大隱靜脈 (SVs) 在冠狀動脈旁路移植術(shù) (CABG) 中被廣泛應(yīng)用，用于缺血心臟的重建，因為其長度和易于通過手術(shù)獲得，盡管與動脈導管相比，它們的通暢度較低。外科手術(shù)和術(shù)后藥物治療的改進降低了一些早期移植失敗概率，但不良的長期結(jié)果仍然是一個關(guān)鍵問題，因為 50-60% 的患者在10 年內(nèi)就會出現(xiàn)靜脈移植術(shù)失敗。

SV 移植壁暴露于突然的血流動力學超負荷，必須進行重塑以發(fā)揮動脈的作用，這一過程稱為動脈化，可穩(wěn)定機械力并涉及肌肉細胞 (SMC) 增殖和細胞外基質(zhì)產(chǎn)生。問題在于，重塑過程可能會超過穩(wěn)定機械力所需的能力，從而導致血管管腔狹窄和晚期移植的失敗。

內(nèi)皮細胞在血管穩(wěn)態(tài)中起著重要的作用，內(nèi)皮細胞功能障礙是心血管疾病中常見的重要潛在因素。在 SV 移植中，剪切力和牽張力大大增加，從而引發(fā)細胞內(nèi)下游信號改變內(nèi)皮細胞 (EC) 功能。已有研究表明，剪應(yīng)力的突然增加誘導炎性 EC 表型，并導致靜脈移植失敗。剪切應(yīng)力對內(nèi)皮細胞的影響已被廣泛研究，而靜脈 EC 中的拉伸效應(yīng)尚不清楚。

事實上，周向拉伸是靜脈移植疾病時內(nèi)膜增生的一個關(guān)鍵因素。在靜脈移植物處放置外部支架，可限制血管擴張，減輕內(nèi)膜增生，防止血管細胞損傷，并抑制動脈應(yīng)激引起的血管細胞黏附分子 (VCAM) 和 ICAM1 表達增強。值得注意的是，當剪切應(yīng)力增加時，支架置入避免了靜脈的周向拉伸，這表明 SV 移植物的內(nèi)皮功能障礙更多地依賴于循環(huán)牽張力而不是剪切應(yīng)力。然而，人隱靜脈內(nèi)皮細胞 (hSVEC) 表型循環(huán)拉伸增加的潛在細胞機制仍不清楚。

實驗結(jié)果

1.持續(xù)的高拉伸會導致內(nèi)皮功能障礙

鑒于機械力對 EC 結(jié)構(gòu)和功能的重要影響，將 hSVECs 暴露于低拉伸 (LS，靜脈) 和高拉伸 (HS，動脈) 條件下，以模擬靜脈動脈化過程中突然的血流動力學應(yīng)力。與靜態(tài)對照相比，HS 在 48h 降低了 NO 釋放，而 LS 沒有引起變化。內(nèi)皮細胞通過血流動力學力量 (流量和循環(huán)應(yīng)變) 調(diào)節(jié) NO 的合成和釋放來調(diào)節(jié)血管張力和血流，而 HS 誘導 NO 的減少表明了內(nèi)皮細胞的功能障礙。事實上，實驗觀察到炎癥標記物 E-selectin和 VCAM1 的表面表達增加，以及持續(xù)施加 HS 后單核細胞的粘附增強 進一步證實了內(nèi)皮功能障礙的表型。

由于持續(xù)的 HS 導致內(nèi)皮功能障礙，實驗測試了它是否也會誘導間充質(zhì)表型。結(jié)果顯示，HS 未能誘導 hSVECs 中 EndMT。與此相反，實驗觀察到拉伸48小時后 F-肌動蛋白 染色減少。鑒于肌動蛋白細胞骨架對 EC 結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)鍵影響，研究人員進一步研究了 HS 對 F-肌動蛋白 模式和 EC 功能障礙的影響。

2.HS 重塑靜脈 ECs 中的肌動蛋白絲，但不重塑動脈 ECs

在 LS 下培養(yǎng)的 hSVECs 顯示與靜態(tài)條件相似的皮質(zhì)F-肌動蛋白的模式和強度。相比之下，24 小時 HS 導致肌動蛋白應(yīng)力纖維的顯著形成 ，48 小時后 F-肌動蛋白 染色明顯減少。z-stack 切片的3D重建證實了整個細胞中F-肌動蛋白 體積的減少。這種現(xiàn)象是可逆的，細胞在靜態(tài)條件下放置24小時后，肌動蛋白應(yīng)力纖維將會重新出現(xiàn)。F-肌動蛋白 減少僅在 hSVECs 中觀察到；無論拉伸條件如何，人主動脈內(nèi)皮細胞  均未顯示肌動蛋白纖維結(jié)構(gòu)的變化。

3.HS 增加氧化應(yīng)激、NAC 治療減少拉伸誘導的內(nèi)皮功能障礙

病理性機械拉伸可誘導體外培養(yǎng)的內(nèi)皮細胞中過量的ROS。因此，實驗觀察到 HS 處理48 小時后 hSVECs 中細胞內(nèi)和線粒體的 ROS 總量增加。實驗假設(shè) HS 誘導的 ROS 是與細胞骨架重塑和內(nèi)皮功能障礙相關(guān)的潛在機制之一。實驗人員通過用抗氧化劑 NAC 處理細胞來測試這個想法，并觀察到 HS 誘導的細胞骨架肌動蛋白解聚減少。

實驗結(jié)論

最終實驗結(jié)果表明，體外 HS 降低了 NO 生物利用度，增加了炎癥粘附分子 (E-選擇素和 VCAM1) 的表達和 THP-1 細胞的粘附。HS 降低 hSVECs 中的 F-肌動蛋白，但不會降低人動脈內(nèi)皮細胞中的 F-肌動蛋白，并且伴隨著 G-肌動蛋白和肌動蛋白素的核穿梭以及活性氧 (ROS) 的增加。用抗氧化劑 N-乙酰半胱氨酸 (NAC) 進行預處理支持這一觀察結(jié)果，并減少了拉伸誘導的肌動蛋白重塑和炎癥粘附分子的表達。

參考文獻：Gir?o-Silva T, Fonseca-Alaniz MH, Ribeiro-Silva JC, Lee J, Patil NP, Dallan LA, Baker AB, Harmsen MC, Krieger JE, Miyakawa AA. High stretch induces endothelial dysfunction accompanied by oxidative stress and actin remodeling in human saphenous vein endothelial cells. Sci Rep. 2021 Jun 29;

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