聯系電話
上海雅吉生物科技有限公司
初級會員·9年
- 聯系人：
- 高杰
- 電話：
- 021-34661276
- 手機：
- 15821073967
- 售后：
- 15301693058
- 傳真：
- 021-34661276
- 地址：
- 上海市閔行區元江路5500號第1幢5658室
- 網址：
- www.yajimall.com
掃一掃訪問手機商鋪
產品簡介
| 供貨周期 | 一周 | 貨號 | YS2120C |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 科研實驗 |
產品介紹
人T淋巴細胞白血病細胞JM培養條件
培養條件 | 空氣，95%；CO2，5% ；37℃ | ||
生長特性 | 詳見説明 | 凍存條件 | 無血清凍存液 |
| 背景 | 更新中。。。 | ||
傳代方法 | 1:2~1:3 | 傳代情況 | 2天換液 |
備注 | 傳5-8代使用嘌呤霉素（1-4ug/ml）篩選鞏固一下 本庫的細胞僅用于科研工作，未經許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細胞轉讓給第三者。 | ||
二、收貨后處理
復蘇細胞處理方法：培養至良好狀態后灌滿培養液并封好瓶口是運輸細胞的最好辦法。收到細胞用75%酒精噴灑整個細胞瓶，嚴格無菌后將細胞瓶放置培養箱中靜置2-4小時以穩定細胞狀態。靜置后顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照保存（最好40x,100x,200x各一張），前三天照片是重要售后依據，不提供照片默認收到狀態良好。
凍存細胞處理方法：收到細胞后，觀察泡沫箱中干冰是否有剩余，凍存管是否完好無損是否有解凍情況，若發現干冰汽化或凍存管有解凍破損現象，請及時拍照并與我們聯系。如果細胞簽收三天內未與我們聯系，則默認為收貨良好。復蘇第一管如有活性問題，請及時聯系我們，技術人員與您溝通指導后再復蘇第二管，未與我方聯系擅自復蘇第二管出現問題不予售后。
細胞培養步驟
a、細胞傳代：如果未超過80%匯合度時，將瓶裝的培養液收集至離心管中，留5ml培養基，放入37℃、5%CO2孵箱培養；如果細胞密度超80%，即可進行傳代培養。
貼壁細胞步驟如下：
1) 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次；
2) 加1mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置培養箱中消化 1min ，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后，加6ml含10%血清的培養基終止消化；
3) 輕輕吹打細胞，脫落后吸出至離心管中，1000 rpm離心5-8min，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻；
4) 按5-6mL每瓶補加培養基，將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 mL培養基的6cm培養皿中或者T25培養瓶中。
（即1個T25瓶傳代接種至2個T25瓶或者2個6cm的培養皿）
懸浮細胞傳代步驟如下：
1、半換液法
半換液處理，豎著培養瓶在培養箱靜置1小時左右，輕輕吸掉3ml左右培養基，然后補給3ml的培養基，如果培養基變色慢，可直接加500ul左右FBS，傳代的時候可以直接補給5ml培養基 分兩個培養瓶培養，一般這樣傳代3次左右可以離心傳代一次，去掉死細胞。
2、離心換液法
如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中1000rpm，離心5min，棄去上清，補加1-2mL培養液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
b、細胞凍存：
1、細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄T25培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；
2、添加0.25%消化液約1ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入5ml培養液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心 5min；
3、 棄上清，沉淀細胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液（貨號：C7001），混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細胞直接放入-80℃冰箱即可，如后期要將細胞轉入液氮罐中，則需在-80℃冰箱 中存放24小時以上再轉入液氮罐中。
C、細胞復蘇：
1、從液氮中取出細胞凍存管（注意佩戴防護面具），快速將其置入 37℃水浴中解凍， 直至凍存管中無結晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2、將凍存管中的細胞移至含 5ml 培養基的15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、棄上清，沉淀用5ml培養基重懸，接種至T25培養瓶，放于37℃,5%CO2細胞培養箱中培養；
4、第二天，換用新鮮培養基繼續培養。
注意事項：有些細胞貼壁不牢，在運輸過程中容易發生細胞脫落，這是正常現象。如脫離較多可將培養瓶所有培養液收集至離心管，1000rpm離心5min，收集上清作過渡培養（后期對比培養），沉淀加入1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化1-2分鐘后，加5ml培養基終止反應。再離心，棄上清，加1-2ml培養基重懸。然后按1:2比例進行分瓶傳代（兩個T25），補充新的培養基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO2細胞培養箱中培養。
歡迎新老客戶咨詢訂購：人T淋巴細胞白血病細胞JM
更多PCR試劑盒相關產品如下：
葶藶子PCR鑒定試劑盒Semenlepidii
天南星PCR鑒定試劑盒Rhizomaarisaematis
天麻PCR鑒定試劑盒Rhizomagastrodiae
天花粉PCR鑒定試劑盒Radixtrichosanthis
天冬PCR鑒定試劑盒Radixasparagi
桃仁PCR鑒定試劑盒Semenpersicae
檀香PCR鑒定試劑盒Lignumsantalialbi
太子參PCR鑒定試劑盒Radixpseudostellariae
鎖陽PCR鑒定試劑盒Herbacynomorii
酸棗仁PCR鑒定試劑盒Semenziziphispinosae
絲瓜絡PCR鑒定試劑盒Retinervusluffaefructus
熟地黃PCR鑒定試劑盒Radixrehmanniaepreparata
首烏藤PCR鑒定試劑盒Caulispolygonimultiflori
石韋PCR鑒定試劑盒Foliumpyrrosiae
使君子PCR鑒定試劑盒Fructusquisqualis
石斛PCR鑒定試劑盒Herbadendrobii
柿蒂PCR鑒定試劑盒Calyxkaki
石菖蒲PCR鑒定試劑盒Rhizomaacoritatarinowii
升麻PCR鑒定試劑盒Rhizomacimicifugae
生姜PCR鑒定試劑盒Rhizomazingiberisrecens
伸筋草PCR鑒定試劑盒Herbalycopodii
麝香PCR鑒定試劑盒Moschus
蛇床子PCR鑒定試劑盒Fructuscnidii
山茱萸PCR鑒定試劑盒Fructuscorni
山楂PCR鑒定試劑盒Fructuscrataegi
山藥PCR鑒定試劑盒Rhizomadioscoreae
山豆根PCR鑒定試劑盒Radixsophoraetonkinensis
山慈菇PCR鑒定試劑盒Pseudobulbuscremastraeseupleiones
沙苑子PCR鑒定試劑盒Semenastragalicomplanati
桑枝PCR鑒定試劑盒Ramulusmori
桑葉PCR鑒定試劑盒Foliummori
桑椹PCR鑒定試劑盒Fructusmori
桑寄生PCR鑒定試劑盒Herbataxilli
桑白皮PCR鑒定試劑盒Cortexmori
三七PCR鑒定試劑盒Radixnotoginseng
三棱PCR鑒定試劑盒Rhizomasparganii
肉桂PCR鑒定試劑盒Cortexcinnamomi
肉豆蔻PCR鑒定試劑盒Semenmyristicae
肉蓯蓉PCR鑒定試劑盒Herbacistanches
人參PCR鑒定試劑盒Radixginseng
相關產品
