產(chǎn)品概述

由艾美捷Bethyl Laboratories推出的Myc Tag抗體（山羊源）（貨號：A190-104A）是一種親和純化的多克隆抗體，特異性識別人c-Myc蛋白表位標簽（氨基酸殘基410-419：EQKLISEEDL）。該抗體以全IgG形式提供，濃度為1 mg/ml，經(jīng)固相親和層析純化，未偶聯(lián)標記物。產(chǎn)品適用于酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）、免疫細胞化學（ICC）、免疫沉淀（IP）和Western Blot（WB）等多種檢測場景，是重組蛋白表達分析中廣泛使用的工具抗體。

免疫原與特異性

本抗體的免疫原為一段合成肽，對應人c-Myc蛋白第410至419位氨基酸殘基（序列：EQKLISEEDL），該肽段與鑰孔血藍蛋白（KLH）偶聯(lián)后用于免疫山羊。通過將該合成肽固定于固相載體，采用親和層析技術從免疫血清中分離純化抗體，確保高特異性識別Myc表位。

Myc標簽是蛋白工程中常用的表位標簽之一，可被融合至目標蛋白的N端或C端。本抗體適用于檢測帶有c-Myc標簽（EQKLISEEDL）的重組蛋白，能夠識別天然構象或變性條件下的標簽序列。

技術參數(shù)

參數(shù) | 詳細信息

靶標 | Myc Tag (c-myc表位，410-419)

反應性 | 通過融合蛋白識別人源表位序列

應用 | ELISA、ICC、IP、WB

宿主 | 山羊

克隆性 | 多克隆

形式 | 全IgG

同型 | IgG

偶聯(lián)物 | 未偶聯(lián)

純度 | 抗原親和純化

抗原種屬 | 人

濃度 | 1 mg/ml

儲存條件 | 2–8 °C

保質(zhì)期 | 收貨后1年

緩沖液 | 磷酸鹽緩沖液（PBS），含0.09%疊d化鈉

濃度測定方法

免疫球蛋白濃度采用比爾定律測定，其中1 mg/ml IgG在280 nm波長下的吸光度（A280）為1.4。

實驗方案

重要提示

并非所有列出的應用都已由我們的實驗室進行明確驗證。用戶應根據(jù)自身實驗體系進行優(yōu)化和驗證。以下稀釋度和用量為通用推薦范圍，實際條件可能需要調(diào)整。

Western Blot (WB)

推薦稀釋度：1:1,000 – 1:30,000

封閉及稀釋液：5%脫脂牛奶-TBST

一抗孵育：過夜孵育（4°C）

二抗：驢抗山羊IgG重鏈和輕鏈抗體（貨號A50-101P）

免疫沉淀 (IP)

推薦用量：1–4 µg抗體/mg細胞裂解物

備注：對于高表達的Myc標簽蛋白，可使用較低用量（1 µg/mg）；對于低表達水平樣本，可增加至4 µg/mg。建議預先評估目標蛋白豐度。

酶聯(lián)免疫吸附測定 (ELISA)

檢測稀釋度：1:1,000 – 1:30,000

包被稀釋度：1:100 – 1:500（用于包被ELISA板）

免疫細胞化學 (ICC)

推薦稀釋度：1:100 – 1:400

固定方案：推薦使用4%多聚甲醛固定細胞，然后用0.1% Triton X-100透化（如檢測胞內(nèi)標簽）。具體條件需根據(jù)細胞類型優(yōu)化。

靶點背景信息

Myc標簽簡介

c-Myc是一種轉錄因子，參與細胞增殖、分化和凋亡調(diào)控。其C端含有一段高度保守的短肽序列（第410–419位：EQKLISEEDL），被稱為Myc表位。該表位被廣泛用作重組蛋白的融合標簽，原因如下：

分子量小：僅10個氨基酸，對目標蛋白的結構和功能影響極小。

通用性強：有大量高質(zhì)量商業(yè)抗體可供選擇，便于檢測和免疫沉淀。

靈活性高：可融合至目標蛋白的N端或C端，且不影響大多數(shù)蛋白的天然折疊。

檢測靈敏度高：Myc標簽抗體通常具有高親和力，可檢測低豐度表達蛋白。

應用場景

帶有Myc標簽的重組蛋白廣泛應用于以下領域：

蛋白表達驗證：通過WB或ICC確認轉染細胞中目標蛋白的表達及亞細胞定位。

蛋白-蛋白相互作用：利用Myc標簽抗體進行免疫共沉淀（Co-IP），捕獲Myc標簽融合蛋白及其結合伙伴。

蛋白純化：Myc標簽可用于親和層析純化（需固定Myc抗體或肽段），并在溫和條件下采用競爭性肽段洗脫。

定量檢測：通過ELISA對帶有Myc標簽的抗原或抗體進行定量分析。

產(chǎn)品優(yōu)勢與功能特點

1. 宿主選擇優(yōu)勢（山羊源）：與傳統(tǒng)兔源或小鼠源Myc抗體相比，山羊源抗體在多重染色或多重免疫沉淀中具有優(yōu)勢，可與其他鼠源或兔源抗體兼容，避免宿主交叉干擾。尤其在免疫沉淀后WB檢測中，若使用山羊源一抗，可選用相應的驢抗山羊二抗，避免與小鼠或兔源IP抗體重鏈產(chǎn)生交叉。

2. 超高稀釋比范圍（WB 1:1,000–1:30,000；ELISA 1:1,000–1:30,000）：高親和力保證了極低用量即可獲得強信號，1 mg/ml濃度配合寬稀釋范圍，單支抗體可支持大量檢測，經(jīng)濟性顯著。

3. 親和純化工藝：采用Myc表位肽段固相親和層析，相比蛋白A/G純化，抗原特異性更高，非特異性背景更低，尤其適用于IP和ICC等需要低背景的應用。

4. 廣泛的應用兼容性：抗體在ELISA（包被與檢測）、ICC、IP和WB中均有推薦起始條件，覆蓋了標簽蛋白檢測的主要技術平臺，用戶無需為不同實驗購買不同抗體。

5. 穩(wěn)定儲存配方：PBS緩沖液（pH 7.4）配合0.09%疊d化鈉防腐劑，2–8°C下穩(wěn)定保存1年。無需冷凍，避免反復凍融導致的抗體聚集和活性下降。

6. 明確的質(zhì)量控制：基于比爾定律的A280定量，確保批次間濃度一致性。生產(chǎn)過程中使用KLH偶聯(lián)免疫原，并經(jīng)肽段親和純化，抗體純度及特異性有保障。