對于神經科學研究人員而言，B-27添加劑無疑是細胞培養中最得力的助手之一。本文將全面介紹這款被廣泛引用的無血清添加劑，從基礎特性到前沿應用，幫助您更好地將其應用于您的研究工作中。

1. B-27添加劑概述

B-27添加劑是一種成分明確的無血清添加劑，經過專門優化，用于支持胚胎、出生后和成年海馬及其他CNS神經元的低密度或高密度生長以及短期或長期存活。自問世以來，B-27添加劑已成為被引用最多的神經元細胞培養添加劑，在神經科學研究中扮演著不ke或缺的角色。

2. B-27添加劑的成分與配方特點

2.1 核心成分解析

B-27添加劑的完整成分列表包括：

• 維生素類：生物素、DL-α-生育酚乙酸酯、DL-α-生育酚、維生素A（醋酸酯）

• 蛋白質組分：無脂肪酸BSA（Fraction V）、*酶、人重組胰島素、人轉鐵蛋白、超氧化物歧化酶

• 其他組分：皮質酮、D-半乳糖、乙醇胺HCl、谷胱甘肽（還原型）、L-肉堿HCl、亞油酸、亞麻酸、孕酮、腐胺2HCl、亞硒suan鈉、T3（三碘甲狀腺原氨酸）

2.2 配方設計與優勢

B-27添加劑的原始無血清神經細胞培養添加劑配方由Gregory Brewer博士和同事研發得到，后經優化，提供了便于使用、經過批量測試的產品。這種科學配方的優勢在于：

