番茄紅素(Lycopene)是一種天然存在于植物體內的類胡蘿卜素(Carotenoid) ,屬于全反式多不飽和烯烴化合物,因最早從番茄中分離提取而得名,是植物體內重要的光合色素輔助成分,也是人體無法自身合成、需從食物中獲取的功能性營養素。
從化學結構來看,番茄紅素的分子 formula 為 C??H??,分子量為 536.87,分子骨架由 11 個共軛雙鍵和 2 個非共軛雙鍵組成線性結構 —— 這種長鏈共軛雙鍵體系是其呈現紅色、具有強抗氧化活性的核心結構基礎。與其他類胡蘿卜素(如 β- 胡蘿卜素、葉黃素)不同,番茄紅素不含環狀結構,因此不具備維生素 A 原活性(無法在體內轉化為維生素 A),但其抗氧化能力是 β- 胡蘿卜素的 2 倍以上,是維生素 E 的 100 倍左右。
在自然界中,番茄紅素主要存在于紅色蔬果中,含量從高到低依次為:番茄(成熟果實含量 2-15 mg/100g 鮮重)、西瓜(4-6 mg/100g 鮮重)、葡萄柚(2-5 mg/100g 鮮重)、番石榴(3-4 mg/100g 鮮重)等。番茄紅素在植物體內的合成與積累受光照、溫度、成熟度影響顯著:例如,番茄未成熟時(綠色)幾乎不含番茄紅素,成熟過程中(轉色期至完熟期),葉綠素降解,番茄紅素合成量快速增加,完熟期達到峰值;低溫儲存(如 4℃以下)會抑制番茄紅素的合成,而光照可促進其積累。此外,番茄紅素在植物體內主要以全反式結構存在,經烹飪、消化后,部分會轉化為順式結構,順式結構的生物利用率(人體吸收效率)高于全反式結構。
生理功能
番茄紅素的生理功能圍繞其 “強抗氧化活性" 展開,同時在調節細胞代謝、保護組織器官、預防慢性疾病等方面發揮作用,具體可概括為以下四點:
1. 強抗氧化作用,清除自由基并減少氧化損傷
這是番茄紅素最核心、研究最充分的生理功能。其分子中的長鏈共軛雙鍵體系可高效捕獲體內的活性氧自由基(如單線態氧 1O?、超氧陰離子 O???、羥基自由基?OH),通過電子共軛轉移,將自由基轉化為穩定的化合物,從而減少自由基對細胞的氧化損傷。
清除單線態氧:番茄紅素對單線態氧的猝滅能力是所有類胡蘿卜素中*強的 —— 單線態氧是一種強氧化性活性氧,可通過氧化細胞膜脂質、蛋白質和 DNA,引發細胞衰老、癌變等問題;番茄紅素可通過物理猝滅(能量轉移)和化學猝滅(電子轉移)兩種方式,將單線態氧轉化為無害的三線態氧,保護細胞免受損傷。
抑制脂質過氧化:番茄紅素可嵌入細胞膜的脂質雙分子層中,通過清除膜內的自由基,抑制細胞膜脂質過氧化反應,維持細胞膜的流動性和完整性。例如,在血管內皮細胞中,番茄紅素可減少低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)的氧化(氧化型 LDL-C 是動脈粥樣硬化的關鍵誘因),從而保護血管內皮功能,降低心血管疾病風險。
保護 DNA 免受氧化損傷:番茄紅素可進入細胞核,清除細胞核內的自由基,減少自由基對 DNA 鏈的攻擊,降低 DNA 突變的概率,從而在一定程度上預防細胞癌變(如前列腺癌細胞中,番茄紅素可減少?OH 對 DNA 的損傷,抑制癌細胞增殖)。
2. 保護心血管系統,降低心血管疾病風險
番茄紅素通過抗氧化、調節血脂、改善血管功能等多種途徑,保護心血管系統健康:
