微流成像儀依靠微流道微量進樣、高清成像完成顆粒形貌、粒徑、雜質分析,對樣品狀態、進樣速度、操作規范性極其敏感。不標準的進樣操作容易產生氣泡、流道堵塞、圖像模糊、數據重復性差等問題。為保證檢測數據精準、保護微流芯片與光學系統,現將標準樣品進樣操作規范整理如下。
一、進樣前樣品預處理規范
1. 樣品均質處理:檢測前將樣品輕柔搖勻、顛倒混勻,避免顆粒沉降分層;禁止劇烈震蕩,防止產生大量微氣泡影響成像。
2. 去除大顆粒雜質:根據樣品特性提前進行粗過濾,去除纖維、大團聚顆粒、沉淀物,防止堵塞微流芯片微細通道。
3. 脫泡處理:含氣泡樣品需靜置脫泡或低速離心脫泡,微氣泡會被誤判為顆粒雜質,造成數據虛高、圖像干擾。
4. 溫度適配:樣品溫度盡量接近設備室溫,避免溫差導致流道產生冷凝、液體對流異常,影響成像穩定性。
二、設備進樣前準備
1. 開機預熱完成,確認光源、鏡頭、流道系統自檢正常,無報錯、無基線異常。
2. 檢查微流芯片潔凈通透,流道內無殘留污漬、無殘液、無往期樣品殘留。
3. 進樣針筒、管路提前用待測樣品潤洗2~3次,消除殘留溶劑、清洗液帶來的背景干擾。
4. 調整設備水平、固定進樣位置,保證進樣平穩、無晃動偏移。
三、標準進樣操作流程
1. 緩慢勻速進樣:采用低速、穩定流速進樣,嚴禁快速推注、脈沖式進樣,防止流速過快造成顆粒擠壓、流道紊流、圖像拖影模糊。
2. 排凈管路空氣:進樣前段充分排盡管路氣泡,待流道液流穩定、視野無氣泡后再開始采集圖像數據。
3. 穩定流態再檢測:進樣后等待2~5秒流態穩定,流道液體無流動波動、無殘影,再啟動測試采集。
4. 統一進樣量標準:同批次樣品統一進樣體積與流速參數,保證平行樣測試條件一致,提升數據重復性。
5. 全程連續觀察視野:進樣過程實時觀察成像畫面,出現氣泡、遮擋、模糊立即暫停進樣處理。
四、平行樣與批次進樣規范
1. 每批次樣品測試前做空白基線校準,排除管路、溶劑、環境干擾。
2. 不同樣品交替測試時,必須充分清洗流道與進樣管路,杜絕樣品交叉污染。
3. 平行樣品保持相同進樣速度、采集幀數、曝光參數,保證數據對比有效。
五、常見進樣問題與糾正方法
1. 成像模糊、拖尾:進樣流速過快、流態不穩,降低進樣速度、延長穩定時間。
2. 頻繁出現氣泡干擾:樣品未脫泡、管路未排空氣,重新脫泡、潤洗管路、低速排氣。
3. 數據重復性差:樣品沉降、進樣力度不均,加強混勻、統一進樣參數。
4. 流道堵塞:樣品含大顆粒雜質,加強前置過濾,及時清洗疏通芯片流道。
六、進樣操作禁忌
1. 禁止未脫泡、未過濾樣品直接上機進樣測試。
2. 禁止高速、暴力推注進樣,避免損傷微流芯片、破壞流道結構。
3. 禁止不同樣品直接交替測試,不做中間清洗。
4. 視野存在氣泡、污漬、模糊時禁止強行采集數據。
七、操作總結
嚴格執行微流成像儀標準進樣操作,是保證顆粒成像清晰、粒徑統計準確、批次數據穩定的關鍵。規范樣品預處理、勻速穩流進樣、批次質控,可有效規避氣泡、堵塞、交叉污染、數據偏差等問題,保障設備長期穩定、精準完成各類樣品微流成像檢測。