呼吸道合胞病毒（RSV）感染是兒童住院的重要原因，并且是全球1歲以下嬰兒死亡的主要原因之一。RSV屬于肺炎病毒屬，含有一個單鏈、不分節段的負義RNA基因組，長度約為15,200個核苷酸。病毒顆粒表面有三種蛋白質：小疏水蛋白（SH）、附著蛋白（G）和融合蛋白（F）。G和F蛋白是主要的抗原蛋白。根據G蛋白的序列，RSV被分為A和B兩個亞群。

RSV核蛋白（N）對病毒的組裝和復制至關重要。它通過包裹整個病毒RNA基因組形成核糖核蛋白復合體，從而實現病毒的包膜化。RSV核蛋白在A和B亞群的RSV分離株中高度保守，氨基酸序列同源性超過95%。

Cell Biolabs的RSV核蛋白ELISA試劑盒是一種用于檢測和定量RSV核蛋白的酶免疫分析試劑盒。該ELISA試劑盒的抗體能夠識別RSV A型和B型的核蛋白。試劑盒的檢測靈敏度為313皮克/毫升RSV核蛋白。每個試劑盒提供的試劑足以進行最多96次檢測，包括標準曲線和RSV裂解樣本。

作為Cell Biolabs全國總代理，艾美捷科技強烈推薦Cell Biolabs銷售產品呼吸道合胞病毒核蛋白ELISA試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

呼吸道合胞病毒核蛋白ELISA試劑盒檢測原理

檢測原理

將抗RSV核蛋白單克隆抗體吸附在微量滴定板上。樣本或標準品中的RSV核蛋白會與吸附在板上的抗體結合；加入FITC標記的抗RSV核蛋白多克隆抗體，與被第一抗體捕獲的RSV核蛋白結合。經過孵育和洗滌步驟后，加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的抗FITC單克隆抗體，與FITC標記的抗RSV核蛋白多克隆抗體結合。在洗滌步驟中去除未結合的HRP標記的抗FITC抗體，然后向孔中加入與HRP反應的底物溶液。根據樣本中RSV核蛋白的含量，會形成相應比例的有色產物。通過加入終止液終止反應，并在450納米處測量吸光度。使用重組RSV核蛋白標準品制備標準曲線，然后確定樣本中RSV核蛋白的濃度。

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試劑盒組成

盒子1（常溫運輸）

1. 抗RSV核蛋白抗體包被板（部件號51711B）：一條96孔板。

2. FITC標記抗RSV核蛋白多克隆抗體（部件號51712C）：一瓶20微升。

3. 辣根過氧化物酶標記抗FITC單克隆抗體（部件號310811）：一瓶20微升。

4. 檢測稀釋液（部件號310804）：一瓶50毫升。

5. 10倍病毒裂解緩沖液（部件號51693B）：一瓶15毫升，含有200 mM Tris，pH 7.5，1500 mM NaCl，10% Triton X-100，1% SDS。

6. 10倍洗滌緩沖液（部件號310806）：一瓶100毫升。

7. 底物溶液（部件號310807）：一瓶1毫升2，琥珀色瓶。

8. 終止液（部件號310808）：一瓶12毫升。

盒子2（藍冰運輸）

1. 重組RSV核蛋白標準品（部件號51713D）：一瓶100微升，2微克/毫升重組人RSV核蛋白（Met1-Leu391），含有BSA的PBS溶液。

未提供材料

1. RSV樣本：純化病毒或未純化的病毒上清液

2. 量離心機

3. 10微升至1000微升可調節單通道微量移液器及一次性吸頭

4. 50微升至300微升可調節多通道微量移液器及一次性吸頭

5. 多通道微量移液器儲液槽

6. 能在450納米處讀數的微孔板讀數儀（620納米為可選參考波長）

保存方法

收到試劑盒后，將RSV核蛋白標準品分裝并保存在-20℃，避免反復凍融。其他所有組分保存在4℃。

結果示例

以下圖表展示了典型的RSV核蛋白ELISA檢測結果。僅可將以下數據作為參考，不應用于解釋實際結果。

文獻參考：

1. Afonso, C. L. et al. (2016) Taxonomy of the order Mononegavirales. Arch. Virol. 161, 2351–2360.

2. Shi, T. et al. (2017) Global, regional, and national disease burden estimates of acute lower respiratory infections due to respiratory syncytial virus in young children in 2015: a systematic review and modelling study. Lancet 390, 946–958.

3. Bhella D., Ralph A., Murphy L. B., Yeo R. P. (2002) Significant differences in nucleocapsid morphology within the Paramyxoviridae. J Gen Virol 83, 1831–1839.

4. Tawar R. G., Duquerroy S., Vonrhein C., Varela P. F., Damier-Piolle L., Castagné N., MacLellan K., Bedouelle H., Bricogne G.. (2009) Crystal structure of a nucleocapsid-like nucleoprotein-RNA complex of respiratory syncytial virus. Science 326, 1279–1283.

Cell Biolabs公司位于美國加利福尼亞州南部重要的工業城市圣迭戈（San Diego），是有名的細胞學試劑品牌，作為前沿的細胞學分析檢測試劑盒生產商，為生物技術和研究類客戶提供好的基于細胞功能研究以及疾病等方面的g端產品和技術服務。產品主要涵蓋細胞研究、細胞信號通路和蛋白質生物學、代謝研究、病原體和毒素、干細胞研究等領域。全球眾多大學、政府研究機構、生物、制藥企業的科研實驗室均在使用Cell Biolabs的產品。  

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