當前位置:上海研生實業有限公司>>技術文章>>如何確保BMP6標準品的活性穩定
要保證BMP6標準品活性穩定,核心是?控溫、防反復凍融、減降解?,從復溶到保存全流程把控即可,具體方法如下:
一、復溶環節:避免蛋白變性
開蓋前先離心,讓凍干粉末沉底,避免開蓋損失;用試劑盒自帶的標準品稀釋液復溶,不要自行更換緩沖液;
加樣后輕柔顛倒混勻,不要渦旋震蕩、不要劇烈晃動,防止蛋白空間結構被破壞變性;
復溶后靜置10分鐘讓粉末溶解,立即分裝,不要在室溫長時間放置,全程放在冰盒上操作,控制時間在30分鐘內。
二、分裝環節:杜絕反復凍融
嚴格按?單次實驗用量分裝?,每管分裝100-200μL(剛好滿足一次梯度稀釋),絕對不要大體積分裝;
分裝后擰緊管蓋,用封口膜密封管口,防止冰晶滲入污染和水分揮發改變濃度;
清晰標注組分名稱、濃度、分裝日期,避免混淆。
三、保存環節:控制溫度穩定
不管是未復溶原品還是分裝后的母液,最佳保存溫度都是?-20℃避光恒溫凍存?,放在冰箱中層,不要放門架,避免開關門導致溫度波動;
僅1周內會再次使用的母液,可臨時密封放在2-8℃冷藏,絕對不要超過1周;
梯度稀釋后的工作液必須現用現配,用完即棄,絕對不能凍存留存。
四、使用環節:減少額外損傷
每次僅取出1管分裝母液,放在冰上緩慢解凍,用完剩余部分直接丟棄,絕不復融后再次凍存;
超過3個月的分裝母液,正式實驗前做簡化驗證;超過6個月直接更換,不要繼續使用。
按以上全流程操作,可保證BMP6標準品活性穩定保存3-6個月,常規實驗需求。
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