調節血脂:番茄紅素可降低血液中總膽固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)的水平,同時輕度升高高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C,“好膽固醇")的水平。其機制是:番茄紅素抑制肝臟中膽固醇合成關鍵酶(如 HMG-CoA 還原酶)的活性,減少膽固醇合成;同時,通過清除自由基,減少 LDL-C 的氧化,避免氧化型 LDL-C 在血管壁沉積形成動脈粥樣硬化斑塊。
改善血管內皮功能:血管內皮細胞的正常功能(如分泌一氧化氮 NO,舒張血管)是維持血管健康的關鍵。番茄紅素可通過清除自由基,減少內皮細胞的氧化損傷,同時促進內皮細胞合成 NO,增強血管的舒張能力,降低血壓。臨床研究表明,每日攝入 20-30 mg 番茄紅素,持續 8 周,可顯著改善高血壓患者的血管內皮功能,降低收縮壓和舒張壓。
抑制血小板聚集:血小板過度聚集是血栓形成的重要誘因(血栓可引發心肌梗死、腦梗死)。番茄紅素可抑制血小板表面的黏附分子(如 CD41、CD62P)的表達,減少血小板與血管壁的黏附,同時抑制血小板活化因子(PAF)的活性,降低血小板聚集率,從而減少血栓形成的風險。
3. 保護前列腺健康,預防前列腺疾病
番茄紅素在前列腺組織中的濃度較高(是血液中濃度的 2-5 倍),其對前列腺健康的保護作用已得到大量研究證實:
預防前列腺增生:良性前列腺增生(BPH)是中老年男性常見疾病,主要與前列腺細胞過度增殖有關。番茄紅素可通過抑制前列腺細胞中的 “增殖信號通路"(如 PI3K/Akt 通路),減少前列腺細胞的增殖,同時促進凋亡相關基因(如 p53 基因)的表達,誘導過度增殖的細胞凋亡,從而縮小前列腺體積,改善尿頻、尿急、排尿困難等癥狀。
降低前列腺癌風險:流行病學研究表明,番茄紅素攝入量與前列腺癌發病率呈負相關 —— 每日攝入番茄紅素超過 10 mg 的人群,前列腺癌的發病風險比攝入量低于 2 mg 的人群降低 30%-40%。其機制包括:清除前列腺細胞內的自由基,減少 DNA 氧化損傷;抑制前列腺癌細胞中 “致癌基因"(如 c-Myc 基因)的表達;調節細胞周期,將癌細胞阻滯在 G0/G1 期,抑制其增殖和轉移。
4. 保護眼睛健康,預防眼部疾病
番茄紅素可通過抗氧化和光保護作用,保護眼睛免受氧化損傷和光損傷,預防眼部疾病:
預防年齡相關性黃斑變性(AMD):年齡相關性黃斑變性是老年人失明的主要原因之一,其發病與視網膜黃斑區的氧化損傷和慢性炎癥有關。番茄紅素可進入視網膜,清除黃斑區的自由基,減少氧化損傷;同時抑制黃斑區的炎癥反應(如減少腫瘤壞死因子 TNF-α、白細胞介素 IL-6 等炎癥因子的釋放),從而延緩 AMD 的進展。
保護視網膜免受光損傷:長時間暴露于紫外線(UV)或藍光下,會導致視網膜感光細胞產生大量單線態氧,引發感光細胞凋亡,導致視力下降。番茄紅素可高效猝滅視網膜中的單線態氧,減少光誘導的氧化損傷,保護感光細胞功能。例如,長期戶外工作者(如農民、建筑工人)攝入足量番茄紅素,可降低紫外線導致的視網膜損傷風險。
緩解干眼癥:干眼癥主要與淚液分泌減少、淚膜不穩定有關。番茄紅素可通過改善淚腺細胞的氧化應激狀態,促進淚液分泌;同時增強淚膜的穩定性,減少淚液蒸發,從而緩解干眼癥的癥狀(如眼睛干澀、異物感、視物模糊)。
茁彩生物利用番茄紅素的 “化學結構特異性"(長鏈共軛雙鍵體系)和 “紫外 - 可見吸收特性"(在 472nm 處有特征吸收峰),建立了基于高效液相色譜(HPLC)的番茄紅素含量檢測方法,核心原理是通過色譜柱分離樣品中的番茄紅素,結合紫外 - 可見檢測器在 472nm 處的吸收信號定量檢測,具體過程可分為以下四步:
