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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 貨號 | 40907ES10 |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 生物產業 |
產品介紹
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 儲存 | 價格（元） |
Ready To Use Coelenterazine h 即用型腔腸素h | 40907ES10 | 10 vials | -20℃避光 | 6856.00 |
背景描述
腔腸素（Coelenterazine）是自然界中資源的天然熒光素，是絕大多數海洋發光生物（超過75%）的光能貯存分子。腔腸素可作為許多熒光素酶的底物，比如海腎熒光素酶（Rluc），Gaussia分泌型熒光素酶（Gluc），以及包括水母發光蛋白（aequorin）和藪枝螅發光蛋白（Obelia）在內的光蛋白（Photoproteins）。其發光原理是：以腔腸素為底物的熒光素酶在有分子氧的條件下，氧化腔腸素，產生高能量的中間產物，并在此過程中發射藍色光，峰值發射波長約為450~480 nm。
腔腸素作為水母發光蛋白復合物（Aequorin）的組成成分，只有與鈣離子（Ca2+）結合后，才能被氧化生成高能量產物Coelenteramide，同時釋放出CO2和藍色熒光（~466 nm）。其具有以下幾個優點：1）能檢測較大范圍的Ca2+濃度（0.1-100 μM）；2）樣品無自體熒光，背景熒光較低，盡管信號較熒光鈣離子指示劑弱，但信噪比更高，因此具有較高靈敏度；3）Aequorin能夠穩定維持在細胞內，能夠進行數小時至數天Ca2+的監測。
腔腸素具有能量轉移（Bioluminescence Resonance Energy Transfer，BRET）的特性：在底物腔腸素存在的情況下，熒光素酶（如Rluc）催化底物發生藍光，能量轉移到EYFP（增強的黃色熒光蛋白），發出綠光（~530 nm）。通過Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白兩者間的相互關系研究蛋白-蛋白之間的相互作用。BRET的信號可通過比較綠光和藍光的量來進行測定，消減了因細胞數、細胞類型和其他實驗變量而引起的數據變量。
主要應用
1. 活體成像。
2. 報告基因檢測。
3. 檢測細胞/組織內活性氧（ROS）水平：細胞和組織內的超氧陰離子和過氧化亞硝基陰離子能夠增強腔腸素在酶非依賴性的氧化體系中自發熒光。
4. 高通量篩選。
5. 監測活細胞內鈣離子水平。
產品描述
腔腸素h（Coelenterazineh）是海腎熒光素酶（Rluc）和Gaussia熒光素酶（Gluc）等多種熒光素酶的作用底物，其發光強度比天然腔腸素高10倍以上，適用于報告基因分析。也是水母發光蛋白的輔助因子，可用于檢測活細胞中鈣離子濃度。
本品是即用型腔腸素h，特別設計用于Renilla luciferase體內活體成像研究。最小化產品成分的變化、凍融次數和嚴格控制批間差異確保結果的高重復性。本品優勢：①溶于丙二醇和檸檬酸，穩定性高，即開即用，無需考慮粉末配制液體過程造成的穩定性差異；②批次間嚴格控制差異，特別設計用于體內研究；③即用型產品，減少時間和精力；4）IVIS成像系統驗證，保證成像質量。
運輸和保存方法
冰袋運輸。-20℃避光保存。長期保存條件：-80℃避光保存。有效期一年。
產品組分
使用方法
1.準備工作
實驗前，取出-20℃或更低溫度保存的即用型腔腸素h，37℃水浴鍋解凍，稍微漩渦混勻后即可使用。
【注】：避免反復凍融，務必根據實際用量取出所需劑量產品。
2.注射方法及劑量
①靜脈注射：推薦劑量15 μg/mouse (100 μl/mouse）。使用1 ml注射器直接從瓶內吸取溶液后，用25 gauge或更高的針頭注射入小鼠體內。盡快成像檢測以獲得峰值信號。
【注】：靜脈給藥后小鼠可能經歷短時間痙攣，但能夠快速恢復。
②腹腔注射：推薦劑量是30 μg/mouse (200 μl/mouse)。方法同上。
應用實例
Figure 1 Coelenterazine h has been optimized for in vivo use with IVIS imaging systems. (A)5pmol BRET Qdot 700 was injected intravenously in a nu/nu mouse. 10 minutes post BRET Qdot injection 15μg/mouse Coelenterazine h was injected intravenously. Chart shows peak signal was observed right after injection at ~22 seconds followed by rapid clearance. Images were taken with IVIS kinectic. (B)1, 2 and 4pmol BRET Qdot 655 were injected subcutaneously in a nu/nu mouse. 10 minutes post BRET Qdot injection 10μg/mouse Coelenterazine h was injected intraperitoneally. Chart shows that peak signal was reached around 27 minutes post i.p. injection of Coelenterazine h.
注意事項
1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2）本產品僅作科研用途！
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