES60	100 mL	228
RIPA Lysis Buffer (Medium) RIPA裂解液（中）	20115ES60	100 mL	228
Lysis Buffer for WB/IP Assays 免疫印跡及免疫沉淀用（WB/IP）裂解液	20118ES60	100 mL	228
細(xì)胞核/細(xì)胞漿蛋白抽提試劑盒	20126ES50/60	50 T/100T	935/1545
細(xì)胞膜/細(xì)胞漿蛋白抽提試劑盒	20127ES50/60	50 T/100T	835/1435
組織/細(xì)胞線(xiàn)粒體分離試劑盒	20128ES50/60	50 T/100T	786/1365

相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品名稱(chēng)	產(chǎn)品編號(hào)	規(guī)格	價(jià)格（元）
蛋白酶抑制劑Cocktail，EDTA-free，迷你型，片劑	20123ES10/50	1瓶（10片）/1瓶（50片）	533/2353
蛋白酶抑制劑Cocktail，EDTA-free，100× DMSO儲(chǔ)液	20124ES03/10/60	1 mL /10×1 mL /100×1 mL	217/ 1587/ 9987
磷酸酶抑制劑混合物（100×，儲(chǔ)存液）	20109ES05/20/70	2 mL/10×2 mL/100×2 mL	207/ 1597/ 11937
PMSF苯甲基///磺///酰///氟	20104ES03/08	1 g/ 5×1 g	113/453

HB200619

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