1. 樣品前處理:提取與純化番茄紅素
番茄紅素是脂溶性化合物,且在植物組織中與蛋白質、葉綠素等雜質結合緊密,同時易被氧化和光降解,因此前處理的關鍵是 “高效提取、去除雜質、避光抗氧化",具體步驟如下:
樣品制備:將樣品(如番茄果實、西瓜果肉)洗凈、去皮去籽(若為番茄),切碎后勻漿;取一定質量的勻漿(如 5g),加入無水*(1:1 質量比),研磨至粉末狀(無水*可吸收水分,促進番茄紅素的提取)。
提取:向粉末中加入提取溶劑(通常為 “丙酮 - 石油醚(體積比 1:1)混合液",含 0.1% 丁基羥基茴香醚 BHA 作為抗氧化劑),在避光條件下(如棕色離心管)振蕩提取 30 分鐘(25℃,180 rpm);隨后 5000×g 離心 10 分鐘,取上清液(含番茄紅素);重復提取 2-3 次,合并所有上清液(確保番茄紅素*提取)。
脫脂與除雜:向合并的上清液中加入等體積的蒸餾水,振蕩后靜置分層(石油醚相在上層,含番茄紅素;水相在下層,含水溶性雜質);棄去水相,保留石油醚相;向石油醚相中加入少量無水*,干燥 10 分鐘(去除殘留水分);隨后通過 0.45μm 有機相濾膜過濾,去除微小顆粒雜質。
濃縮與定容:將過濾后的石油醚相在氮氣保護下(避光,30℃以下)緩慢濃縮至近干(避免高溫導致番茄紅素降解);加入少量 HPLC 流動相(如乙腈 - 二氯甲烷混合液)溶解,定容至 5mL,得到待測樣品溶液(全程避光操作)。
2. HPLC 色譜分離:基于疏水性差異實現番茄紅素分離
茁彩生物采用反相 C18 色譜柱(如 Agilent ZORBAX SB-C18,4.6×250mm,5μm),通過優化流動相組成和洗脫程序,實現番茄紅素與其他類胡蘿卜素(如 β- 胡蘿卜素、葉黃素)及雜質的*分離:
流動相組成:采用 “乙腈 - 二氯甲烷 - 甲醇(體積比 60:30:10)混合液" 作為流動相 —— 乙腈和甲醇可提供極性環境,二氯甲烷可增強對脂溶性番茄紅素的洗脫能力,三者混合可實現番茄紅素的高效分離;流動相使用前需經 0.22μm 有機相濾膜過濾,并超聲脫氣(去除氣泡,避免檢測器基線漂移)。
色譜條件:柱溫控制在 30℃(穩定番茄紅素的色譜行為,避免溫度過高導致其降解);流速為 1.0mL/min;進樣量為 10μL;洗脫方式為等度洗脫(無需梯度變化,因流動相組成已優化,可實現番茄紅素的快速分離)。在該條件下,番茄紅素的保留時間(Rt)通常為 8-10 分鐘,與 β- 胡蘿卜素(Rt≈12 分鐘)、葉黃素(Rt≈5 分鐘)的保留時間差異顯著,可實現*分離,避免交叉干擾。
分離機制基于 “疏水作用":番茄紅素是脂溶性化合物,疏水性強,與 C18 色譜柱固定相(長鏈烷基)的疏水相互作用強;流動相中的二氯甲烷疏水性強,可與番茄紅素競爭結合固定相,減弱其與固定相的相互作用,從而將番茄紅素洗脫下來;由于不同類胡蘿卜素的疏水性不同(番茄紅素疏水性介于葉黃素和 β- 胡蘿卜素之間),其保留時間不同,最終實現分離。
3. 檢測器定量:472nm 紫外 - 可見吸收法測定番茄紅素含量
番茄紅素分子中的長鏈共軛雙鍵體系在紫外 - 可見光區具有特征吸收,其最大吸收峰位于472nm(全反式番茄紅素),同時在 445nm 和 505nm 處有兩個次要吸收峰(肩峰),這是番茄紅素定性和定量的關鍵依據。茁彩生物采用紫外 - 可見檢測器(UV-Vis) ,在 472nm 波長下檢測番茄紅素的吸光值,定量過程如下:
