本試劑盒針對一抗為兔/小鼠來源的Western blot實驗使用。
注意事項:
1.本試劑盒僅用于科研,不能應(yīng)用于臨床。
2.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
自備材料及試劑:
1.適合目的蛋白的凝膠板;
2.電泳儀,電轉(zhuǎn)儀,抗體孵育及相關(guān)設(shè)備;
3.高精度可調(diào)移液器(已校準)及吸頭;
4.兔/小鼠源一抗;
5.甲醇,雙蒸水;
6.化學發(fā)光儀或相關(guān)儀器。溶液配制:
1.電泳工作液:取出包裝袋中全部粉劑溶于400ml 的去離子水或蒸餾水中,定容至500ml,
即為5xTris-甘氨酸電泳緩沖;電泳前,將5xTris-甘氨酸電泳緩沖液稀釋5倍后使用。
2.轉(zhuǎn)膜工作液:每瓶10x電泳轉(zhuǎn)移緩沖液(轉(zhuǎn)膜液)100mL,加200mL無水甲醇,加入雙
蒸水,定容至1000mL,工作液4°C預冷保存。
3.1xTBST緩沖液:取10xTBST緩沖液100mL,加入雙蒸水,定容至1000mL,室溫暫存。
封閉工作液:根據(jù)需求選擇配制5%脫脂奶粉或5%BSA緩沖液(二選一),取5g脫脂
奶粉/BSA,加入1xTBST緩沖液,定容至100mL,溶解完-全后暫存4°C。
4.檢測含有生物素或使用生物素標記的抗體時封閉液不宜用脫脂奶粉,因為脫脂奶粉中含
有生物素,用BSA效果更好,磷酸化抗體檢測應(yīng)使用BSA進行封閉。
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