在液相色譜分析過程中，
菲羅門色譜柱壓力異常是較為常見的故障現(xiàn)象。壓力異常通常表現(xiàn)為壓力持續(xù)升高、壓力驟降或壓力波動不穩(wěn)。及時排查壓力異常原因并采取預(yù)防措施，對延長色譜柱使用壽命、保證分析結(jié)果重現(xiàn)性具有實際意義。
一、壓力異常的系統(tǒng)排查
當(dāng)發(fā)現(xiàn)菲羅門色譜柱壓力偏離正常范圍時，建議按照從外部到內(nèi)部、從上游到下游的順序進行排查。
首先檢查流動相相關(guān)因素。流動相組成變化、有機相比例改變會直接影響系統(tǒng)壓力。流動相中緩沖鹽濃度過高或有機相黏度過大，均可能導(dǎo)致壓力上升。此外，流動相未經(jīng)過濾或過濾不充分，微小顆粒物會逐漸堵塞篩板及色譜柱入口端。
其次檢查色譜系統(tǒng)連接情況。管路連接處卡套松動或密封不良會引起漏液，表現(xiàn)為壓力下降。在線過濾器或溶劑入口濾頭堵塞則導(dǎo)致壓力升高。建議在卸下色譜柱的情況下，用兩通替代色譜柱連接管路，觀察系統(tǒng)壓力。若此時壓力仍偏高，問題可能存在于進樣器、管路或泵頭組件。
確認系統(tǒng)空載壓力正常后，應(yīng)將重點轉(zhuǎn)向色譜柱本身。色譜柱入口篩板堵塞是壓力升高的原因之一，樣品基質(zhì)中的不溶物、未全溶解的組分或化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的沉淀物會逐漸積聚在篩板表面。色譜柱內(nèi)部填料污染同樣會導(dǎo)致壓力上升，常見于復(fù)雜基質(zhì)樣品分析中保留較強的組分在柱內(nèi)累積。若壓力表現(xiàn)為波動且伴隨基線噪聲增大，需考慮色譜柱內(nèi)存在氣泡或填料床層出現(xiàn)空隙。
二、柱前保護器的使用建議
柱前保護器是安裝在進樣器與分析柱之間的裝置，其核心作用在于攔截來自樣品基質(zhì)、流動相或系統(tǒng)磨損產(chǎn)生的顆粒物及強保留物質(zhì)，避免這些污染物直接進入分析柱。
在保護器的選型方面，建議根據(jù)分析柱內(nèi)徑及填料粒徑選擇匹配的保護柱芯。柱芯內(nèi)徑應(yīng)與分析柱內(nèi)徑相近或略小，以保證分離效率。柱芯填料宜與分析柱填料全相同或具有相似的保留特性，從而減少目標(biāo)物在保護柱內(nèi)的非必要保留。
在安裝與使用過程中，應(yīng)確保保護器與分析柱之間管路連接緊密且死體積較小。保護器應(yīng)定期更換，具體頻率需根據(jù)樣品基質(zhì)復(fù)雜度及實際分析通量確定。通常當(dāng)分析柱壓力較初次安裝時上升達到一定幅度，或觀察到柱效出現(xiàn)下降趨勢時，即應(yīng)考慮更換保護柱芯，而非等到分析柱壓力明顯升高后才采取行動。
需要指出的是，保護器雖然可以延緩分析柱污染，但不能替代良好的樣品前處理。對復(fù)雜基質(zhì)樣品進行離心、過濾或固相萃取凈化，是減輕保護器負擔(dān)、延長分析柱使用壽命的基礎(chǔ)措施。同時，每日分析結(jié)束后以適當(dāng)比例的流動相對色譜柱進行沖洗，有助于清除柱內(nèi)殘留的緩沖鹽和強保留物質(zhì)。
