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磺酰羅丹明 B（SRB）在細(xì)胞增殖中的應(yīng)用
SRB介紹磺酰羅丹明B（SulforhodamineB，SRB）是一種粉紅色的陰離子染料，在細(xì)胞生物學(xué)研究中被廣泛用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的檢測(cè)。SRB可以與細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)結(jié)合，形成穩(wěn)定的復(fù)合物，其顏色強(qiáng)度與細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)含量成正比。技術(shù)原理蛋白質(zhì)結(jié)合：SRB能夠與細(xì)胞內(nèi)的堿性氨基酸殘基結(jié)合，特別是與精氨酸、賴氨酸和組氨酸等殘基結(jié)合。這種結(jié)合是相對(duì)穩(wěn)定的，并且在酸性條件下不易解離。顏色強(qiáng)度與蛋白質(zhì)含量的關(guān)系：SRB與細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)結(jié)合后，形成的復(fù)合物在特定波長(zhǎng)下具有較高的吸光度。吸光度的大小與細(xì)胞內(nèi) -
PI（Propidium Iodide）碘化丙啶的應(yīng)用
介紹PI（Propidiumiodide），即碘化丙啶，是一種常用的熒光染料，在細(xì)胞生物學(xué)研究中發(fā)揮著重要作用。它不能透過(guò)完整的細(xì)胞膜，但在細(xì)胞凋亡晚期或細(xì)胞膜受損時(shí)，能夠進(jìn)入細(xì)胞并與核酸結(jié)合，發(fā)出紅色熒光。PI常用于細(xì)胞活力檢測(cè)、細(xì)胞周期分析以及細(xì)胞凋亡研究等領(lǐng)域。圖1PI的化學(xué)結(jié)構(gòu)式技術(shù)原理原理PI不能穿透細(xì)胞膜而被排斥在活細(xì)胞外，但是可以穿過(guò)破損的細(xì)胞膜而對(duì)核染色。利用這一特性，通常與Calcein-AM、Hoechst33258或Hoechst33342等活細(xì)胞熒光探針一起使用，同時(shí)對(duì)活 -
Hoechst 33258/ Hoechst 33342：細(xì)胞核染色的重要染料
產(chǎn)品介紹Hoechst是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，它在嵌入雙鏈DNA后釋放強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光，對(duì)細(xì)胞的毒性較低。Hoechst常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)，也可以用于普通的細(xì)胞核染色，或常規(guī)的DNA染色。技術(shù)原理DNA結(jié)合：Hoechst能夠特異性地與雙鏈DNA結(jié)合，通過(guò)插入到DNA的小溝中，形成穩(wěn)定的復(fù)合物。這種結(jié)合方式使得染料的熒光特性發(fā)生改變，在特定波長(zhǎng)的激發(fā)光下發(fā)出藍(lán)色熒光。熒光特性：Hoechst在紫外光或近紫外光激發(fā)下發(fā)出藍(lán)色熒光，其激發(fā)波長(zhǎng)通常在3 -
ER-Tracker：探索內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的利器
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是由一層單位膜圍成的連續(xù)的網(wǎng)狀膜系統(tǒng)，可分為糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（RoughEndoplasmicReticulum，RER）和光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（SmoothEndoplasmicReticulum，SER）。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)染色的意義1、觀察內(nèi)質(zhì)網(wǎng)形態(tài)結(jié)構(gòu)：染色后可以在顯微鏡下清晰地觀察到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的形態(tài)、大小、分布以及與其他細(xì)胞器的關(guān)系。這有助于深入了解內(nèi)質(zhì)網(wǎng)在不同細(xì)胞類型、不同生理狀態(tài)下的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，為研究?jī)?nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能提供基礎(chǔ)。2、疾病診斷在某些疾病狀態(tài)下，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的結(jié)構(gòu)和功能會(huì)發(fā)生改變。通過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)染色可以觀察 -
