FluoTag-Q抗GFP來源于一種內部開發的單域抗體（sdAb），它能夠以高親和力和特異性識別GFP及其最常見的衍生物。

生物和生物發光領域的突破始于20世紀60年代，當時下村修及其同事從水母Aequorea victoria中發現了一種發光蛋白。然而，直到20世紀90年代初，綠色熒光蛋白（GFP）序列才被克隆，并作為一種熒光標記在異源生物體中使用。如今，在一個開源數據庫中可以找到超過800條各種熒光蛋白的記錄，其中目前可用的變體在熒光蛋白數據庫“fpbase"中。

FluoTags可以配備單個熒光團以實現更定量的讀出（FluoTag-Q），每個單域抗體可以結合兩個熒光團（FluoTag-X2），NanoTag還開發了一種混合兩種sdAb的結合物，它們同時與目標蛋白結合，每個都帶有兩個熒光團（FluoTag-X4）。

艾美捷FluoTag-X4抗GFP AbberiorStar460：

貨號：N0304-Ab460-L

克隆號：1H1

宿主：羊駝

生產來源：大腸桿菌

應用：免疫熒光（IF）

注意：不建議使用該品進行Western blot檢測蛋白質，因為sdAb主要識別天然/折疊的蛋白質。

稀釋比例：1:1000（相當于最終濃度為5 nM）

靶標：GFP

特異性：識別GFP（綠色熒光蛋白）和常見的GFP衍生物，如EGFP、mEGFP、Sirius、tSapphire、Cerulean、eCFP、mTurquoise、acGFP、Emerald、超橢圓pHluorin、paGFP、superfolder GFP、eYFP、mVenus和Citrine。可能也識別尚未測試的其他衍生物。

配方：從含有2% BSA（美國來源）的PBS（pH 7.4）中凍干單個sdAb克隆。用200 µL去離子水中的50%甘油復溶。如果適用，建議添加0.1%疊d化鈉作為防腐劑。復溶后濃度為5 µM。

儲存：含有凍干蛋白的安瓿可在4°C下保存6個月。建議用含有0.1%疊d化鈉防腐劑的50%無菌甘油水溶液復溶蛋白。通過分裝復溶蛋白以減少凍融循環次數。長期保存在-80°C下，最長可達6個月。工作分裝可在-20°C下保存長達4周。不建議將復溶后的蛋白在4°C下保存。

注意事項：僅用于體外/研究目的。無毒、無害、無傳染性。

使用FluoTag-Q Atto 647N抗GFP sdAb（貨號N0301-At647N，稀釋比例1:500）對表達TOM70-GFP報告蛋白的PFA固定3T3細胞進行免疫染色（GFP信號以綠色表示，相應的FluoTag信號以紅色表示，兩個通道的合并以黃色表示）。細胞核通過DAPI染色（藍色）可視化。

文獻參考：

de Jong-Bolm D, Sadeghi M, Bogaciu CA, et al. Protein nanobarcodes enable single-step multiplexed fluorescence imaging. PLoS Biol. 2023;21(12):e3002427. Published 2023 Dec 11. doi:10.1371/journal.pbio.3002427 (IF; HEK293)

Shaib AH, Chouaib AA, Chowdhury R, et al. One-step nanoscale expansion microscopy reveals individual protein shapes. Nat Biotechnol. Published online October 9, 2024. doi:10.1038/s41587-024-02431-9

Candelas Serra M, Kuchtiak V, Kubik-Zahorodna A, et al. Characterization of Mice Carrying a Neurodevelopmental Disease-Associated GluN2B(L825V) Variant. J Neurosci. 2024;44(31):e2291232024. Published 2024 Jul 31. doi:10.1523/JNEUROSCI.2291-23.2024 (Cat. No. N0301-Ab635P-L; IF; STED; mouse hippocampal neurons)