自主研發(fā)的單域抗體（sdAb），能夠以低皮摩爾（pM）親和力識別小尺寸、理性設(shè)計的ALFA標(biāo)簽（SRLEEELRRRLTE）。

ALFA標(biāo)簽是一種新型的、理性設(shè)計的表位標(biāo)簽（SRLEEELRRRLTE），屬于NanoTag專有技術(shù)的一部分。與大多數(shù)傳統(tǒng)表位標(biāo)簽不同，ALFA標(biāo)簽是基于理性考慮開發(fā)的，這使得我們能夠為其配備所需的特性。結(jié)合三種sdAb，ALFA標(biāo)簽為在幾乎所有生化和生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用中使用單一表位標(biāo)簽提供了一個d特的平臺。該系統(tǒng)的完整特性可以在2019年發(fā)表在《自然·通訊》上的一篇開源文章中找到。

這種sdAb（N1505）是克隆1G5，它是ALFA系統(tǒng)家族中對ALFA標(biāo)簽親和力z強（約26 pM）的成員。它也是我們在FluoTag®-X2抗ALFA（N1502）、重組抗ALFA抗體（rHcAb；N1582-N1586）、抗ALFA雙特異性抗體（N1590-N1592）、sdAb抗ALFA Halo融合蛋白（N1541）以及ALFA選擇器ST（N1511）中使用的相同克隆。

艾美捷sdAb抗ALPHA生物素：

貨號：N1505-BIOTIN

克隆號： 1G5

宿主： 駱駝

生產(chǎn)方式： 大腸桿菌

應(yīng)用： 免疫熒光（IF）、西方印跡（WB）

稀釋比例： 與抗ALFA HRP的ELISA檢測中，稀釋比例為1:5000

靶標(biāo)： ALFA標(biāo)簽

特異性： 識別ALFA標(biāo)簽（SRLEEELRRRLTE）。

配方：DBCO和生物素偶聯(lián)的sdAb（C末端1:1標(biāo)記）從pH 7.4的PBS中凍干。未偶聯(lián)的sdAb從5 mM KPi（pH 6.0）、300 mM NaCl、0.5 mM EDTA（pH 6.0）中凍干。使用250 uL純?nèi)ルx子水復(fù)溶后可立即使用，或使用250 uL無菌50%甘油復(fù)溶后在-80°C下保存。

偶聯(lián)辣根過氧化物酶（HRP）的sdAb從HRP保護(hù)緩沖液中凍干，應(yīng)使用200 uL純?nèi)ルx子水復(fù)溶后在4°C下保存，或使用200 uL高純度、無菌的50%甘油復(fù)溶后在-80°C下保存。

分子量： 16.0 kDa

消光系數(shù)： 18638

運輸條件： 常溫

保存條件：含有凍干試劑的安瓿可在2 - 8°C下保存長達(dá)12個月。復(fù)溶后，在-80°C下保存最長6個月。工作液可在-20°C下保存最長4周。

注意事項： 僅限體外使用/僅用于研究。無毒、無害、無傳染性。

實驗示例：

使用抗ALFA sdAb（編號N1505-DBCO，稀釋比例1:500）對表達(dá)ALFA-波形蛋白融合蛋白的HeLa細(xì)胞進(jìn)行免疫染色，該抗體攜帶一條10核苷酸的單鏈DNA，通過3D DNA-PAINT成像。直方圖指的是由一個小黃矩形標(biāo)記的區(qū)域，在該區(qū)域中，盡管兩條單獨的波形蛋白絲相距僅約90納米，但它們?nèi)员磺逦直妗６ㄎ痪葹?/span>5.2納米。該圖修改自Gotzke等人2019年發(fā)表在《自然·通訊》上的文章。

文獻(xiàn)參考：

G?tzke H, Kilisch M, Martínez-Carranza M, Sograte-Idrissi S, Rajavel A, Schlichthaerle T, Engels N, Jungmann R, Stenmark P, Opazo F, Frey S. The ALFA-tag is a highly versatile tool for nanobody-based bioscience applications. Nat Commun. 2019 Sep 27;10(1):4403. doi: 10.1038/s41467-019-12301-7. PMID: 31562305; PMCID: PMC6764986.

Honsa M, Pachmayr I, Heinze L, et al. Imaging Ligand-Receptor Interactions at Single-Protein Resolution with DNA-PAINT. Small Methods. Published online April 3, 2025. doi:10.1002/smtd.202401799 (IF; DNA-PAINT; A549 cells)

Cheetham-Wilkinson IJ, Sivalingam B, Flitton C, et al. RpH-ILV: Probe for lysosomal pH and acute LLOMe-induced membrane permeabilization in cell lines and Drosophila. Sci Adv. 2025;11(1):eadr7325. doi:10.1126/sciadv.adr7325 (N1505-Biotin; WB; HEK293T; fruit fly S2 cells)