TLR信號通路是固有免疫應答的核心樞紐，但其是否受腸道菌群代謝物的直接調控，長期懸而未決。2026年7月10日，Science Advances發表了一項關于短鏈脂肪酸（SCFAs）通過p38α MAP激酶感知并抑制TLR信號、緩解腸道炎癥的重磅研究（Wu et al., Sci. Adv. 12, eaef1419, 2026）。研究中DSS結腸炎模型、百日咳毒素（PTX）以及多色免疫組化（mIHC）檢測試劑盒發揮了關鍵作用。小愛將為您梳理這三款產品的核心應用場景與實驗價值。

一、DSS（葡聚糖liu酸鈉）——結腸炎造模的“金標準"試劑

文獻中的應用：研究團隊使用3%（w/v）DSS喂養C57BL/6小鼠5天，成功誘導了急性結腸炎模型。DSS處理導致小鼠結腸縮短、體重下降及免疫細胞（CD4? T細胞、CD8? T細胞、CD19? B細胞、巨噬細胞、中性粒細胞等）大量浸潤。在此基礎上，作者驗證了丙酸和丁酸對結腸炎的治療效果。

為什么選擇DSS？

• 造模高效、重復性好：DSS誘導的結腸炎模型在組織學特征、臨床表現、發病部位及細胞因子變化方面與人類潰瘍性結腸炎（UC）高度相似。

• 操作簡便：直接通過飲用水給藥即可誘導，無需復雜手術。

• 應用廣泛：已獲上千篇以上文獻驗證，適用于小鼠、大鼠、斑馬魚等多種模型。

• 機制明確：DSS破壞腸道上皮屏障，觸發腸道菌群失調、巨噬細胞功能損傷及炎癥反應。

產品推薦： 分子量36,000~50,000的DSS是該研究及絕大多數IBD研究的shou選。

圖1 3%（w/v）DSS處理5天后結腸長度縮短約40%~50%，丙酸/丁酸可逆轉此效應，而巨噬細胞耗竭則取消其保護作用，證明SCFAs的抗炎作用依賴巨噬細胞。

二、百日咳毒素（Pertussis Toxin, PTX）——GPCR信號通路研究的“精準開關"

文獻中的應用：丙酸和丁酸已知可通過抑制HDAC或激活GPCR發揮功能。為排除GPCR通路的干擾，作者用百日咳毒素（PTX） 預處理巨噬細胞。結果顯示，PTX預處理并不影響丙酸/丁酸對TBK1磷酸化的抑制作用，有力證明了SCFAs對p38α-TRAF3-TBK1軸的調控不依賴于GPCR，而是通過直接結合p38α實現的。

為什么選擇百日咳毒素（PTX）？

• 特異性抑制Gi/o型G蛋白：PTX通過ADP-核糖基化修飾G蛋白α亞基（Gαi），使其無法與受體正常偶聯，從而不可逆地阻斷Gi/o型GPCR信號傳導。

• 信號通路研究的經典工具：PTX被廣泛用于區分GPCR依賴與非依賴的生物學效應，是解析受體下游信號轉導機制的“金標準"工具。

• 文獻方法成熟：本研究雖未在正文中注明PTX具體濃度，但根據同類實驗慣例，推薦工作濃度為100 ng/mL（預處理12小時）。

圖2 將BMDMs和RAW264.7細胞按以下方案處理：百日咳毒素（PTX）預處理12小時（加或不加），繼而與丙酸或丁酸共培養2小時，隨后以LPS刺激30分鐘。處理后細胞裂解物以指定抗體進行免疫印跡分析。

三、多色免疫組化（mIHC）檢測試劑盒——組織微環境分析的“透視眼"

文獻中的應用：研究團隊采用多重熒光免疫組化（mIHC） 技術對潰瘍性結腸炎（UC）患者的結腸組織進行了深入分析。通過mIHC，作者在同一張組織切片上同時檢測了：

• 巨噬細胞標志物 CD68?

• 信號通路蛋白：p38α自磷酸化（p-p38）、TRAF3 S85磷酸化、TBK1磷酸化（p-TBK1）【9+L5-L9】

• 免疫細胞浸潤：CD3? T細胞、CD19? B細胞【9?L14-L17】

結果顯示：丙酸鈉治療組患者結腸組織中p-p38和TRAF3 pS85顯著升高、p-TBK1顯著降低，同時CD3? T細胞和CD19? B細胞浸潤明顯減少【10?L8-L13】。mIHC技術是這項臨床轉化研究得以實現的核心技術支撐。

圖3采用多重熒光免疫組化（mIHC）技術，對丙酸鹽干預前后的結腸活檢組織進行指定抗體染色，并展示各病例的代表性顯微圖像。

為什么選擇mIHC檢測試劑盒？

• 多靶標同時檢測：基于TSA（通過HRP催化熒光底物沉積于抗原位點，實現信號級聯放大）技術，可在一張切片上實現4色、5色甚至7色熒光標記，同時檢測多個靶標。

• 突破種屬限制：TSA技術通過抗體洗脫步驟，對一抗種屬來源無特殊要求，同一來源或不同來源的一抗均可使用。

• 超高靈敏度：信號放大技術使低豐度靶標（如磷酸化蛋白）也能輕松檢出。

• 節省抗體：一抗用量大幅減少，信噪比高，背景清晰。

• 適用樣本廣泛：適用于FFPE石蠟切片和冰凍切片。

總結：三款產品協同助力頂級期刊研究

引用文獻：

[1] Wu Q, Shi R, Xiao L, et al. p38 MAP kinase senses short-chain fatty acids to attenuate Toll-like receptor signaling and intestinal inflammation. Sci Adv. 2026;12(28):eaef1419. doi:10.1126/sciadv.aef1419