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TAMRA-SE廣泛應用于生物研究中,可以用于熒光標記
閱讀:58 發布時間:2025-9-18熒光特性:
TAMRA-NHS是由四甲基羅丹明(TAMRA)的羧基與琥珀酰亞胺酯(NHS酯)結合而成的熒光染料。TAMRA 是一種橙紅色熒光染料,具有高熒光強度和良好的光穩定性。NHS酯基團能夠與生物分子上的伯胺基團(-NH?)發生共價結合,從而實現熒光標記。
基本參數:
CAS:321862-17-3
中文名:四甲基羅丹明-活性酯
英文名:TAMRA-NHS,TAMRA-SE
規格標準:1mg、5mg、10mg
試劑廠家:陜西新研博美生物科技有限公司
使用方法:
一、標記前的準備
材料準備:準備好TAMRA-NHS、目標生物分子(如蛋白質、肽、氨基修飾的寡核苷酸等)、反應緩沖液(如pH 7.2 - 8.5的碳酸氫鈉/碳酸鈉緩沖液)以及純化所需的試劑和設備(如透析袋、凝膠過濾柱等)。
TAMRA-NHS的溶解:TAMRA-NHS在水中的溶解性較差,通常需要先將其溶解在有機溶劑中。建議使用二甲基亞砜(DMSO)或二甲基甲酰胺(DMF)等有機溶劑溶解TAMRA-NHS,配制成適當濃度的母液。
二、標記反應
反應條件:將溶解好的TAMRA-NHS母液加入到含有目標生物分子的反應緩沖液中,使TAMRA-NHS與生物分子上的伯胺基團發生共價結合。反應通常在室溫下進行,反應時間一般為數小時。
標記比例:根據目標生物分子的性質和實驗需求,調整TAMRA-NHS與生物分子的摩爾比。一般來說,對于蛋白質標記,TAMRA-NHS與蛋白質上賴氨酸殘基的摩爾比可以為1:10 - 1:50。
三、純化
透析法:將標記后的反應混合物裝入透析袋中,用適當的緩沖液進行透析,以去除未反應的TAMRA-NHS和小分子雜質。透析時間一般為數小時至過夜,期間需要定期更換透析液。
凝膠過濾法:使用凝膠過濾柱(如Sephadex G-25等)對標記后的產物進行純化。根據標記產物和雜質的分子大小差異,選擇合適的凝膠過濾介質,通過柱層析分離純化標記產物。
相關應用:
TAMRA-NHS 和 TAMRA-SE 廣泛應用于生物研究中,主要用于熒光標記。
蛋白質和抗體標記:通過與蛋白質中的賴氨酸氨基反應,形成穩定的酰胺鍵,可用于免疫檢測、流式細胞術分析和熒光顯微鏡成像。
核酸標記:可用于標記核酸,用于熒光探針的構建。
細胞成像:可用于標記細胞表面的蛋白質,用于細胞成像和細胞內分子的運輸研究。
多色熒光實驗:其橙紅色熒光適合與綠色或藍色熒光染料組合使用,減少光譜重疊,實現多通道檢測。
包裝:

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