無外泌體胎牛血清是經多級超速離心聯合納米過濾工藝制備的專用細胞培養血清,可去除 95% 以上血清內源牛源外泌體,同時完整保留生長因子、氨基酸、激素等細胞增殖必需營養組分。常規胎牛血清天然富含 30–150nm 牛源囊泡,攜帶牛源蛋白、miRNA,會混入細胞上清干擾內源外泌體檢測;無外泌體胎牛血清標志物 CD63 含量低于 3.125pg/mL,大幅降低外源背景干擾,兼顧培養穩定性與實驗純凈度。
(無外泌體胎牛血清制工藝備示意圖)
二者基礎營養組分一致,核心區別集中于外泌體含量與實驗適配性。普通胎牛血清未做囊泡去除處理,上清分離外泌體時會疊加牛源囊泡,造成 NTA 定量偏高、WB 標志物雜帶、測序混入異種 RNA;無外泌體胎牛血清在去除囊泡的同時維持細胞倍增時間<18h、克隆形成率>80%,細胞增殖、貼壁狀態與常規血清無顯著差異,僅消除外源囊泡干擾,不損傷細胞培養性能。
其一,外泌體分離與鑒定實驗,包含 NTA 粒徑定量、透射電鏡形態觀察、CD9/CD63/TSG101 蛋白 WB 檢測;
其二,外泌體功能機制研究,如腫瘤細胞囊泡介導遷移、干細胞旁分泌通訊、免疫細胞胞外囊泡調控實驗;
其三,外泌體轉錄組 / 蛋白組測序,避免牛源核酸、蛋白污染測序文庫;
其四,囊泡標志物篩選與疾病微環境體外模型構建。常規細胞增殖、傳代培養無外泌體檢測需求時,可選用普通胎牛血清。
血清反復凍融后易析出微量蛋白結晶,進行 NTA 囊泡定量檢測前,可通過低速離心去除沉淀,該處理不會影響血清細胞培養活性;細胞培養階段,待細胞融合度達到 60%–70% 時更換無外泌體血清wan全培養基,上清收集培養時長建議控制在 24–48 h,降低細胞凋亡碎片帶來的檢測背景干擾;操作全過程需遵循無菌規范,合格無外泌體血清均經過支原體、外源病毒、內毒素多重質控,可適配腫瘤細胞、間充質干細胞、上皮細胞等多種常用細胞系,有效提升平行實驗結果重復性。
Absin無外泌體胎牛血清,專為外泌體研究設計,由健康胎牛血清無菌采集,經過多級過濾+特殊膜過濾工藝處理,去除96%以上的胎牛血清內源外泌體(去除后CD63<3.125pg/ml),具有無支原體,無內毒素,批次穩定統一等特點。
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