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99590-86-0，EGTA AM是鈣螯合劑EGTA的細(xì)胞膜滲透性衍生物
閱讀：81 發(fā)布時(shí)間：2025-8-18| 提 供 商 | 陜西新研博美生物科技有限公司 | 資料大小 | 944.7KB |
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化學(xué)性質(zhì)：
溶解性：可溶于DMSO（20 mg/mL）、DMF。
密度：1.303。
沸點(diǎn)：664.2±55.0 °C（預(yù)測(cè)值）。
酸度系數(shù)（pKa）：3.35±0.50（預(yù)測(cè)值）。
外觀：無色至淺黃色粘稠液體。
基本參數(shù)：
CAS：99590-86-0
英文名：EGTA AM，EGTA Acetoxymethyl ester
分子式：C26H40N2O18
分子量：668.60
規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)：1g、5g、10g
試劑廠家：陜西新研博美生物科技有限公司
相關(guān)應(yīng)用：
細(xì)胞內(nèi)鈣信號(hào)研究：
抑制鈣振蕩：50 μM EGTA AM可降低異步興奮性突觸后電流（aEPSC）至對(duì)照的58.9%。
緩沖胞質(zhì)鈣濃度：用于研究鈣依賴性酶、通道蛋白等。
與其他技術(shù)的聯(lián)用：
熒光探針校準(zhǔn)：與MOPS-EGTA緩沖液配合，建立標(biāo)準(zhǔn)鈣濃度曲線。
神經(jīng)元研究：調(diào)節(jié)突觸傳遞精度，降低動(dòng)作電位抖動(dòng)（如從±1.51 ms降至±1.08 ms）。
使用方法：
溶液配制：
儲(chǔ)備液制備：EGTA AM需溶于無水DMSO或DMF，避免水解。建議濃度為2-5 mM。避光、密封分裝，-20℃保存，有效期6-12個(gè)月。
工作液稀釋：取2X工作液，與等體積細(xì)胞培養(yǎng)基混合，終濃度為2.5 μM EGTA AM、0.04% Pluronic F-127、1 mM丙磺舒。
細(xì)胞加載步驟：
細(xì)胞準(zhǔn)備：將細(xì)胞接種于培養(yǎng)板，確保生長(zhǎng)至70%-80%密度，棄去舊培養(yǎng)基。
染料加載：將EGTA AM工作液加入細(xì)胞中，37℃、5% CO?孵育20-120分鐘。全程避光，避免DMSO或EGTA AM光降解。
去除未結(jié)合探針：孵育結(jié)束后，用含1 mM丙磺舒的緩沖液替換染料溶液，洗滌2-3次，去除表面殘留探針。
作用機(jī)制：
EGTA AM是鈣螯合劑EGTA的細(xì)胞膜滲透性衍生物。其結(jié)構(gòu)核心是EGTA分子上的四個(gè)羧酸基團(tuán)被乙酰氧基甲酯（AM）修飾，賦予其脂溶性，使其能夠被動(dòng)擴(kuò)散穿過細(xì)胞膜。進(jìn)入細(xì)胞后，AM基團(tuán)被胞內(nèi)酯酶水解，釋放活性形式的EGTA，特異性螯合胞內(nèi)鈣離子。
膜滲透與水解：
被動(dòng)擴(kuò)散：EGTA AM的AM酯基團(tuán)使其脂溶性增強(qiáng)，可自由穿過細(xì)胞膜進(jìn)入胞質(zhì)。
酯酶水解：胞內(nèi)酯酶將AM基團(tuán)水解，生成非脂溶性EGTA，滯留于細(xì)胞內(nèi)，避免被排出。
鈣離子螯合：
高選擇性結(jié)合：EGTA對(duì)Ca2+的親和力高于Mg2+，解離常數(shù)（Kd）分別為60.5 nM和1-10 mM，選擇性達(dá)10?倍。
生理pH適應(yīng)性：在生理pH（7.4）下，EGTA的表觀pKa為6.91，確保其在細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定螯合Ca2+。
結(jié)構(gòu)式：
相關(guān)試劑產(chǎn)品：
Carboxyl diazirine alkyne
L-Azidonorleucine hydrochloride
Cyclic AMP sodium
EGTA-AM
Fluorescein Diacetate
Fmoc-Arg(Pbf)-OH
Tri-GalNAc-DBCO
DBCO-PEG4-Biotin
N-Hydroxysuccinimide
4-Amino
UDP-GalNAz disodium
Rhodamine B isothiocyanate
4-Azido-L-phenylalanine
Palmitic acid sodium
5-Ethynyluridine
Tris(benzyltriazolylmethyl)amine
Ethylenediaminetetraacetic acid
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