恒奧德儀薄層成像儀的操作使用原理
主要基于?薄層色譜(TLC)分離技術(shù)?與?光學(xué)成像檢測技術(shù)?的結(jié)合,用于對(duì)薄層板上分離后的化合物斑點(diǎn)進(jìn)行?定性、定量及圖像分析?。其核心原理和操作流程如下:
?一、基本工作原理?
?分離原理?:樣品點(diǎn)在薄層板(固定相)上,通過流動(dòng)相(溶劑)在毛細(xì)作用下展開,各組分因與固定相的吸附/分配能力差異而分離,形成不同Rf值的斑點(diǎn)。
?檢測原理?:利用特定波長光源(如紫外、可見光)照射展開后的薄層板,通過檢測斑點(diǎn)的:
?吸收光?(反射/透射吸收法)
?熒光發(fā)射?(熒光斑點(diǎn))
?熒光淬滅?(暗斑)
由高分辨率CCD或CMOS相機(jī)捕獲圖像,再經(jīng)專業(yè)軟件分析斑點(diǎn)位置、強(qiáng)度、面積等參數(shù),實(shí)現(xiàn)定量與可視化。
?二、典型操作流程?
?樣品制備?
將待測樣品溶解,用毛細(xì)管或自動(dòng)點(diǎn)樣器點(diǎn)于薄層板上,干燥后放入展開室。
?薄層展開?
在密閉展開缸中,流動(dòng)相沿薄層板上升,帶動(dòng)樣品組分分離。
?上機(jī)成像?
將展開并干燥的薄層板置于成像儀暗箱內(nèi)中心位置。
安裝對(duì)應(yīng)光源(如254 nm / 365 nm紫外燈、白光燈),關(guān)閉艙門避免雜散光干擾。
?參數(shù)設(shè)置?
選擇檢測模式(反射/透射、吸收/熒光)。
設(shè)置波長、分辨率(通常20–200 μm/像素)、曝光時(shí)間、掃描區(qū)域。
?圖像采集?
啟動(dòng)相機(jī)(如12位高線性CCD),在無閃光燈條件下拍攝圖像,確保動(dòng)態(tài)或靜態(tài)成像清晰。
?圖像處理與分析?
使用專用軟件(如winCATS、Tstar、安卓App等)自動(dòng):
校正背景與色彩
標(biāo)記斑點(diǎn)
計(jì)算Rf值、峰面積、百分含量