Absin Annexin V-FITC/PI細胞凋亡檢測試劑盒產品詳情

1. 基本屬性

中文名稱	Annexin V-FITC/PI細胞凋亡檢測試劑盒
英文名字	Annexin V-FITC apoptosis assay kit
別名	Annexin V-FITC 細胞凋亡檢測試劑盒
產品貨號	abs50001
產品規格	25T,50T,100T
產品組份	AnnexinV-FITC, 10×Binding Buffer, Propidium Iodide
保存建議	4℃保存6個月；避免反復凍融。
產品說明書

2. 產品描述

在正常細胞中，磷脂酰絲氨酸只分布在細胞膜脂質雙層的內側，細胞發生凋亡最早期，膜磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內側翻向外側，這一變化早于細胞皺縮、染色質濃縮、核酸片斷化和細胞膜的通透性增加等凋亡現象。Annexin V是一種磷脂結合蛋白，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力，故可通過細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。因此Annexin V被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一種核酸染料, 它不能透過完整的細胞膜，但凋亡中晚期的細胞和死細胞由于細胞膜通透性的增加，PI 能夠透過細胞膜而使細胞核染紅。因此將Annexin V 與PI 匹配使用，就可以將處于不同凋亡時期的細胞區分開來。。

3. 操作步驟

貼壁細胞需用 0.25%的胰酶消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加 2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的胰酶消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用 1×PBS或 1×binding buffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2+螯合，影響Annexin V的結合。
（1） 用去離子水將 10×Binding Buffer 稀釋成 1×Binding Buffer；
（2） 細胞收集：懸浮細胞收集：離心 5 分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的胰酶消化收集后（ 注：胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰絲氨酸與Annexin V-FITC 的結合），在室溫中，2000rpm 離心 5～10 分鐘，收集細胞；
（3） 細胞洗滌：用預冷 1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm 離心 5～10分鐘，棄上清洗滌細胞；
（4） 加入 300μL 的 1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5） Annexin V-FITC 標記：加入 5μL 的 Annexin V-FITC 混勻后，避光，室溫孵育 15 分鐘；
（6） PI 標記：上機前 5 分鐘再加入 5μL 的 PI 染色。
（7） 上機前，補加 200μL 的 1×Binding Buffer。
注意：每個反應體系建議細胞數為1×104至1×106個

4. 用法說明

（1） 使用前低速離心，以免液體積存管蓋和管壁； 
（2） 本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測； 
（3） PI（propidium iodide，溴化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套； 
（4） Annexin V-FITC 和 PI 是光敏物質，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內用顯微鏡觀察； 
（5） 整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在 4℃下操作，以免影響細胞狀態。 
（6） 在細胞洗滌的最后一步，請盡量將上清棄凈，以免 PBS 殘留，有可能會影響實驗結果。 
（7） 為防止熒光衰變，宜在 1 小時內進行流式檢測。 
（8） PI 染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC 染色，最短可在上機前 5 分鐘再加入 PI 染色。

Annexin V-FITC/PI細胞凋亡檢測試劑盒部分文獻展示

• MiR-27a-5p regulates acrylamide-induced mitochondrial dysfunction and intrinsic apoptosis via targeting Btf3 in rats

  Lujia Zhang, Li Dong, Liuqing Yang, Yinghua Luo, Fang Chen

  Food Chemistry. 2022 Jan 30 .

  影響因子： 7.27

• Construction and investigation of β3GNT2-associated regulatory network in esophageal carcinoma

  Zhiguo Luo, Qing Hu, Yuanhui Tang, Yahui Leng, Tian Tian, Shuangyue Tian, Chengyang Huang, Ao Liu, Xinzhou Deng, Li Shen

  Cellular & Molecular Biology Letters. 2022 Jan 24 .

  影響因子： 5.787

• Molecular mechanism of inhibitory effects of melatonin on prostate cancer cell proliferation, migration and invasion

  Altannavch Nyamsambuu,Md. Asaduzzaman Khan,Xi Zhou,Han-Chun Chen

  Plos one. 2022 Jan 21 .

  影響因子： 3.240

• 山柰酚誘導人乳腺癌耐阿霉素細胞MCF-7/阿霉素凋亡的研究

  阿地力江·薩吾提; 木塔力甫·艾買提; 周文婷; 艾尼瓦爾·吾買爾

  中國臨床藥理學雜志. 2021/06/17 00:00:00 undefined undefined .

• NADPH氧化酶激活介導NGF下調致心肌細胞凋亡

  楊宏

  山西醫科大學. 2021/05/23 00:00:00 undefined undefined .

• 霍山石斛花抗酒精性肝損傷活性成分篩選及其作用機制研究

  楊秀容

  合肥工業大學. 2021/04/01 00:00:00 undefined undefined .

• Oxyresveratrol-induced Activation of Nrf2/HO-1 Signaling Pathway Enhances Ability of Resveratrol to Inhibit UVB-induced Melanin

  Jia-Hui Jin, Yu-Yan Jiang, Yan Wang , Zhao-Wei Meng, Di-Hua Li, Lei Zhang, Hao Wang, Yan-Jun Zhang

  Int J Dermatol Venereol. 2021 Dec 01 .

  影響因子： 1.964

• Role of Episamarcandin in Promoting the Apoptosis of Human Colon Cancer HCT116 Cells through the PI3K-Akt Signaling Pathway

  H Zhang, J Sun, R Ma, S Zhao

  . 2021 Nov 02 .

• Salvianolic acid A attenuates steroid resistant nephrotic syndrome through suPAR/uPAR-αvβ3 signaling Inhibition

  Xin Lia, Dong Qi, Meng-ying Wang, Kai Ji, Qun-ling Xie, Yu Wang, Shi-hao Du, Hua-ying Fan

  Journal of Ethnopharmacology. 2021 Oct 28 .

  影響因子： 4.27

• Editing flagellin derivatives for exploration of potent radioprotective agents

  Tong Shib, Jun Jiang, Meng Gao, Ronglin Ma, Xuejun Chen, Ruihua Zhang, Jianfu Xu, Weili Wang, Shujuan Xu, Xi Liu, Huizhen Zheng, Chen Wang, Liqin Li, Ruibin Li

  European Journal of Pharmacology. 2021 Sep 15 .

• MiR-27a-5p regulates acrylamide-induced mitochondrial dysfunction and intrinsic apoptosis via targeting Btf3 in rats

  Lujia Zhang , Li Dong , Liuqing Yang , Yinghua Luo , Fang Chen

  Food Chemistry. 2021 Aug 10 .

  影響因子： 7.514

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