定性確認:番茄紅素從色譜柱洗脫后,檢測器記錄 472nm 處的吸光值隨時間的變化,生成色譜圖 —— 番茄紅素對應一個對稱的尖銳色譜峰(無拖尾);同時,通過二極管陣列檢測器(DAD)記錄番茄紅素的吸收光譜(400-550nm),若吸收光譜在 445nm、472nm、505nm 處出現特征吸收峰,且峰形與番茄紅素標準品一致,即可確認樣品中存在番茄紅素。
定量計算:根據番茄紅素色譜峰的 “峰面積" 進行定量 —— 配置 5 個濃度梯度的番茄紅素標準品(0.1μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL,溶劑為流動相),分別進樣檢測,繪制 “濃度 - 峰面積" 標準曲線(R2≥0.999,符合朗伯 - 比爾定律);待測樣品進樣后,根據其番茄紅素色譜峰的峰面積,從標準曲線上查得對應的濃度。
需注意:番茄紅素的順式結構和全反式結構在 472nm 處的吸光系數略有差異(順式結構吸光系數略低),因此標準品需采用與樣品中番茄紅素結構比例相近的混合標準品(如全反式與順式混合標準品),以確保定量準確性;若樣品經烹飪處理(如番茄醬),順式結構比例升高,需調整標準品的結構比例,或采用峰面積歸一化法進行定量。
4. 結果計算:番茄紅素含量的最終換算
番茄紅素的含量通常以 “mg/100g 鮮重" 或 “mg/100g 干重" 表示(食品樣品),或 “mg/kg" 表示(保健品制劑),茁彩生物通過以下步驟計算:
第一步:根據標準曲線查得待測樣品溶液中番茄紅素的濃度(c,單位:μg/mL);
第二步:計算樣品中番茄紅素的總質量(m):m = c × V × D(其中 V 為待測樣品溶液的定容體積,單位:mL;D 為前處理稀釋倍數,包括提取溶劑體積 / 樣品質量、濃縮倍數);
第三步:計算樣品中番茄紅素的含量(C):C = (m × 10?3) / (M × 10?2) = m / (100M)(其中 M 為樣品的初始質量,單位:g;10?3 為 μg 換算為 mg 的系數,10?2 為 g 換算為 100g 的系數),最終結果單位為 “mg/100g 鮮重 / 干重"。
示例:取 5g 番茄鮮重樣品,經提取、純化后定容至 5mL,標準曲線查得濃度為 2μg/mL,稀釋倍數為 1(無額外稀釋),則番茄紅素含量 = (2μg/mL × 5mL) / (100 × 5g) = 10μg / 500g = 0.02μg/g = 2mg/100g 鮮重(符合成熟番茄的番茄紅素含量范圍)。
這種檢測方法的優勢在于:
高特異性:通過反相 C18 色譜柱分離,結合 472nm 特征吸收峰,可有效區分番茄紅素與其他類胡蘿卜素及雜質,定性準確性達 99% 以上;
高靈敏度:檢測限低至 0.01μg/mL,可準確檢測低含量樣品(如未成熟番茄、西瓜果肉)中的番茄紅素;
高重復性:保留時間和峰面積的相對標準偏差(RSD)小于 2%,結果穩定可靠;
適用性廣:可用于新鮮蔬果(番茄、西瓜、葡萄柚)、加工食品(番茄醬、番茄汁、沙拉醬)、保健品制劑(番茄紅素膠囊、片劑)等多種樣品,為食品營養分析、保健品質量控制、農產品育種(如高番茄紅素番茄品種篩選)提供關鍵技術支持。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,化工儀器網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。