產(chǎn)品介紹DAPI，也稱DAPIdihydrochloride，是一種常用的核酸染料，和EB(ethidiumbromide)相比，DAPI對(duì)雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。盡管DAPI不能通過(guò)活細(xì)胞膜，但可以通過(guò)提高濃度使之進(jìn)入活細(xì)胞。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用來(lái)檢測(cè)酵母線粒體DNA，葉綠體DNA，病毒DNA，MicroplasmDNA以及染色體DNA。技術(shù)原理DAPI可以和雙鏈DNA富含AT序列的小溝結(jié)合，產(chǎn)生比自身強(qiáng)20多倍的藍(lán)色熒光。DAPI也可對(duì)RNA進(jìn)行染色，染色機(jī)理是其
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聚焦細(xì)胞凋亡，認(rèn)識(shí)Annexin V的價(jià)值
介紹細(xì)胞凋亡（Apoptosis）通常是指機(jī)體細(xì)胞在發(fā)育進(jìn)程中或者受到某些特定因素影響時(shí)，經(jīng)由細(xì)胞內(nèi)基因及其產(chǎn)物的調(diào)控而引發(fā)的一種程序性細(xì)胞死亡現(xiàn)象。在細(xì)胞凋亡的途徑里，各個(gè)事件的發(fā)生具有時(shí)序性，依先后順序逐一出現(xiàn)，最終促成凋亡小體的呈現(xiàn)，接著細(xì)胞便發(fā)生凋亡。細(xì)胞凋亡在胚胎發(fā)育與形態(tài)發(fā)生、維持組織內(nèi)正常細(xì)胞群體的穩(wěn)定、機(jī)體的防御及免疫反應(yīng)、疾病或中毒引發(fā)的細(xì)胞損傷、老化以及腫瘤的發(fā)生發(fā)展等方面都起著至關(guān)重要的作用，并且具備潛在的治療價(jià)值。圖1：細(xì)胞凋亡途徑各時(shí)序性事件檢測(cè)原理正常細(xì)胞膜的磷脂分布 -
3’-5’方向的dsDNA外切酶，從dsDNA鏈的3’端逐個(gè)去除單核苷酸
重組酶聚合酶擴(kuò)增（RecombinasePolymeraseAmplification，RPA）是一種新型核酸恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)，可以在37~42℃條件下，10~30min內(nèi)實(shí)現(xiàn)待測(cè)靶標(biāo)的快速檢測(cè)。它具有反應(yīng)靈敏度高、特異性強(qiáng)、對(duì)儀器依賴程度低且可整合多種檢測(cè)模式等優(yōu)點(diǎn)，特別適用于基層和現(xiàn)場(chǎng)即時(shí)檢測(cè)，可廣泛應(yīng)用于體外診斷、動(dòng)物疫病、食品安全、生物安全、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。圖1.RPA等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)原理圖[1]目前常用的與RPA擴(kuò)增相結(jié)合的檢測(cè)方法有電泳法、熒光探針?lè)ā?cè)流層析試紙條（LF-RPA）、絮凝分析檢測(cè) -
精準(zhǔn)診斷，從逆轉(zhuǎn)錄開始——高效逆轉(zhuǎn)錄酶助力RT-qPCR
逆轉(zhuǎn)錄酶（ReverseTranscriptase，簡(jiǎn)稱RT酶）是一種能夠?qū)NA模板轉(zhuǎn)化為互補(bǔ)DNA（cDNA）的酶。在分子生物學(xué)研究中，逆轉(zhuǎn)錄酶的應(yīng)用極為廣泛，特別是在分子診斷領(lǐng)域發(fā)揮著作用。通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，可以將病毒的RNA基因組轉(zhuǎn)換為cDNA，之后便可以利用如qPCR等技術(shù)對(duì)其進(jìn)行擴(kuò)增和檢測(cè)。這一特性使得對(duì)諸如艾滋病、甲型流感以及乙型流感這類RNA病毒進(jìn)行準(zhǔn)確診斷成為可能。圖1.逆轉(zhuǎn)錄流程示意圖追求更快速、更靈敏且操作更為簡(jiǎn)便的RT-qPCR分子診斷試劑已成為當(dāng)前的主要發(fā)展趨勢(shì)。作為RT
