做蛋白表達的科研人，誰沒被傳統原核表達折騰過？ 構建載體、轉化感受態、搖菌培養、誘導過夜，一套流程走完動輒 3-7 天；AI 批量設計上百條突變序列，逐個體內驗證周期遙遙無期；毒性蛋白、膜蛋白在活菌系統里極易表達失敗、產量低迷；想要小量快速篩變體，大批量培養既費耗材又耗人力…… 這些研發卡點，如今靠愛必信大腸桿菌無細胞蛋白合成試劑盒有望一鍵解決。

傳統蛋白表達流程

一、跳出活菌束縛，重新定義蛋白表達速度

什么是無細胞蛋白合成？

無細胞蛋白合成脫離活細胞培養，把細胞裂解，去除細胞膜、基因組冗余結構，保留轉錄 + 翻譯全套分子機器，反應體系額外添加氨基酸、NTP 原料、ATP 能量再生系統、緩沖鹽等，客戶僅需額外添加模板即可體外合成目的蛋白，即可實現蛋白表達。

無細胞蛋白表達示意圖

無細胞蛋白表達系統有哪些優點？

1. 極速出樣，大幅壓縮實驗周期 模板加入體系后1-2 h 即可檢測到目的蛋白，8-24 h 達到表達峰值，無需等待菌體生長、誘導培養。AI 蛋白突變庫、酶變體高通量篩選，單日完成上百條序列驗證，干濕實驗同步推進，不再讓算法設計等濕實驗驗證。

2. 超高表達產量，最高可達 3 mg/mL 體系內置優化核糖體、全套翻譯因子與能量再生系統，底物氨基酸、核苷酸配比精準，普通蛋白表達量遠超常規 pET 菌體誘導體系，微量反應也能收獲足量蛋白用于 SDS-PAGE、活性檢測。

3. 體系靈活開放，適配多元實驗需求 無需繁瑣菌體操作，50 μL、100 μL 微型體系即可反應，兼容離心管、96 孔板，輕松實現高通量平行篩選；支持質粒、PCR 線性產物、RCA 滾環擴增產物三類模板，無需純化的 PCR 片段可直接上樣，大幅簡化模板制備流程。

二、一站式預制體系，新手也能零門檻上手

很多無細胞試劑盒組分繁雜、配制門檻高，abs500014 采用雙組分預混液設計，操作極簡，全程冰上配制即可：

• 核心組分僅 Cell-free system solution A、B，固定體積配比 1:2，按體系體積定量添加，無復雜試劑配比計算；

• 試劑盒自帶sf-GFP 陽性質粒（pJL1-sfGFP），反應成功后肉眼可見綠色熒光，酶標儀 485/528 nm 可精準定量，快速判斷體系活性，排除操作失誤；

• 模板兼容范圍廣：適配所有帶 T7 啟動子、無 lac 操縱子的 pET 系列載體（pET9a、pET23a 等），規避 lac 操縱子導致的產量下降問題；線性 PCR 產物上下游預留 200 bp 保護序列，抵御核酸外切酶降解，模板穩定性更強。

陽性質粒示意圖

模板制備多元選擇，適配不同科研場景

1. 質粒模板：柱純化高純度質粒，無 RNase 污染，直接投入反應；

2. PCR 產物：擴增后無需純化直接使用，搭配 absin HiFi 高保真酶，快速批量構建線性模板；

3. RCA 滾環擴增產物：phi29 聚合酶擴增產物直接反應，適配高通量基因篩選；

4. 可與 Golden Gate、Gibson 無縫克隆聯用，實現基因組裝 + 無細胞表達一體化，大幅提升通量。

三、多場景全覆蓋，適配全領域蛋白研發需求

1. AI 蛋白 / 抗體高通量篩選 AI 一次性輸出數百條突變序列、納米抗體、scFv 片段，傳統菌體表達逐一驗證耗時數月；使用無細胞蛋白表達試劑盒，微孔板平行反應，24 h 內完成全部變體表達與活性初篩，快速鎖定優勢候選分子，打通 AI 設計與實驗驗證閉環。

2. 毒性蛋白、膜蛋白快速表達 對宿主細胞存在殺傷性的抗菌肽、細胞毒素、跨膜靶點蛋白，在活細菌中極易抑制菌體生長、表達量極低；無細胞體系無細胞存活限制，可穩定合成各類難表達蛋白，還可按需添加去垢劑、輔因子優化膜蛋白可溶性。

3. 酶工程與合成生物學研究 突變酶文庫篩選、體外酶動力學測試、轉錄翻譯機制基礎研究，開放體系可自由調控溫度、底物濃度、氧化還原環境；25-30℃靈活控溫，低溫提升蛋白可溶性，高溫加快合成速率，按需調整反應時長。

4. 小量快速蛋白制備 基因功能預實驗、蛋白結構初步驗證、標記蛋白微量合成，無需大規模搖菌，50 μL 小體系即可產出足量蛋白，節省培養基、耗材與培養設備，降低實驗成本。

多款無細胞蛋白合成試劑盒

蛋白純化試劑盒

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