• 成分明確：避免了血清批次間差異對實驗結果的干擾

• 專用優化：各組分濃度經過精心優化，專為神經細胞設計

• 功能全面：同時支持細胞存活、生長和功能表達

3. B-27添加劑的主要應用領域

3.1 神經細胞培養

B-27添加劑最初是為支持海馬神經元和其他CNS神經元的生長和長期存活而開發的。在這一領域的具體應用包括：

• 原代神經元培養：支持大鼠海馬和皮質神經元的長期培養，無需星形膠質細胞滋養層

• 低密度神經元培養：即使在高稀釋度下仍能支持神經元存活和生長

• 長期培養：維持神經元數周的健康狀態，支持神經突網絡發育和突觸蛋白表達

研究表明，在B-27 Plus添加劑中培養三周的原代大鼠皮層神經元表現出高活性的神經突網絡和突觸蛋白的高表達，顯示出優異的成熟度和功能性。

3.2 干細胞研究

B-27添加劑在干細胞研究中發揮著重要作用，特別是：

• 神經干細胞擴增：使用去除維生素A的B-27添加劑可促進神經祖細胞和神經干細胞的增殖，而不誘導分化

• 胚胎干細胞定向分化：支持胚胎干細胞向神經元譜系（神經元和星形膠質細胞）的分化

• 干細胞來源神經元的分化和維持：使用標準B-27添加劑或B-27 Plus添加劑支持干細胞來源神經元的成熟和功能維持

3.3 類器官與3D培養

近年來，B-27添加劑在快速發展的類器官研究中展現了巨大價值。復雜的3D模型相比傳統的2D培養能更準確地重現體內神經結構和生理學功能。具體應用包括：

• 中腦類器官：從神經上皮干細胞誘導分化人類中腦特異性類器官（hMOs），用于研究神經退行性疾病

• 肝臟類器官：使用不含維生素A的B-27添加劑支持肝細胞來源的類器官長期培養

• 肺臟類器官：在無血清分化培養基（含B-27）中從人類干細胞培養肺芽類器官（LBOs）

• 乳腺類器官：建立來自正常和癌變人類乳腺組織的類器官培養，保留復雜的上皮譜系

這些3D培養系統在研究胚胎發育、疾病機制、藥物篩選和再生醫學方面顯示出巨大潛力。

3.4 疾病模型構建

B-27添加劑在人類疾病模型構建中尤為重要：

• 阿爾茨海默癥模型：使用B-27系列產品基于人類iPSC開發自動化、一致性好和時間持久的干細胞培養平臺，模擬AD特征性變化

• 帕金森病模型：利用中腦類器官構建G2019S-LRRK2散發性帕金森病模型

• 癌癥模型：建立乳腺癌、肝癌等多種癌癥類器官模型，用于腫瘤生物學研究和藥物測試

4. B-27添加劑的使用指南

4.1 完quan培養基配制

完quan培養基配方：

• B-27 Supplement (50X, Serum-free)：2 mL

• 200mM L-Gln/L-Ala-Gln：0.25 mL

• Neurobasal Medium：97.75 mL

• 總體積：100 mL

注意事項：

• 用于原代海馬神經元細胞初次接種時，需在完quan培養基中額外添加終濃度為25μM的L-谷氨酸

• 培養至第4天，需使用不添加L-谷氨酸的完quan培養基用于后續培養

• 配制好的完quan培養基可放置于2-8°C避光保存，建議2-4周內使用

4.2 神經元細胞培養流程

1. 培養表面包被：使用多聚賴氨酸溶液對培養表面在室溫下包被1-2小時或過夜

2. 表面沖洗：用無菌超純水反復沖洗兩次，che底去除殘留的多聚賴氨酸

3. 表面干燥：在超凈工作臺中通風吹干培養表面

4. 細胞接種：按照150-200 cells/mm2的密度接種神經元細胞

5. 培養基更換：

• 培養4-24小時后，更換一半體積的新鮮完quan培養基

• 對于原代海馬神經元，第4天需用不含L-谷氨酸的完quan全培養基更換一半培養基

• 后續每三天更換一次培養基

4.3 儲存與穩定性

B-27添加劑應在冰箱（-5至-20°C）中避光儲存，保質期通常為12個月。產品已經過濾除菌處理，使用時應注意無菌操作，避免污染。建議進行適量分裝凍存，避免反復凍融，以免影響使用效果。

5. B-27添加劑的科研價值與前景

B-27添加劑作為神經細胞培養領域的里程碑產品，近30年的應用歷史見證了神經科學的飛速發展。其科研價值主要體現在：

• 標準化：提供了成分明確、批次間一致性高的培養環境，增強了實驗結果的可靠性和可重復性

• 專業化：針對不同神經細胞類型和實驗需求的專業配方，提升了實驗效率和質量

• 創新賦能：支持從傳統2D培養到復雜3D類器官的技術革新，拓展了研究邊界

隨著細胞培養技術的不斷進步，特別是類器官和器官芯片等前沿領域的發展，B-27添加劑將繼續在神經科學研究、疾病模型構建、藥物篩選和個性化醫療中發揮關鍵作用。

結語

B-27添加劑從最初的海馬神經元培養添加劑，已發展成為支持多種神經細胞類型、覆蓋從基礎研究到前沿類器官研究的全fang位培養系統。無論是研究神經發育、神經退行性疾病，還是開發新的神經保護策略，正確選擇和使用B-27添加劑都將為您的實驗成功提供有力保障。隨著新一代B-27 Plus添加劑等產品的推出，這一經典產品系列將繼續為神經科學研究人員提供強有力的技術支持。

愛必信B-27添加劑推薦

Absin產品線：

爆款產品：十da試劑盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、生化檢測、殘留檢測、多因子檢測)；細胞培養(類器官試劑盒+基質膠，胎牛血清+培養添加劑+細胞因子)、分化試劑盒；分子(mRNA合成服務+提取試劑盒)；化合物大包裝；輔助試劑、耗材/儀器、定制服務(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...

特色產品：雞胚提取物CEE、B27、N2、霍亂毒素B亞單位CTB、牛腦垂體提取物BPE、百日咳毒素PTX、重組人胰島素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL...